Работа № 2. Определение белка в спинномозговой жидкости

Принцип метода: Для определения белка в спинномозговой жидкости используются некоторые реакции осаждения - реакция Нонне-Апельта-Шумма, проба Пенди. Реакция основывается на осаждении глобулинов при полунасыщении (NH₄)₂SO₄.

Порядок выполнения работы:

1. Реакция Ноне – Апельта - Шумма. К 20 каплям спинномозговой жидкости прибавляют равный объем сульфата аммония. В осадок выпадают глобулины.

2. Проба Пенди. На предметное стекло наносят несколько капель реактива Пенди (насыщенного раствора карболовой кислоты). Рядом помещают 1-2 капли ликвора. Палочкой мешают капли реактива и исследуемого раствора. При наличии белка возникает помутнение, интенсивность которого пропорциональна концентрации белка.

Клинико-диагностическое значение: Определение белка и белковых фракций является самым важным исследованием ликвора. Количество белка в ликворе(протеинорахия) при органических заболеваниях ЦНС и мозговых оболочек тем больше, чем острее процесс и чем сильнее затронуты мозговые оболочки. При остром гнойном менингите содержание белка может достигать 5-20 г/л.

Материальное обеспечение:

а) химическая посуда, реактивы

б) моча, ликвор (имитация)

Литература:

а) обязательная

1. Биологическая химия: Учебник/Е.С, Северин, Т.Л. Алейникова и др.- М.: ООО

« Медицинское информационное агентство», 2008. - 368 с.

2. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. - М.: «ГЭОТАР-МЕД», 2003 – 784 с.

3. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина, А.Я. Николаева, 3 изд. - М.: «ГЭОТАР», 2005 – 441 с.

4. Биохимия с упражнениями и задачами: Учебник/Под ред. Е.С.Северина.- М.: «ГЭОТАР», 2008 – 384 с.

5. Биохимия с упражнениями и задачами: Учебник/Под ред. Е.С.Северина.- М.: «ГЭОТАР», 2011 – 624 с.

6. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.:«Медицинское информационное агентство». – 2004. -566 с.

7. Щербак И.Г. Биологическая химия: Учебник. – СПб.: «Издательство СПбГМУ», 2005. – 480 с.

б) дополнительная

1. Хасина М.А. Словарь-справочник по клинической биохимии – Владивосток: «Медицина ДВ», 2008.

2. Интернет-ресурсы (http://www.biblioclub.ru/. http://www.studmedlib.ru/ и др.).

Практическое занятие № 51

Тема: «Биохимия отдельных органов и тканей: соединительной, мышечной, нервной»

(коллоквиум)

Мотивация. 1. Знание строения, свойств, функций соединительной ткани и компонентов внеклеточного матрикса дает возможность понимания причин патологий, связанных с нарушением их структуры и функций. 2. Нервная ткань имеет свои особенности биохимического состава и особенности протекания физиологических процессов. 3. Знание данного раздела дает возможность объяснять патогенез заболеваний мышечной ткани (дистрофия, атрофия), поражений миокарда (ишемия, инфаркт миокарда) и давать оценку результатам биохимических анализов крови и мочи. Знание процессов энергообеспечения работы мышц, утомления, тренировки необходимы для спортивной медицины.

Общая цель: 1. Научиться применять знания о строении, функциях и метаболизме важнейших структурных компонентов межклеточногоматриксадля объяснения его струк­турно-функциональнойорганизации в норме, роли впроцессе заживления ран, измененияхпри старении и диффузных заболеваниях соединительной ткани. 2. Знание химического состава нервной ткани, особенности метаболических процессов, молекулярных механизмов синаптической передачи нервных импульсов является важным для понимания их значения в условиях нормы и при формировании патологии. 3. Научиться применять знания о строении, функциях и метаболизме мышечной ткани для объяснения изменения ее структурно-функциональной организации в условиях нормы (тренировка, утомление) и патологии (дистрофия, атрофия мышц, повреж­дение миокарда). Полученные по данной теме знания формируют профессиональные компетенции (ПК-3, ПК-9, ПК-15).

Конкретные цели и задачи.

- знать 1. Основные белки межклеточного матрикса (коллаген, эластин), особенности состава и структуры; адгезивные белки межклеточного матрикса и их роль в межклеточных взаимодействиях; строение и функции гликозаминогликанов и протеогликанов и их роль в организации матрикса. 2. Химической состав и особенности метаболизма нервной ткани; обезвреживание аммиака в нервной ткани; образование и инактивацию ацетилхолина, норадреналина, серотонина, ГАМК, дофамина, нейропептидов; биохимию возникновения и проведение нервного импульса.

3. Химический состав и особенности метаболизма мышечной ткани; особенности энергетического обмена в мышцах; образование и функции креатинфосфата; биохимические механизмы мышечного сокращения и расслабления

- уметь1. Интерпретировать роль белков и ГАГ в структурной организации межклеточного матрикса; объяснять клинические проявления недостаточности витамина С; объяснять молекулярные механизмы, лежащие в основе нарушений структуры и функций матрикса, приводящие к возникновению ряда патологий соединительной ткани; анализировать результаты лабораторных исследований крови (мочи), используемых для диагностики коллагенозов и онкологических заболеваний. 2. Интерпретировать данные о химическом составе и особенностях метаболизма нервной ткани и влиянии на них нейротоксических факторов экзогенной и эндогенной природы; объяснять клинические проявления нарушений обмена биогенных аминов при психических заболеваниях.

3. Интерпретировать данные о химическом составе и особенностях метаболизма мышечной ткани в покое и при интенсивной мышечной работе; объяснять молекулярные механизмы, лежащие в основе утомления, нарушения структуры и функций, приводящие к поражению скелетной мускулатуры и миокарда; анализировать результаты лабораторных исследований крови (мочи), используемых для диагностики заболеваний мышц и миокарда.

- владеть медико-функциональным понятийным аппаратом (терминами): гидроксипролинурия (оксипролинурия), мукополисахариды, коллагенозы, паркинсонизм, депрессанты, антидепрессанты, нейротоксин, нейромедиатр, нейропептид., потенциал покоя, потенциал действия, нервный импульс, деменция, кома (гипогликемическая), креатинурия, гиперкреатининурия, гипо­креатининурия, миоглобинурия, миопатии, миодистрофии.

Этапы проведения занятия:

1. Вводная часть

2. Основная часть занятия:коллоквиум

3. Заключительная часть занятия