- •Введение
- •3. Получение клеток, обладающих высоким терапевтическим потенциалом, путем культивирования стволовых клеток вне организма в специальных средах.
- •Isbn 9965-21-135-3
- •Введение
- •3. Получение клеток, обладающих высоким терапевтическим потенциалом, путем культивирования стволовых клеток вне организма в специальных средах.
- •0,4 I (щЫ @ 1 фуппi
- •1 О,б °щ °'т 0,6э я1 группа
- •Литература
- •Получение обогащенных фракций гск/пк из костного мозга крыс методом изопикнического центрифугирования на градиентах перкола
- •2. Цели и задачи концепции
- •1. Биотехнология стволовых клеток
- •2. Фундаментальные исследования биологии стволовых клеток
- •3. Доклинические исследования и клинические испытания препаратов стволовых клеток
- •4. Клиническое применение препаратов стволовых клеток
- •Содержание
- •Паспорт.
- •1. Паспорт программы
- •2. Введение
- •3.4.1. Разработка методов получения, обработки и длительного
- •4. Цель и задачи программы
- •Основные направления Программы
- •5.2. Механизмы реализации программы
- •II. Создание кластера клеточных медицинских технологий.
- •6. Необходимые ресурсы и источники финансирования
- •7. Ожидаемые результаты от реализации программы
- •Условные сокращения
- •Содержание
- •Алиев Мухтар Алиевич
0,4 I (щЫ @ 1 фуппi
0,3 ■ 2 rpynnd
0|2 I D3rpynna
q
УИИИЯКДЬ-^ИюдД
ПИЯ Р
До 15
сут.
ЗОсут. 45сут.
Сроки исследования
Диаграмма Щ
Уровень ИЛ-4 у добровольцев
2,5 А"
2,13
2
0 95 Ш 1 гРУппг1
ДО 15 сут. ЗОсут. 45 сут.
Сроки исследования
72
Диаграмма 13
Уровень ИЛ-17 у добровольцев
0,9" ГТ \
0,8
06 °'55 0,5
До 15 сут. 30 сут. 45 сут.
Сроки исследования
повышение уровня ИЛ-4, которое сохранялось на довольно высоком уровне через 30 дней и к 45-му дню наблюдения достигало до исходных величин.
ИЛ-17, который также можно отнести к активационным интерлейкинам, вырабатывается CD-4+ лимфоцитами [14,15]. ИЛ-17 является стимулятором гранулоцитопоэза, усиливает образование G-CSF. У 1-й группы обследованных уровень ИЛ-17 изменялся следующим образом (рис. 13): через 15 дней после введения ГСК содержание ИЛ-17 незначительно снижалось, затем через 30 дней увеличивалось до 0,51 пг/л, после чего через 45 дней наблюдения понижалось до исходного уровня. Во 2-й группе отмечалось увеличение
Диаграмма 14
Уровень ИЛ-10
1,4
1,2 1,08
До 15 сут. 30 сут. 45 сут.
Сроки исследования
73
содержания ИЛ-17 к 30-му дню и снижение ниже исходных величин через 451 дней наблюдения. Уровень ИЛ-17 у лиц, составляющих 3-ю группу, был резко! повышен через 30 и 45 дней исследования, в 2 раза превышая исходный уровень.!
Супрессорный ИЛ-10 является важнейшим регулятором иммунного ответа,! подавляющим активность макрофагов и Тх-1-клеток и способствует реали-1 зации биологических эффектов Тх-2 (диаграмма 14). Кроме того, ИЛ-10 cno-J собен затормозить синтез провоспалительных цитокинов ИЛ-1, ФНО, ИФ-т| [11]. Вместе с тем ИЛ-10 повышает пролиферацию В-лимфоцитов и секрецию иммуноглобулинов. Изучение уровня содержания ИЛ-10 показало несколько иную картину, чем динамика изменений содержания других цитокинов. Так, и 1-й группе через 15 дней отмечалось резкое понижение его величины, затем через 30 дней концентрация ИЛ-10 увеличивалась, не доходя до исходного щ через 45 дней снова понижалась. Аналогичная динамика отмечалась во 2-я группе, однако показатели ИЛ-10 были более высокими. В 3-й группе уровени ИЛ-10 почти в 2 раза возрастал по сравнению с исходным через 15 и 30 днем наблюдения и резко снижался через 45 дней. Следует отметить, что содержания ИЛ-10 во всех группах к концу исследования резко снижалось.
Чрезвычайно важными биологическими эффектами обладает ИЛ-Я (диаграмма 15), который стимулирует хемотаксис нейтрофилов, субпопуля! ций Т-лимфоцитов и базофилов, а также повышает сродство нейтрофилов Л моноцитов к эндотелиальным клеткам, тем самым способствуя развитии! реакции острой фазы. Выброс хемокина на 30-е сутки наблюдения, особенно щ лиц 2-й и 3-й групп, является признаком развития острых реакций на ГСК. I
Следует отметить, что через 45 дней ИЛ-8 у лиц 1-й и 2-й групп полностью отсутствовал, в то время как в 3-й группе этот цитокин оставался на довольна высоком уровне.
Диаграмма 15л
Уровень ИЛ-8 у добровольцев
U
* yjJ5—- ^^| - UfeMb—
0,4 0,23 □ 3 групгкЯ
j^^^^^^^^^^JH ИДИ пмщ^н ^^F
До 15сут. ЗОсут. 45сут.
Сроки исследования
74
Активаторы В-лимфоцитов:
ИЛ-12 служит посредником между макрофагами и лимфоцитами, ^рожденным и приобретенным иммунитетом, что проявляется в способности регулировать соотношение между клеточным и гуморальным иммунитетом через стимуляцию дифференцировки Т-хелперов в Т х 1, (стимулирует активность NK-клеток, обусловливает дифференцировку цитотоксических лимфоцитов). ИЛ-12 способствует активации В-клеток (особенно В 1-клеток), следовательно, повышает уровень аутоантител.
ИЛ-12 обусловливает выход стволовых кроветворных клеток в периферическую циркулирующую кровь и формирование экстрамедуллярных очагов кроветворения (диаграмма 16).
ИЛ-13 — фактор роста В-лимфоцитов, влияет на функцию моноцитов и В-лимфоцитов, повышает антигенпредставляющую активность клеток (диаграмма 17). Кроме того, он индуцирует синтез IgE В-лимфоцитами [ 19].
Уровень ИЛ-13 также отличается выраженной дозозависимостью. Так, содержание его у лиц 3-й группы резко увеличивается уже через 15 дней после введения ГСК пуповинной крови и постепенно снижается через 30 и 45 дней наблюдения, в то время, как в 1-й и 2-й группах уровень ИЛ-13 снижается ниже исходных величин.
Уровень лейкоз-ингибирующего фактора (LIF, диаграмма 18) определялся с учетом данных о том, что он подавляет дифференцировку плюрипотентных гемопоэтических стволовых клеток, способствует пролиферации гемопоэти-ческих клеток-предшественников, а также стимулирует продукции острофазных белков.
В этом исследовании также отмечается высокая дозозависимость содер-
Диаграмма 16
Уровень ИЛ-12 у добровольцев
W 1
1,5 JIM