2 курс / Гистология / Описание_препаратов_к_лабораторным_работам_по_цитологии_и_гистологии
.pdfем препарата по зигзагообразной линии, причем в каждом зигзаге подсчитывается количество клеток в двух-трех полях зрения. Полученные результаты заносим в таблицу, приведенную ниже, и сравниваем с нормальной формулой крови.
Лейкограмма
|
Норма, % |
Результаты подсчёта, % |
Лейкоциты |
100 |
|
Базофилы |
0-1 |
|
Эозинофилы |
2-4 |
|
Нейтрофилы: |
|
|
палочко-ядерные |
2-4 |
|
сегменто-ядерные |
55-65 |
|
Лимфоциты |
25-35 |
|
Моноциты |
6-8 |
|
При различных заболеваниях может изменяться число разных видов лейкоцитов. Например, при воспалении увеличивается число нейтрофилов, при глистной инвазии, бронхиальной астме, различных аллергических состояниях - эозинофилов, при туберкулезе - лимфоцитов и т. д. Эти изменения являются важнейшими диагностическими признаками.
Занятие 6. Мышечная ткань
К мышечной ткани относят гладкую мышечную ткань, поперечнополосатую мышечную ткань и мышечную ткань сердца.
Препарат 1. Гладкая мышечная ткань. Окраска: гематоксилин-эозин.
Развивается этот тип ткани из мезенхимы и имеет клеточное строение. На препарате нужно найти пучки гладких мышечных волокон. Волокна - клетки - миоциты веретенообразной формы. ядро расположено в центре клетки, имеет эллипсоидную форму. Отметьте соединительнотканные прослойки из коллагеновых и эластических волокон, разбивающие мышечную ткань на пучки первого и второго порядков.
Зарисовать фрагменты ткани в продольном и поперечном разрезах.
Препарат 2. Поперечно-полосатая мышечная ткань.
Происходит этот тип ткани из мезодермы. Она имеет симпластическое строение, то есть границы между клетками отсутствуют. Ее структурная и функциональная единица - мышечное волокно, имеющее поперечную исчерченность. Волокна ограничены оболочкой - сарколеммой, под которой располага-
10
ются ядра. В цитоплазме (саркоплазме) мышечного волокна упорядоченно располагаются миофибриллы. Они имеют чередующиеся участки с разными оптическими свойствами: диски А - анизотропные (темные) и диски И - изотропные (светлые). Зарисуйте продольные и поперечные срезы ткани.
Препарат 3. Мышечная ткань сердца.
Это тоже поперечно-полосатая мышца. Но мышечное волокно в этой мышце составлено из клеток. В микроскоп при большом увеличении видны вставочные диски (как бы пересекающие эти волокна). Они представляют собой границы соседних клеток, то есть миофибриллы одной клетки не проникают в соседнюю. Каждая мышечная клетка имеет сарколемму, саркоплазму с располагающимися в ней миофибриллами и овальное ядро, лежащее в центре волокна. Волокна ветвятся, образуя сеть. Зарисовать участок продольного среза миокарда.
Занятие 7. Нервная ткань
Нервная ткань состоит из нервных клеток - нейронов (или нейроцитов), имеющих отросчатую форму, нейроглии - разнообразных клеток, выполняющих функции опоры, трофики и секреции и нервных волокон - отростков нейронов.
Препарат 1. Нейроны и нейроглия. Спинной мозг собаки. Окраска: импрегнация серебром.
На поперечном срезе спинного мозга в центре в форме бабочки серое вещество, состоящее из тел нейронов. В передних рогах серого вещества найти и на большом увеличении микроскопа рассмотреть тела нервных клеток и отростки. Крупные светлые ядра. В центре - ядрышко. Обратить внимание на присутствие в цитоплазме нейронов густой сети нейрофибрилл.
Между нейронами располагаются клетки разнообразной формы - нейроглия. По периферии спинного мозга расположено белое вещество. Оно образовано отростками нервных клеток. В центре волокон - осевой цилиндр (аксон) в виде темной точки. Вокруг осевого цилиндра - оболочка, образованная глиальными
клетками.
Зарисовать фрагмент серого и белого вещества.
Препарат 2. Тигроидная субстанция Нисля. Окраска: толуидиновый синий.
Эта специфическая структура нервных клеток выявляется при окраске основными красителями в виде базофильных глыбок, поэтому окрашенные нервные клетки имеют пятнистый вид. Она представляет собой гранулярную эндоплазматическую сеть с множеством рибосом. В этих участках идет активный синтез белка. Морфология глыбок меняется в зависимости от функционального состояния нейрона.
11
Необходимо рассмотреть и зарисовать несколько нейронов с тигроидной субстанцией в цитоплазме.
Препарат 3. Мякотные волокна седалищного нерва лягушки. Окраска: импрегнация серебром.
На препарате под малым увеличением, а затем под большим рассмотреть мякотные (миелиновые) волокна. Они имеют оболочку из жироподобного вещества - миелина. Эту оболочку образуют шванновские глиальные клетки, закручивающиеся вокруг аксона. Между Шванновскими клетками - свободные участки аксона. Их называют перехватами Ранвье. Зарисовать волокно.
Препарат 4. Безмякотные волокна селезеночного нерва быка.
Безмякотные (миелиновые) волокна не имеют мякотной оболочки, но все равно защищены шванновскими клетками. В цитоплазму этих клеток как бы вставлено несколько волокон. Зарисовать безмиелиновые волокна, отметив ядра шванновских клеток.
ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ
Занятие 8. Строение органов пищеварения
Препарат 1. Язык. Листовидные сосочки языка кролика. Окраска: гематоксилин-эозин.
Слизистая оболочка языка на верхней поверхности образует выросты - сосочки. У человека имеется три типа сосочков: нитевидные, грибовидные и желобоватые. Два последних типа содержат вкусовые луковицы с нервными окончаниями, возбуждающимися при контакте с пищевыми веществами. У некоторых животных их особенно много на сосочках, называемых листовидными.
На препарате видно, что сосочки покрыты многослойным плоским эпители-
ем. В толщу эпителия вдаются вторичные соединительнотканные сосочки. На боковых поверхностях сосочка в составе эпителия видны вкусовые луковицы, выделяющиеся светлой окраской. Их надо рассматривать на большом увеличении. Оканчиваются они вкусовой порой. В соединительнотканном слое слизистой видны слизистые и серозные железы в виде концентрических групп клеток (фиолетового цвета). Есть они в расположенной ниже мышечной ткани языка.
Препарат 2. Тонкая кишка щенка. Окраска: гематоксилин-эозин.
Найти собственную пластинку слизистой. В ее составе слизистую оболочку.
На ней пальцевидные выросты - ворсинки. Они покрыты однослойным призма-
тическим эпителием. В нем видны бокаловидные клетки (крупные светлые),
12
выделяющие слизь. Ниже ворсинок расположены складки слизистой - крипты.
Под ним - тонкий мышечный слой слизистой. Далее - подслизистая основа из рыхлой соединительной ткани. Ниже - мышечная оболочка из двух слоев мышц: внутреннего - кольцевого и наружного - продольного. На поверхности кишки серозная оболочка из мезотелия и подстилающего его слоя соединительной ткани.
Препарат 3. Толстая кишка собаки. Окраска: гематоксилин-эозин.
Обратите внимание на то, что в слизистой оболочке толстой кишки в отличие от тонкой нет ворсинок. Но эпителий слизистой (однослойный призматический) имеет очень много бокаловидных клеток и образует много крипт. Сразу под ними - тонкая мышечная оболочка слизистой. Ниже лежит подслизистая основа, двухслойная мышечная и серозная оболочки, сходные с таковыми в тон-
ком кишечнике.
Препарат 4. Печень свиньи. Окраска: гематоксилин-эозин.
Хорошо видно дольчатое строение печени. Дольки в виде неправильных многоугольников разделены междольковыми перегородками из рыхлой волокнистой соединительной ткани. В них надо найти и при большом увеличении рассмотреть триады, включающие междольковые вену (большой диаметр, в просвете - эритроциты), артерию (небольшой диаметр, толстая стенка) и желчный проток (канал уплощен). В центре долек - центральные вены. От них радиально расходятся заполняющие дольку печеночные балки, состоящие из печеночных клеток - гепатоцитов.
Препарат 5. Дно желудка собаки. Окраска: конго красная.
При малом увеличении на поверхности слизистой находим желудочные ям-
ки, выстланные однослойным призматическим эпителием. Ямки продолжаются в узкие клетки фундальных желез. Железы имеют трубчатую форму, а внизу слабо ветвятся. В составе желез можно рассмотреть два типа клеток: главные (фиолетовые, мелкие), выделяющие пепсиноген, который в кислой среде превращается в пепсин, и обкладочные (красноватые, более крупные), выделяющие соляную кислоту. Ниже - мышечная пластинка слизистой. Затем - подслизистая основа из рыхлой соединительной ткани с кровеносными сосудами. Мышечная оболочка желудка. Серозная оболочка.
Занятие 9. Строение органов дыхания
13
Система органов дыхания представляет собой совокупность воздухоносных путей и газообменных отделов.
Препарат 1. Трахея собаки. Окраска: гематоксилин-эозин.
Рассмотреть и зарисовать препарат, начав с вогнутой стороны трахеи. Слизи-
стая оболочка ее выстлана многорядным призматическим реснитчатым эпите-
лием. Его реснички движутся в направлении, противоположном движению воздуха, поступающего при вдохе. На свободной поверхности каждой из клеток этого мерцательного эпителия до 250 ресничек. Здесь же видны неокрашенные бокаловидные клетки, выделяющие слизистый секрет, к которому прилипают частицы пыли. Под эпителием слизистая оболочка имеет собственную пластинку слизистой. Она представлена рыхлой соединительной тканью с большим количеством эластических волокон. Собственная пластинка слизистой оболочки переходит в подслизистый слой из рыхлой соединительной ткани, в котором видны концевые отделы белково-слизистых (смешанных) желез. Они образова-
ны клетками с крупными фиолетовыми ядрами. Далее располагаются надхрящница и большой слой гиалинового хряща. Затем надхрящница наружной поверхности и адвентициальная оболочка из рыхлой соединительной ткани, содержащая сосуды и нервы.
Препарат 2. Легкое кошки. Окраска: гематоксилин-эозин.
На малом увеличении микроскопа найти крупный бронх. Детали его строения рассмотреть и зарисовать на большом увеличении. Выстланы бронхи многоряд-
ным цилиндрическим реснитчатым эпителием. Он собран на препарате в гар-
мошку. Изредка встречаются бокаловидные клетки. Под эпителием собственная пластинка слизистой из рыхлой соединительной ткани. Затем - мышечная пластинка слизистой, представляющая собой кольцевой слой гладких мышц. Она лучше выражена в бронхах среднего диаметра. Далее - подслизистая основа с концевыми отделами бронхиальных желез. Затем - пластинки гиалинового хряща в фиброзно-хрящевых оболочках. Наконец, адвентициальная оболочка стенки бронха. Зарисуйте стенку мелкого бронха, обратив внимание на отсутствие бронхиальных желез в подслизистой основе. Найдите и зарисуйте бронхиолу. Ее стенка представлена однослойным кубическим реснитчатым эпителием. Под ним - слой коллагеновой соединительной ткани. Затем - гладкие мышечные клетки. Зарисуйте фрагмент легочной ткани, указав альвеолярный ход (вытянутая трубочка, стенка которой представлена альвеолами), альвеолярный мешочек (образован рядом расположенными альвеолами), альвеолы и межальвеолярные перегородки.
14
Занятие 10. Строение органов выделения
Препарат 1. Почка крысы. Окраска: гематоксилин-эозин.
Снаружи почка покрыта фиброзной (волокнистой) капсулой, содержащей жировые клетки. Не всегда эта капсула есть на препаратах. Далее расположено
корковое вещество почки. В нем присутствуют почечные тельца и извитые ка-
нальцы нефронов. Почечные тельца имеют округлую форму. При большом увеличении микроскопа видны сосудистый клубочек , состоящий из кровеносных капилляров, полость капсулы в виде узкой щели вокруг клубочка и наружный листок капсулы, состоящий из плоских клеток. Внутренний листок капсулы срастается с клубочком и поэтому не виден. Извитые канальцы имеют вид поперечно перерезанного канальца-трубочки, стенка которого состоит из одного слоя клеток с круглыми крупными ядрами.
Постарайтесь различить при большом увеличении микроскопа проксимальные отделы (клетки стенок имеют щеточную кайму) и дистальные отделы (клетки стенок не имеют щеточной каемки) извитых канальцев. мозговое вещество почки имеет вид (форму) пирамид, в которых отсутствуют почечные тель-
ца. Состоит оно из петель Генле и собирательных трубочек. Под микроскопом имеет вид продольно перерезанных канальцев-трубочек, идущих в одном направлении. Между канальцами в прослойках соединительной ткани лежат кровеносные сосуды с эритроцитами.
Препарат 2. Мочеточник быка. Окраска: гематоксилин-эозин.
Слизистая мочеточника образует высокие складки. Образована она переход-
ным эпителием. Под ним - собственная пластинка слизистой оболочки, пред-
ставляющая собой плотную соединительную ткань. Затем - мышечная оболочка, состоящая из двух слоев гладких мышечных клеток. Клетки внутреннего слоя идут продольно, а наружного - циркулярно.
Снаружи лежит адвентициальная оболочка в виде тонкой пластинки соединительной ткани. Зарисуйте фрагмент стенки мочеточника.
Препарат 3. Мочевой пузырь собаки. Окраска: гематоксилин-эозин.
Найти слизистую оболочку, образующую складки. Она представлена переходным эпителием. Ниже собственная пластинка слизистой из коллагеновой соединительной ткани. Далее - мышечная оболочка из трех косо идущих, нередко отграниченных друг от друга слоев гладкой мышечной ткани. Между мышеч-
15
ными пучками - прослойки соединительной ткани, переходящие в адвентициальную оболочку.
Занятие 11. Строение желез внутренней секреции
Препарат 1. Поджелудочная железа собаки. Окраска: гематоксилин-эозин.
Эта железа относится к железам со смешанным типом секреции, то есть сочетает экзо- и эндосекрецию.
При малом увеличении микроскопа видно, что она имеет дольчатое строение. Дольки разделены прослойками соединительной ткани - междольковыми перегородками. В них можно увидеть кровеносные сосуды и выводные протоки.
Последние выстланы кубическим и цилиндрическим эпителием. Дольки образованы концевыми отделами поджелудочной железы альвеолярной формы. Среди них выделяются светлой окраской островки Лангерганса. Это эндокринный отдел поджелудочной железы. В его составе имеются α-клетки, выделяющие глюкогон и β-клетки, секретирующие инсулин. Морфологически эти клетки сходны и этот способ окраски не дает возможности различить эти типы клеток. Обратите внимание на сеть капилляров внутри островка Лангерганса.
Препарат 2. Щитовидная железа собаки. Окраска: гематоксилин-эозин.
При малом увеличении микроскопа на препарате хорошо видна дольчатость железы и отсутствие выводных протоков. Последняя черта строения характерна для эндокринных желез. На рисунке необходимо отметить соединительнотканные прослойки и кровеносные сосуды в них. Структурные и функциональные единицы щитовидной железы - фолликулы - однослойные скопления кубических клеток, в просвете которых накапливается секрет. Секрет называется коллоидом. Он содержит гликопротеид - тиреоглобулин.
Препарат 3. Гипофиз кошки. Окраска: гематоксилин-эозин.
Гипофиз имеет двойное происхождение. Его зона, развивающаяся из эпителия крыши ротовой полости, называется передней долей - аденогипофизом, а зона, развивающаяся из дна воронки промежуточного мозга, - задней долей или нейрогипофизом. Вся железа окружена тонкой капсулой. Рассматривая препарат невооруженным глазом, можно заметить и промежуточную долю, отделенную от передней доли щелью, что характерно для хищных млекопитающих.
При слабом увеличении находим такое место, на котором в поле зрения большого увеличения попали бы одновременно участки передней, промежуточной и задней долей. Затем переводим микроскоп на большое увеличение.
16
Впередней доле отмечаем кровеносные капилляры и составляющие основную массу главные клетки. Это мелкие, слабо окрашенные с относительно крупными ядрами клетки. Другой тип клеток - эозинофильные клетки. Они крупные, угловатые, окрашены в ярко-розовый цвет, обычно многочисленные и располагаются группами. Третий тип клеток найти трудно. Их немного. Это базофильные клетки. По величине и форме они сходны с эозинофильными, но их цитоплазма окрашена в темно-фиолетовый цвет. Ядра их, как и эозинофильных клеток, относительно невелики. Передняя доля гипофиза продуцирует следующие гормоны: гормон роста (ГР), лактогенный гормон (ЛТГ), тиреотропный гормон (ТТГ), фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), лютеинизирующий гормон (ЛГ), адренокортикотропный гормон (АКТГ), меланоцитстимулирующий гормон (МСГ). Последний у рыб и амфибий образуется в промежуточной доле.
Впромежуточной доле отмечаем скопление мелких светлых однородных клеток, лежащих в несколько рядов, между которыми видны тонкие капилляры.
Учеловека эта доля слабо развита.
Задняя доля (нейрогипофиз) образована нейроглией и содержит мелкие кровеносные сосуды. Здесь обнаруживаются гормоны - вазопрессин и окситоцин. Но синтезируются они в нейронах ядер гипоталамуса и по аксонам поступают в заднюю долю, где поглощаются капиллярами.
Препарат 4. Надпочечник собаки. Окраска: железный гематоксилин.
Снаружи железу покрывает соединительнотканная капсула, содержащая
гладкие мышечные волокна, жировые клетки и сосуды. Надпочечник состоит из
коркового и мозгового вещества. Эти две части железы различаются по строению, происхождению и функциям. Корковое вещество имеет мезодермальное происхождение, а мозговое формируется из мигрирующих клеток нервных валиков, то есть имеет эктодермальное происхождение.
Паренхиматозные клетки коркового вещества расположены в три зоны. Сразу под капсулой, в клубочковой зоне, клетки образуют небольшие неправильной формы гроздья, разделенные капиллярами. Далее в глубь железы располагается слой пучковой зоны. Он образован радиальными тяжами толщиной в 1-2 клетки. Между ними проходят прямые капилляры. Еще глубже лежит сетчатая зона, клетки которой образуют тяжи, анастомозирующие друг с другом и идущие в различных направлениях. Кора надпочечников синтезирует стероидные (производные холестерина) гормоны двух классов - глюкокортикоиды и минералкортикоиды, а также небольшое число половых гормонов. Глюкокортикоиды, синтезируемые главным образом клетками пучковой и сетчатой зон, влияют на углеводный и белковый обмен. Например, кортизол вызывает образование углеводов из белков или их предшественников. Минералкортикоиды участвуют в поддержании баланса натрия и калия в организме, усиливая реабсорбцию натрия в почечных канальцах. Они секретируются только клетками клубочковой зоны.
17
Клетки мозгового вещества объединены в гроздья, неправильной формы тяжи, располагающиеся вокруг кровеносных сосудов. Клетки здесь окрашиваются интенсивнее и благодаря сродству к солям хрома получили название хромафинных клеток. В мозговом веществе секретируются два гормона: адреналин и норадреналин. Усиленное выделение этих гормонов происходит при различных видах эмоционального, физического стресса (резкое охлаждение, боль, страх и т. д. ). В результате усиливаются и учащаются сокращения сердца, повышается артериальное давление, сокращается селезенка, больше крови поступает к скелетным мышцам и меньше к внутренним органам, гликоген печени превращается в глюкозу, высвобождаемую в кровь.
Занятие 12. Кровеносные сосуды
Препарат 1. Артериолы, венулы и капилляры. Окраска: гематоксилин-эозин.
Необходимо научиться различать эти три типа мелких кровеносных сосудов. Артериолы отличаются характерной исчерченностью стенок. Она обусловлена ядрами гладких мышечных клеток, которые лежат поодиночке и как обруч охватывают сосуд. Светлые, удлиненные, расположенные вдоль оси сосуда клетки, - это клетки эндотелия.
Венулы имеют более тонкую стенку, чем артериолы. Она образована лишь слоем эндотелия. Ядра клеток эндотелия более короткие и широкие, чем ядра эндотелия в артериоле. В венулах часто видны эритроциты крови, придающие им оранжево-красный оттенок. Стенки капилляров тоже состоят только из эндотелия. Диаметр мелких капилляров равен диаметру эритроцитов. Желательно найти места отхождения капилляров от артериол и места впадения капилляров в венулы. Между сосудами видны ядра клеток рыхлой волокнистой соединительной ткани.
Препарат 2. Артерия мышечного типа. Окраска: гематоксилин-эозин.
Стенка ее построена из трех оболочек. Внутренняя (интима) представлена эндотелием, образующим на препарате фестончатую поверхность. Она отделена от средней оболочки тонкой внутренней эластической мембраной. Средняя (медиа) представлена пучками гладких мышечных клеток, расположенных циркулярно. Между пучками мышечных клеток - эластиновые волокна. Наружная эластическая мембрана отделяет среднюю оболочку от наружной (экстерна). Последняя состоит из рыхлой соединительной ткани, в которой можно увидеть сосуды сосудов.
Препарат 3. Артерия эластического типа. Окраска: орсеин.
18
Тонкая внутренняя оболочка представлена эндотелием, субэндотелиальной рыхлой соединительной тканью и внутренней эластической мембраной. Здесь она значительно толще, чем в артерии мышечного типа. Средняя оболочка (медиа) главным образом состоит из темных на препарате эластических волокон, между которыми располагаются светлые гладко мышечные клетки. Затем лежат
наружная эластическая мембрана и наружная оболочка из волокнистой соединительной ткани (адвентиция). В ней - темные эластические волокна и сосуды сосудов.
Препарат 4. Вена.
Окраска: гематоксилин-эозин.
Внутренняя оболочка (интима) состоит из эндотелия и внутренней эластической мембраны. Средняя оболочка (медиа) значительно тоньше, чем у сопровождающей артерии. Она состоит из циркулярно лежащих гладко мышечных клеток, между которыми располагаются коллагеновые и эластические волокна. Наружная оболочка по толщине превосходит остальные оболочки. Она состоит из соединительной ткани с большим количеством коллагеновых волокон. Сосудов сосудов здесь больше, чем в артериях, так как вены несут кровь с низким содержанием кислорода и клетки их стенок мало получают его за счет диффузии из просвета вены.
Занятие 13. Органы кроветворения
Препарат 1. Лимфатический узел. Окраска: гематоксилин-эозин.
Узел покрыт соединительнотканной капсулой. В капсуле встречаются жи-
ровые клетки и питающие капсулу мелкие кровеносные сосуды, а также разрезы приносящих лимфатических сосудов, в просветах которых видны клапаны. От капсулы внутрь узла отходят трабекулы, образующие опору узла. Даже невооруженным глазом видны слои более темного периферического коркового вещества и более светлого мозгового. В корковом веществе видны различные по форме скопления лимфоцитов - фолликулы. Внутри некоторых из них видны более светлые участки, называемые реактивными центрами (или центрами размножения). Рассматривая фолликул при большом увеличении, обратите внимание на то, что на периферии фолликулов находятся преимущественно малые лимфоциты, а в реактивных центрах много больших и средних лимфоцитов, а также макрофагов. От фолликулов внутрь отходят лентовидные скопления малых лимфоцитов - мякотные шнуры, образующие основу паренхимы мозгового вещества. Между фолликулами, трабекулами и мякотными шнурами видны более светлые пространства, заполненные ретикулярной тканью и небольшим количеством лимфоцитов. Это синусы. Различают краевой синус - между капсулой
19