3. Определение содержания тиамина хлорида

и тиамина бромида (витамина B1)

Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанное в соответствующих частных статьях, количественно переносят 30 миллилитрами раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) в мерную колбу вместимостью 100 мл, взбалтывают, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят с использованием раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) раствор второго разведения так, чтобы содержание в нем витамина B1 (в пересчете на тиамина хлорид) было около 0,001 мг в 1 мл.

1 мл полученного раствора помещают в делительную воронку с притертой пробкой вместимостью 50 мл, во вторую делительную воронку помещают 1 мл раствора стандартного образца тиамина хлорида. В обе делительные воронки прибавляют по 4 мл подкисленного раствора калия хлорида и по 3 мл окислительной смеси; воронки одновременно встряхивают и оставляют стоять в течение 1 мин, затем прибавляют по 15 мл изобутилового или изоамилового спирта, или бутанола-1, одновременно энергично встряхивают в течение 2 мин и дают разделиться слоям. Водный слой удаляют, спиртовой фильтруют через бумажный фильтр с 1 г безводного натрия сульфата. Полученные фильтраты переносят в кювету флуориметра и измеряют флюоресценцию растворов при длине волны около 436 нм. Установку прибора проводят по раствору рабочего стандартного образца тиамина хлорида.

Содержание витамина B1 в пересчете на тиамина хлорид (C12H17ClN4OS х HCl) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

А1 х 0,001 х 100 х V3 х б А1 х V3 х б

Х = --------------------------- = ---------------------

A2 х а х V2 х 1000 А2 х а х V2 х 10000

где А1 - показание флуориметра испытуемого раствора; А2 - показание флуориметра раствора рабочего стандартного образца тиамина хлорида; 0,001 - содержание тиамина хлорида в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2, V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки, г; 1000 - пересчет в граммы.

Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца тиамина хлорида: 0,1000 г тиамина хлорида, предварительно высушенного при температуре от 100 до 105 град. С в течение 2 ч, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 10 капель концентрированной хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора водой до метки (основной раствор). Раствор годен в течение 1 мес при хранении в банке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.

1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,001 мг тиамина хлорида.

Раствор годен в день приготовления.

2. Окислительная смесь: 0,01 г калия феррицианида растворяют в 1 мл воды и доводят объем раствора 15% раствором едкого натра до 25 мл. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.

3. Изобутиловый спирт (ч. д. а.) или изоамиловый спирт (ч. д. а.), или бутанол-1 (ч. д. а.) проверяют на отсутствие флюоресценции. В случае наличия флюоресценции спирт перед употреблением подвергают очистке следующим образом: к 1 л спирта прибавляют от 15 до 20 г активированного угля, энергично встряхивают в течение 30 мин, оставляют на сутки и отгоняют.

4. Приготовление подкисленного раствора калия хлорида: 125 г калия хлорида растворяют в 400 мл воды в мерной колбе вместимостью 500 мл, прибавляют 4,5 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.

5. Коэффициент пересчета тиамина хлорида на тиамина бромид-1,29.