- •Введение
- •Глава 1 Проведение экспериментов по обучению клеток культуры гиппокампа
- •1.1 Описание эксперимента
- •1.2 Описание системы регистрации и стимуляции сигналов с использованием мультиэлектродной матрицы
- •1.3 Электрическая стимуляция культуры нейронов
- •1.4 Протокол эксперимента
- •Контрольные вопросы
- •Глава 2. Эксперимент по обучению клеток культуры гиппокампа
- •2.1 Компоненты экспериментальной установки
- •2.2 Подготовка экспериментальной установки
- •2.3 Методика регистрации сигналов с использованием мультиэлектродной матрицы
- •2.4 Стимуляция культуры нейронов
- •Контрольные вопросы
- •Глава 3. Исследование спонтанной активности культуры клеток гиппокампа
- •3.1 Детектирование импульсов в сигнале
- •3.2 Детектирование спонтанных пачек
- •Глава 4 Обработка экспериментальных данных
- •4.1 Детектирование импульсов активности
- •4.2 Анализ растра активности
- •4.3 Анализ пачек активности
- •Литература
- •Оглавление
- •Глава 1. Проведение экспериментов по обучению клеток культуры гиппокампа
- •Глава 2. Эксперимент по обучению клеток культуры гиппокампа
- •Глава 3. Исследование спонтанной активности культуры клеток гиппокампа.................................................................................................................15
- •Глава 4 Обработка экспериментальных данных.................................................18
- •Исследование биоэлектрической активности нейронных сетей в культурах гиппокампа: стимуляция, регистрация и анализ
- •Учебно-методическое пособие
- •603950, Нижний Новгород, пр. Гагарина, 23.
- •603600, Г. Нижний Новгород, ул. Большая Покровская, 37
4.2 Анализ растра активности
Для представления растра активности, полученного на предыдущем шаге, используется частотно-временная диаграмма. Данная диаграмма вычисляется следующим образом: активность делится на временные промежутки времени, установленные в поле "Time bin (ms)" (по умолчанию 50 мс), для каждого промежутка времени вычисляется суммарное количество импульсов на всех электродах (Рис. 4.3). Функция построения частотно-временной диаграммы выполняется с помощью кнопки "SpikeRate plot". Анализируемый файл должен иметь расширение ".med".
Рисунок 4.3. Частоно-временная диаграмма активности культуры клеток.
4.3 Анализ пачек активности
Анализ характеристик активности включает в себя детектирование и статистическую обработку характеристик пачек активности. Функция анализа характеристик пачек выполняется с помощью кнопки "Find burst" в главном окне программы. Анализируемый файл растра активности должен иметь расширение ".txt".
Функция анализа пачек вычисляет и строит распределения следующих характеристик пачечной активности в сети:
1. Межпачечный интервал (мс) - временные промежутки между пачками (Рис. 4.4 А)
2. Длительность пачек (с) (Рис. 4.4 Б)
3. Число импульсов в секунду внутри пачек (Рис. 4.4 В)
4. Паттерн активации - среднее время возникновения первых импульсов после начала пачки на каждом электроде. Цветом обозначено время возникновения импульса (Рис. 4.4 Г)
5. Частотно-временной профиль пачки - среднее число импульсов на каждом электроде за каждые 10 мс после начала пачки (Рис. 4.4 Д). Усреднение производится по всем пачкам
6. Частота импульсов в секунду для каждого электрода (Рис. 4.4 Е). Цветом обозначено значение частоты импульсов
7. Частота импульсов в секунду внутри пачек для каждого электрода (Рис. 4.4 Ж)
АБ
В Г
Д
ЕЖ
Рисунок 4.4. Характеристики пачек. А - Распределение межпачечных интервалов (мс). Б - Распределение длительностей пачек (с). В - Распределение числа импульсов в секунду внутри пачек. Г - Паттерн активации (среднее время возникновения первых импульсов после начала пачки на каждом электроде). Координаты каждой квадратной области соответствуют положению электрода на мультиэлектродной матрице. Цветом обозначено время возникновения импульса. Д - Частотно-временной профиль пачки активности культуры клеток. По оси абсцисс - время после начала пачки, по оси ординат - номер электрода. Цветом обозначено среднее число импульсов на определённом электроде за каждый 50-и миллисекундный промежуток времени по всем пачкам.
Также программа в рабочем окне Matlab выводит статистически проанализированные характеристик пачек. Так как распределения анализируемых величин чаще имеют не нормальную форму, рассчитываются медианы и медианные квадратичные ошибки характеристик. Список вычисляемых характеристик следующий:
Bursts_number - общее число найденных пачек.
Mean_Burst_Duration - средняя длительность пачек.
STD_Burst_Duration - средняя квадратичная ошибка длительности пачек.
Mean_InterBurstInterval - среднее значение межпачечного интервала.
STD_InterBurstInterval - средняя квадратичная ошибка межпачечного интервала.
Median_InterBurstInterval - медиана межпачечного интервала.
MAD_InterBurstInterval - медианная квадратичная ошибка межпачечного интервала.
Median_Burst_Duration - медиана длительности пачек.
MAD_Burst_Duration - медианная квадратичная ошибка длительности пачек.
Median_Burst_FiringRate - медиана числа импульсов в секунду внутри пачек.
MAD_Burst_FiringRate - медианная квадратичная ошибка числа импульсов в секунду внутри пачек.
Spikes_per_sec - среднее число импульсов в секунду.
Контрольные вопросы
1. Что такое растр активности и как он строится?
2. Что такое частотно-временная зависимость и как она строится?
3. Какой диапазон значений временного интервала при построении частотно-временной диаграммы приемлем для отображения пачек активности, длительностью 0.1 и 1 секунда.