2.6. Патология азотистого обмена.

Одним из характерных нарушений азотистого обмена является белковая недостаточность, которая является следствием не только дефицита белка, но и ряда тяжелых заболеваний даже при достаточном поступлении белка с пищей. Причины белковой недостаточности: малобелковое питание или плохое усвоение белков пищи, непроходимость пищевода, патология пищеварительной канала системы.

Результатом этих состояний являются: отрицательный азотистый баланс, гипопротеинемии (снижение концентрации белков в сыворотке крови до 30-50 г/л, в норме – 65-85 г/л) и нарушения коллоидно-осмотического и водно-солевого обменов (развитие отеков).

При тяжелых формах пищевых дистрофий, например, при «квашиоркоре» (в переводе «золотой или красный мальчик») – заболевании, которое распространено среди детей развивающихся стран, наблюдаются тяжелые поражения печени, остановка роста, отечность, атония мышц, анемия, резкое снижение сопротивляемости организма инфекциям. У лиц негроидной расы волосы приобретают красно-коричневый оттенок. Болезнь часто заканчивается летальным исходом.

При белковой недостаточности наблюдается резкое снижение интенсивности процессов дезаминирования, трансаминирования, биосинтеза аминокислот и синтеза мочевины в печени. Эти нарушения обусловлены нарушением ферментативных функций печени и других органов. Следствием их являются накопление аминокислот в крови, экскреция с мочой свободных аминокислот (до 10-20 г/сут, в норме – 1г/сут) и резкое снижение образования и выделения мочевины с мочой.

Аминоацидурия – дефект белков одной из транспортных систем аминокислот в почках, где происходит их реабсорбция, сопровождающийся потерей их с мочой в 3-5 раз больше нормы.

Цистинурия – дефект белка, транспортирующего цистин, приводит к повышенному выделению с мочой преимущественно цистина и образованию цистиновых камней в почках.

Кетонурия – болезнь, сопровождающаяся появлением мочи с запахом ''кленового сиропа'', является следствием недостаточности декарбоксилазы кетопроизводных аминокислот, т.е. валина, лейцина и изолейцина. В результате нарушения окислительного декарбоксилирования происходит повышение содержания в крови этих аминокислот и их кетопроизводных, а также выделение их с мочой. Моча таких больных имеет характерный запах ''кленового сиропа''. Клинически у таких детей наблюдается рвота, периодические судороги, мышечная ригидность.

3. Лабораторно-практические работы:

3.1. Определить количество мочевины в сыворотке крови.

Принцип метода: мочевина образует с диацетилмонооксимом в сильнокислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов железа красный комплекс, который фотометрируют.

Ход работы:

Отмерить (мл)	Проба	Эталон
Сыворотка Калибровочный растворр мочевины 8,33 ммоль/л Рабочий раствор	0,1 - 2,0	- 0,1 2,0
Перемешивают и нагревают точно 10 мин на кипящей водяной бане. Быстро охлаждают в токе воды и в пределах 15 мин измеряют оптическую плотность пробы (А1) и эталона (А2)

А₁

Расчет: мочевина (ммоль/л) = ------- х 16,65 А₂ = 0,41

А₂

Нормальные величины: мочевина 3,3-8,3 ммоль/л.

3.2. Определить количество креатинина в моче.

Берут 2 пробирки. В опытную пробирку отмеривают 0,1 мл мочи (2 капли), прибавляют 0,1 мл 10% раствора NаОН (2 капли) и 0,15 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты (3 капли). Одновременно во вторую контрольную пробирку отмеривают 0,1 мл стандартного раствора креатинина (2 капли), 0,1 мл 10% раствора NаОН (2 капли) и 0,15 мл пикриновой кислоты (3 капли). Взбалтывают, оставляют на 5 мин, доводят дистиллированной водой до объема 10 мл, тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Фотометрируют на ФЭК с зеленым светофильтром.

Определяют оптическую плотность опытного и контрольного растворов. По формуле определяем количество креатинина в моче:

0,1хЕ₂

Х = ----------- , где

Е₁

Х – количество мг креатинина в 0,1 мл мочи;

0,1 – количество мг креатинина в 0,1 мл стандартного раствора;

Е₁ – оптическая плотность контрольного раствора;

Е₂ – оптическая плотность опытного раствора.

В норме в сутки выводится с мочой креатинина у мужчин – 1,0-2,0 г, у женщин – 0,8-1,8 г. Коэффициент

пересчета в единицы СИ (ммоль/сут) равен 8,84.

Норма у мужчин – 8,8-17,7 ммоль/сут, у женщин – 7,1-15,9 ммоль/сут.

3.3. Выделить креатинина из мышечной ткани.

1. Поместить в пробирку 0,5 г измельченной мышечной ткани, добавить 2 мл дистиллированной

воды и хорошо перемешать стеклянной палочкой.

2. Продолжая помешивать, осадить белки добавлением 2 мл 20% раствора сульфосалициловой кислоты.

3. Осадок белка отфильтровать.

4. Отмерить в пробирку 1 мл фильтрата, добавить к нему 1 мл 10% раствора НСl и поставить в кипящую

водяную баню на 30 мин. При этом креатин переходит в креатинин.

5. Достать пробирку из водяной бани, добавить в нее 1 мл раствора пикриновой кислоты и 2 мл 15%

раствора NаОН.

6. Наблюдают характерное оранжевое окрашивание.