- •Методические указания к лабораторным работам по разделу
- •Введение
- •1 Определение содержания углекислого газа
- •1.1 Определение углекислого газа
- •1. 1. 3 Необходимые приборы
- •1.1.7 Контрольные вопросы
- •1.2.7 Контрольные вопросы
- •1.3 Определение концетрации углекислого газа методом прохорова д. В.
- •1.3.6 Контрольные вопросы
- •2 Определение аммиака в воздухе
- •2.4.5 Контрольные вопросы
- •Определение сероводорода в воздухе титрометрическим методом
- •3.3 Приборы
- •3.4 Реактивы
- •3.5 Порядок анализа
- •3.6 Проведение анализа
- •3.7 Контрольные вопросы
- •4 Экспресс методы определения аммиака и сероводорода
- •4.3.4 Порядок вычисления
- •4.4 Определение сероводорода
- •4.5.1 Ход определения
- •4.6 Контрольные вопросы
- •5.3.1 Определение запылённости воздуха
- •5.4 Микрофлора воздуха
- •5.4.1 Определение микроорганизмов
- •5.5 Контрольные вопросы
5.4.1 Определение микроорганизмов
В зоогигиенической практике для определения количества микроорганизмов часто применяют метод осаждения микробов на чашки Петри с питательной средой (метод седиментации или метод свободного оседания) и аппарат Кротова Ю.А.
1) При использовании метода осаждения микроорганизмов (седиментационного метода) в определенных местах помещения выставляют на 5...10 минут открытые чашки Петри со стерильной твёрдой питательной средой, закрывают и помещают на 48 часов в термостат или теплое помещение. По количеству выросших колоний определяют микробную загрязненность воздуха помещений.
На 100 см2 питательной среды чашки Петри за 5 минут оседает столько микробов, сколько их содержится в 10 л воздуха. Площадь чашки Петри определяют по формуле:
S= R2,
Где S – площадь чашки Петри, см2;
– постоянная величина, равная 3,14;
R – радиус чашки Петри, см.
Пример расчета: Предположим, что площадь чашки Петри равна 70 см2 и на питательной среде выросли 280 колоний микроорганизмов. Отсюда количество микроорганизмов (X) на 100 см2 равно 400 штук.
Х = 280/70 ×100 = 400
Умножая полученное число на 100, находим количество микроорганизмов в 1 м3, что будет равняться 40000 в 1 м3 воздуха.
2) Аппарат Ю.А. Кротова – наиболее современный электрический прибор, отличающийся высокой эффективностью улавливания микроорганизмов из воздуха. Аппарат представляет собой металлическую коробку, в которую вмонтирован электромотор с вентилятором. В верхней части аппарата имеется вращающийся столик для установки чашки Петри со стерильной питательной средой. Столик закрывается пластмассовой крышкой с клиновидной щелью, через которую просасывается исследуемый воздух с микроорганизмами.
Микроорганизмы при просасывании воздуха ударяются о липкую поверхность питательной среды и прилипают. У аппарата имеется реометр для определения скорости и количества аспирированного воздуха в 1 минуту.
Ход определения
Аппарат присоединяют к электрической сети, затем при помощи выключателя и реометра устанавливают скорость прохождения воздуха. При определении общего количества микроорганизмов в воздухе через аппарат пропускают 50 л воздуха в течение двух минут со скоростью аспирации 25 л/мин. В сильно загрязненном воздухе экспозиция уменьшается до одной минуты.
Открывают крышку аппарата и на вращающийся столик устанавливают чашку Петри с мясопептонным агаром.
3) Крышку аппарата закрывают и одновременно засекают время по секундомеру. Пробу воздуха берут в течение 2-х минут.
4) Открывают крышку аппарата, закрывают чашку Петри крышкой, вынимают ее и ставят в термостат или теплое помещение на 48 часов. В теплом месте из каждого микроорганизма вырастает колония микробов. Подсчитывают число выросших колоний и определяют содержание микроорганизмов в 1 м3 исследуемого воздуха.
Пример расчета: Допустим, что через аппарат пропущено 50 л исследуемого воздуха и при подсчете на чашке Петри обнаружено 300 колоний микробов. Тогда в 1 м3 воздуха будет 300/50 ×1000 = 6000 микробов.