Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
microba_1s / тема №3 / занятие №9.docx
Скачиваний:
44
Добавлен:
10.03.2016
Размер:
88.46 Кб
Скачать

Тема № 3. «Экология микробов»

ЗАНЯТИЕ №9

«САНИТАРНО - БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЪЕКТОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ»

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

  • Изучить методы и показатели, необходимые для санитарно - микробиологической оценки объектов окружающей среды.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

  • Природные микробиоценозы. Экологические связи в биоценозах.

  • Экологическая среда обитания микроорганизмов. Нормальная микрофлора объектов окружающей среды.

  • Принципы санитарно - микробиологического контроля воздуха, воды и почвы.

  • Санитарно - показательные микроорганизмы объектов окружающей среды.

  • Роль воздуха, воды и почвы в распространении инфекционных болезней.

  • Значение санитарно - бактериологического контроля в работе аптеки.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

  • проводить оценку санитарно - бактериологического состояния воздуха, воды и почвы по микробиологическим тестам.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:

  • о качественной оценке и количественных характеристиках показателей состояния объектов окружающей среды.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

Работа № 1. Санитарно - бактериологическая оценка состояния воздуха аптеки

Цель: провести оценку санитарно - бактериологического состояния воздуха зала обслуживания аптек по общему микробному числу (ОМЧ) на МПА и количеству гемолитических стрептококков на кровяном агаре.

Самостоятельная работа: Сделать расчет ОМЧ по формуле Омелянского. Оценить чистоту воздуха по микробиологическим нормативам (см. теоретическую справку).

Опыт № 1. Посев воздуха методом седиментации по Коху на МПА. Зарисовать.

Подсчитать количество выросших колоний. Рассчитать ОМЧ по формуле Омелянского.

Оценка санитарно - бактериологического состояния воздуха по ОМЧ на МПА по методу Коха проводится по формуле Омелянского:

Х= Ах100х5х1000

Вх10хТ

X - количество микробов в м3 воздуха;

А-количество колоний в чашке;

100- площадь (см 3), на которую происходило оседание микробов;

5 - время по расчету Омелянского, мин;

1000 - искомый объем воздуха в литрах;

В - площадь чашки Петри в см 3 (78,5 см 2);

10 - объем воздуха (л), из которого происходило оседание микробов;

Т - время экспозиции, мин.

Результат:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Опыт № 2. Посев воздуха методом седиментации по Коху на кровяной агар. Зарисовать. Подсчитать количество выросших колоний

Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Данные внести в таблицу:

Опыт

Метод

Результат

Нормативы

Оценка (чистый, грязный)

1

Посев по Коху

ОМЧ

2

Посев по Коху

Количество гемолитических

стрептококков

Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Ответить на вопросы:

  1. Соответствует ли воздух зала обслуживания аптеки нормативам?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________

  1. Какие отклонения были отмечены?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

  1. Какие мероприятия следует проводить, чтобы устранить загрязненность воздуха?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Цель микробиологического анализа____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Методы исследования

1.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Критерии оценки и нормативы:

1.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 2. Санитарно - бактериологическая оценка состояния воды

Цель:

  1. Оценить санитарно - бактериологическое состояние дистиллированной воды, используемой для приготовления лекарственных препаратов по ОМЧ на МПА.

  2. Провести оценку санитарно - бактериологического состояния водопроводной воды по показателям ОМЧ, индексу бактерий группы кишечной палочки (БГКП), коли - титру; Оценить чистоту воды по результатам посевов (см. теоретическую справку).

Опыт № 3. Посев дистиллированной и водопроводной воды глубинным методом на МПА. Зарисовать. Подсчитать количество выросших колоний.

Посев дистиллированной Посев водопроводной

воды воды

Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Опыт № 4. Посев водопроводной воды методом мембранных фильтров на среду Эндо. Зарисовать. Подсчитать количество выросших колоний на мембранном фильтре.

Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Данные внести в таблицу:

Опыт

Метод

Результат

ГОСТ

Оценка (норма, выше нормы, ниже нормы)

3

Глубинный посев

ОМЧ дистиллированной воды

ОМЧ водопроводной воды

4

Мембранных

фильтров

Индекс БГПК

Коли – титр водопроводной воды

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Ответить на вопросы:

  1. Соответствует ли дистиллированная и водопроводная вода ГОСТу?_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

  1. Какие отклонения были отмечены?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

  1. Какие мероприятия следует проводить, чтобы устранить загрязненность воды?

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Цель микробиологического анализа____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Методы исследования

1._______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2._______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3._______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Критерии оценки и нормативы:

1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 3. Санитарно- бактериологическая оценка состояния почвы

Цель: оценить результаты санитарно - бактериологического исследования почвы.

Задача. В лабораторию доставлен образец почвы. Определить пригодность земельного участка для сбора лекарственных растений, если ОМЧ - 100000, коли - титр равен 0,005, перфрингенс - титр - 0,0007. Определить давность загрязнения почвы (см. теоретическую справку).

Опыт

Метод

Схема опыта

Результат

Оценка (норма,выше нормы, ниже нормы)

№5

6,7

8,9

Глубинный

посев

ПОСЕВ

-1 -3-6 МПА

Разведение почвы

в воде

ПОСЕВ

-1 -3-6 Эндо (Гр- пал.)

Среда Кесслера

-1 -3-6 -1 -3 -6

Разведения среда Вильсон - Гр+ споро-

почвы Блера вые палочки

ОМЧ=

Коли-титр=

Титр-перфрингенс=

Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Ответить на вопросы:

  1. Соответствует ли почва нормативам?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________

  2. Какой коли - титр и перфрингенс - титр образца почвы? Соответствует ли он микробиологическим нормативам?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________

  3. Пригодна ли почва для сбора лекарственных растений? Почему?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Цель микробиологического анализа__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Методы исследования:

1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Критерии оценки и нормативы:

1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 4. Санитарно - бактериологическая оценка состояния оборудования

Цель: сделать смыв с рабочего стола на среду Кесслера.

Дано: трафареты, пробирки со стерильной средой Кесслера

«К» «О»

Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Цель микробиологического анализа____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Метод исследования:________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Критерии оценки и нормативы:

1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ СПРАВКА

Микробиологический анализ объектов окружающей среды проводится в плановом порядке и по эпидемиологическим показаниям.Гигиенические нормативы по микробиологическим показателям включают определение:

  1. Общего микробного числа - ОМЧ (количество мезофильных аэробных и факультативно - анаэробных микроорганизмов. ОМЧ оценивается как показатель интенсивности загрязнения объектов окружающей среды.

  2. Санитарно - показательных микроорганизмов - СПМ (выявление патогенных микробов и их метаболитов). СПМ косвенно указывают на присутствие патогенов в окружающей среде.

Требования к СПМ:

- постоянно обитать в естественных полостях человека и животных и выделяться в

окружающую среду;

- не должны размножаться в окружающей среде, исключая пищевые продукты;

- длительность выживания в окружающей среде не меньше, чем у патогенов;

- устойчивость в окружающей среде должна быть больше, чем у патогенов;

- не должно быть «двойников» в среде;

- не должны изменять свои биологические свойства в окружающей среде;

- методы индикации должны быть простыми.

Правила отбора проб

Правила регламентированы для каждого объекта нормативными документами. Общие требования заключаются в следующем:

  1. Соблюдение правил стерильности;

  2. Оптимальные условия транспортировки;

  3. Исследование образцов не позднее, чем через 6 часов от момента забора материала (оптимально до 2 часов);

  4. Взятие проб из разных участков объекта;

  5. Повторность отбора проб, позволяющих получить более достоверную информацию по загрязнению объекта;

  6. Применение только стандартных методов исследования;

  7. Использование комплекса тестов.

к Работе№1

Санитарно - бактериологическое исследование воздуха

Цель микробиологического анализа: контроль за состоянием воздуха закрытых помещений: в аптеках - асептического блока, фасовочной, ассистентской, моечной и зала обслуживания до работы, после работы и во время работы.

Методы исследований

1. Естественная седиментация - метод Коха - оседание микробов под действием силы тяжести - является простым способом изучения микрофлоры воздуха. Он заключается в том, что чашки с питательной средой остаются открытыми на определенное время (5 - 10 минут на общую обсемененность и не менее 40 минут на кокковую микрофлору), затем закрывают, пописывают и выдерживают в термостате 24 часа, затем 24 часа при комнатной температуре. Количество выросших колоний соответствует степени загрязненности воздуха: по приблизительному подсчету на площадь 100 см в течение 5 минут оседает столько микробов, сколько содержится в 10 литрах воздуха. Метод прост, но не точен

2.Принудительная седиментация - метод Кротова (аспирационный) - более точный количественный метод определения микробного числа воздуха. Посев воздуха проводят с использованием прибора - аппарата Кротова. Аппарат устроен таким образом, что воздух с заданной скоростью пропускается через узкую щель алексиглазовой пластины, закрывающей чашку Петри с питательным агаром. При этом частицы аэрозоля с содержащимися на них микроорганизмами равномерно фиксируются на всей поверхности среды благодаря постоянному вращению чашки над входной щелью. После инкубации посева в термостате проводят расчет микробного числа по формуле:

Х = Ах1000

V

X - количество микробов в м 3 воздуха;

А - количество колоний в чашке;

1000 - искомый объем воздуха в литрах;

V - искомый объем воздуха, дм 3

3. Фильтрационный метод - воздух продувается через мембранные фильтры с последующим высевом на питательную среду. Метод трудоемок.

Критерии оценки

  1. ОМЧ - число бактерий в 1 м воздуха;

  2. индекс СПМ - представители микрофлоры дыхательных путей - гемолитические стрептококки и золотистый стафилококк.

НОРМАТИВЫ: чистый воздух зимой: ОМЧ - не более 4500, гемолитических стрептококков - до 35; грязный воздух зимой: ОМЧ более 7000, гемолитических стрептококков - до 124.

Критерии оценки воздуха помещения аптек

Наименование

помещений

Условия работы

ОМЧ в 1 м 3

воздуха

Количество

стрептококков гемолитических

и золотистого

стафилококка

Количество грибов в 1 м 3 воздуха

Асептический

блок,

стерилизационная

До работы

Не выше 500

-

-

После работы

Не выше 1000

25

Не более 25

Ассистентская,

материальная,

фасовочная

До работы

Не выше 750

Не более 25

Не более 25

После работы

Не выше 1000

25-30

Не более 25

Моечная

Во время работы

Не выше 1000

25

До 12

Зал

обслуживания

Во время работы

Не выше 1500

До 100

До 20

к Работе №2

Соседние файлы в папке тема №3