- •Методические рекомендации для студентов
- •Модуль IV. Функции и обмен липидов. Биологические мембраны, строение и функции
- •Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:
- •Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию:
- •1. Выберите один неправильный ответ. Арахидоновая кислота:
- •2. Установите соответствие:
- •3. Выберите правильные ответы. Желчные кислоты:
- •5. Выберите один правильный ответ. Основные переносчики экзогенных пищевых жиров из кишечника в ткани:
- •6. Выберите один правильный ответ. При генетическом дефекте лп-липазы наблюдается:
- •7. Выберите один неправильный ответ. Кетоновые тела:
- •9. Выберите один правильный ответ. В состав hsКо-а, участвующего в ß-окислении жирных кислот входит витамин:
- •10. Установите соответствие.
- •«Липопротеины – транспортные формы липидов в плазме крови человека»
- •Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время:
- •Учебно-материальное обеспечение
- •Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:
- •Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время:
- •Учебно-материальное обеспечение
- •Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:
- •Задания для самостоятельной работы студентов во внеучебное время
- •Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время:
- •Учебно-материальное обеспечение
- •Ориентировочная основа деятельности студентов для проведения лабораторной работы: Работа №1. Определение общего холестерина крови ферментативным методом
- •Уровень холестерина в норме (сыворотка) – 3,63 - 8,03 ммоль/л
- •Работа №2. Количественное определение лпнп в сыворотке крови
- •В норме содержание лпн в сыворотке крови составляет 3 – 4,5 г/л .
- •Учебно-материальное обеспечение
- •Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:
- •Задания для самостоятельной работы студентов во внеучебное время
- •Учебно-материальное обеспечение
- •Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:
- •Учебно-материальное обеспечение
- •Учебно-материальное обеспечение
Ориентировочная основа деятельности студентов для проведения лабораторной работы: Работа №1. Определение общего холестерина крови ферментативным методом
Принцип метода. Определение холестерина основано на использовании сопряженных ферментативных реакций, катализируемых холестеролэстеразой, осуществляющей гидролиз эфиров холестерина до свободного холестерина; холестеролоксидазой, осуществляющей превращение холестерина в холестенон с образованием Н2О2; пероксидазой, осуществляющей окисление перекисью 4-аминоантипирина и фенола с образованием окрашенного продукта розово-малинового цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации холестерина.
Реактивы:
А) Рабочий реагент - смесь лиофильно высушенных ферментов, буферного раствора, фенола, аминоантипирина
Б) Калибратор – калибровочный раствор холестерина 4,65 ммоль/л
Порядок выполнения работы:
1. 1 мл рабочего реагента наливают в пробирку №1 (опыт) и пробирку №2 (калибровочная проба), затем прогревают 5 минут при 370 С
2. В пробирку №1 (опыт) добавляют 0,01 мл сыворотки крови, в пробирку №2 (калибровочная проба) - 0,01 мл калибратора
3. Пробирки выдерживают 20 минут в термостате при 370 С
4. Измеряют оптическую плотность растворов на ФЭКе против Н2О при длине волны 490 нм в кювете 0,3 см
5. Расчет проводят по формуле: х = (Аопыт : Акалибр.) × 4,65 ммоль/л,
Где А – оптическая плотность растворов (показания ФЭКа)
Уровень холестерина в норме (сыворотка) – 3,63 - 8,03 ммоль/л
рекомендуемые пределы (желательные) для взрослых - < 5 ммоль/л
Клинико-диагностическое значение. Гиперхолестеринемия – увеличение холестерина в крови, сопровождает гиперлипопротеинемии IIA, IIB, III типов; заболевания печени, холестаз, нефротический синдром, злокачественные опухоли поджелудочной железы и простаты, сахарный диабет и другие заболевания. Гиперхолестеринемия является фактором риска развития атеросклероза и одним их биохимических тестов патологии. Гипохолестеринемия наблюдается при болезнях печени (цирроз в поздней стадии заболевания, острая дистрофия печени), голодании, сепсисе, гиперфункции щитовидной железы и др.
Работа №2. Количественное определение лпнп в сыворотке крови
Принцип метода: метод основан на способности ЛПНП осаждаться в присутствии хлорида кальция и гепарина; при этом изменяется мутность раствора (гепарин способен образовывать с ЛПНП комплекс, который в присутствии хлорида кальция выпадает в осадок). По степени помутнения раствора и судят о концентрации ЛПНП в сыворотке крови.
Порядок выполнения работ:
В пробирку вносят 2 мл 0,27% раствора Cacl2 и 0,2 мл сыворотки крови, перемешивают.
Определяют оптическую плотность раствора (А1) против Н2О при длине волны 630 нм в кювете 0,5 см.
Раствор из кюветы переливают в пробирку, добавляют 0,04 мл (2 капли) 1% раствора гепарина, перемешивают.
Ровно через 4 минуты снова определяют оптическую плотность раствора (А2) в тех же условиях.
Расчет проводят по формуле: х = (А2 – А1)×100