- •Харьков хгму 2002
- •Маркерные признаки материнско - плодовой инфекции..
- •Пути проникновения инфекции к плоду.
- •Эпидемиология, клиника, диагностика и лечение токсоплазмоза.
- •Клиника врожденного токсоплазмоза.
- •Клиника приобретенного токсоплазмоза.
- •Диагностика.
- •Дифференциальный диагноз
- •Лечение.
- •Профилактика.
- •Показания для обследования на токсоплазмоз.
- •Наиболее распространенные варианты течения врожденного токсоплазмоза приведены в таблице.
- •В качестве примера приводим выписку из истории болезни.
- •Эозинофилы – 2%
- •Вирусные внутриутробные инфекции детей. Краснуха.
- •Классификация клинических форм краснухи.
- •Клиника, диагностика и лечение цитомегаловирусной инфекции (цмви).
- •1. Введение
- •Эпидемиологические аспекты цмви.
- •Пути передачи инфекции.
- •Клинические проявления цмви.
- •Цмви у детей.
- •Клинические симптомы врожденной цмви.
- •Клинические симптомы цмви в постнатальный период.
- •Цмви иммунокомпетентных лиц
- •Клиника мононуклеоза.
- •Цмв и постперфузионный синдром.
- •Клинические симптомы.
- •Цмв и диабет.
- •Цмв и гепатиты.
- •Цмв и гематологические нарушения.
- •Цмв и патология желудочно - кишечного тракта.
- •Иммунитет - как фактор течения инфекции.
- •Цмв и нервная патология.
- •Лабораторная диагностика
- •Серологические тестьі
- •Реакция связывания комплемента и реакция нейтрализации.
- •Культуральные методы.
- •Быстрый культуральный метод с использованием моноклональных ат.
- •Сравнительный анализ культуральных методов.
- •Непосредственное определение цмв в клинических образцах
- •Лечение и профилактика цмви
- •Заключение
- •Герпетическая инфекция.
- •Выраженность диагностических признаков
- •Хламидийная инфекция в неонатологии
- •Клиническая картина хи у недоношенных новорожденных детей
- •Диагностика хи у недоношенных новорожденных детей
- •Лечение хи у недоношенных новорожденных детей
- •Хгму, 310022, Харьков, просп. Ленина, 4 Издательский отдел Содержание.
Диагностика.
Значительный полиморфизм клинических проявлений при токсоплазмозе и разнообразный характер течения болезни практически исключают возможность постановки диагноза только на основании клинической картины в связи с чем возрастает роль лабораторных исследований, включающих паразитологические и иммунологические методы.
Паразитологические методы исследования выявляют возбудителя при непосредственной микроскопии материала, в гистологических срезах внутренних органов или путем выделения возбудителя на восприимчивых лабораторных животных с помощью биопроб. С этой целью используют кровь, ликвор, плевральную жидкость, пунктат лимфатических узлов и костного мозга, удаленные миндалины, биопсированные лимфоузлы, печень, мышцы, соскоб из полости матки, органы абортированного плода и мертворожденных, а в летальных случаях - головной мозг, печень, селезенку, лимфоузлы и другие органы. Для прямого микроскопирования из исследуемого материала готовят мазки-отпечатки на предметных стеклах, высушивают, фиксируют метиловым спиртом 3-5 мин, или, смесью Никифорова, состоящей из равных частей этилового спирта и эфира - 20 мин. Затем препараты окрашивают по Романовскому и микроскопируют с иммерсионной системой (5х90). Обнаружение в препаратах токсоплазм (эндозоитов, ооцист или цист) при определенной клинической картине подтверждает диагноз. Метод прямой микроскопии несложен и доступен, но не всегда результативен.
Выделение токсоплазм методом биопробы. Сущность метода состоит в заражений восприимчивых животных взвесью исследуемого материала. При этом в организме животных происходит количественное накопление возбудителя, что облегчает его выявление. Из лабораторных животных наиболее пригодны для биопроб белые мыши, но можно использовать и морских свинок, кроликов, хомяков.
Метод биопроб может применяться на различных этапах инфекционного процесса, но наиболее эффективен при острой форме заболевания. Для постановки биопроб используют те же субстраты, что и для прямой микроскопии. Из материала готовят суспензию с обязательным добавлением антибиотиков (1 000 ед. пенициллина и 0,05 гр. стрептомицина на 1 мл взвеси) и по 0,5-1 мл внутрибрюшинно и подкожно вводят мышам. За животными устанавливают наблюдение. В положительных случаях у мышей происходит генерализация процесса, развивается заболевание, заканчивающееся гибелью. У таких мышей в брюшной полости образуется экссудат, содержащий токсоплазмы. Токсоплазмы легко обнаружить в мазках-отпечатках из печени, селезенки, легких. У мышей, погибших через 2 недели и позднее берут для исследования головной мозг на предмет выявления цист токсоплазм.
Паразитологические методы диагностики не пользуются широкой популярностью из-за большой трудоемкости, необходимости соблюдения режимных условий при работе с живым возбудителем. Прямая микроскопия и биопробы не имеют абсолютно доказательного значения, так как их отрицательный результат не исключает токсоплазмозной инфекции.
Иммунологические исследования. В подавляющем большинстве случаев при диагностике токсоплазмоза ориентируются на данные серологических исследований (реакция с красителем Сэбина- Фельдмана -РК, реакция связывания комплемента - РСК, реакция непрямой гемагглютинации - РНГА, реакция агглютинации - РА, реакция непрямой иммунофлюоресценции - РНИФ, реакция иммуноферментного анализа -ИФА), обнаруживающих наличие специфических антител в сыворотке крови обследуемого человека.
Для серологических реакций у обследуемых лиц забирают натощак из вены 5-10 мл крови в сухую стерильную пробирку без консервантов и антикоагулянтов. Пробирку с кровью ставят на 1-2 часа в термостат при 37°С а затем помещают в холодильник для ретракции сгустка. Отстоявшуюся сыворотку отсасывают в стерильную сухую пробирку и хранят в холодильнике при +4-6°С до начала исследования. При необходимости длительного хранения сыворотку лучше сохранять при -20-70°С. В реакциях используют не гемолизированные и не проросшие сыворотки.
РК является золотым стандартом серологии при токсоплазмозе. Авторы впервые использовали в этом тесте неспособность токсоплазм окрашиваться метиленовой синькой в присутствии токсоплазменных антител. Антитела, выявляемые РК, обычно появляются уже через несколько дней после заражения, обычно в конце первой недели, достигают высоких титров в последующие несколько недель и сохраняются много лет, в более низких титрах пожизненно. Несмотря на неоспоримые достоинства, РК не лишена весьма существенных недостатков, которые ограничивают ее применение: она довольно сложна, трудоемка и требует живых токсоплазм, что возможно не во всех лабораториях.
Такие методы как РСК, РА, РНГА также могут бить использованы для серологической диагностики токсоплазмоза. РНИФ и ИФА -популярные методы серодиагностики во всем мире, так как комбинируют тщательность и точность методов с легкостью выполнения. РНИФ близка по своим достоинствам к РК. В последние годы РНИФ завоевала широкую известность и зарекомендовала себя как высокочувствительный тест, легко воспроизводимый в любой лаборатории, располагающей люминисцентным микроскопом. Антитела, определяемые РНИФ, появляются к концу первой недели после заражения и сохраняются длительное время. Сущность метода состоит в выявлений специфических антител в исследуемой сыворотке с помощью токсоплазменного антигена и маркированной антисыворотки.
Иммуноферментный анализ. В последние годы широко вошла в практику реакция иммуноферментного анализа (ИФА). В трех европейских лабораториях (Франция, Нидерланды, Швеция) было проведено сравнительное изучение диагностической ценности всех тестов, используемых в серологической диагностике токсоплазмоза. Получена хорошая корреляция результатов. Чувствительность тестов представлена в порядке: ИФА>РК>РНГА>РНИФ>РСК. Последующие исследования показали высокую чувствительность и воспроизводимость ИФА.
Полимеразная цепная реакция. В последние годы для подтверждения диагноза токсоплазмоза используют ПЦР (полимеразноцепная реакция). Наибольшее значение этот тест имеет у пациентов с иммуносупрессией, т.е. у больных при пересадке различных органов, у лиц с ВИЧ-инфекцией, онкологическими и вирусными заболеваниями. Известно, что у больных СПИДом часто развивается токсоплазмозный энцефалит, при котором серологические тесты дают низкие титры антител. У таких больных обследование с помощью ПЦР спинномозговой жидкости и крови позволяет выявить токсоплазмозную инфекцию. Имеются данные об использовании ПЦР в глазной практике. Обычно при токсоплазмозных увеитах и хориоретинитах титры токсоплазмозных антител очень низки. Обследование методом ПЦР глазной жидкости помогало правильно поставить диагноз. Получены данные об успешной пренатальной диагностике конгенитального токсоплазмоза с помощью ПЦР при исследовании амниотической жидкости.