- •Правила отбора проб
- •Санитарно - бактериологическое исследование воздуха
- •Методы исследований
- •Критерии оценки
- •Санитарно - бактериологическое исследование воды
- •Методы исследований
- •Критерии оценки
- •Санитарно - бактериологическое исследование почвы
- •Методы исследований
- •Критерии оценки
- •Нормативные оценки почвы
- •Критерии оценки
Тема № 3. «Экология микробов»
ЗАНЯТИЕ №9
«САНИТАРНО - БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЪЕКТОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ»
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
Изучить методы и показатели, необходимые для санитарно - микробиологической оценки объектов окружающей среды.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
Природные микробиоценозы. Экологические связи в биоценозах.
Экологическая среда обитания микроорганизмов. Нормальная микрофлора объектов окружающей среды.
Принципы санитарно - микробиологического контроля воздуха, воды и почвы.
Санитарно - показательные микроорганизмы объектов окружающей среды.
Роль воздуха, воды и почвы в распространении инфекционных болезней.
Значение санитарно - бактериологического контроля в работе аптеки.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
проводить оценку санитарно - бактериологического состояния воздуха, воды и почвы по микробиологическим тестам.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:
о качественной оценке и количественных характеристиках показателей состояния объектов окружающей среды.
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Работа № 1. Санитарно - бактериологическая оценка состояния воздуха аптеки
Цель: провести оценку санитарно - бактериологического состояния воздуха зала обслуживания аптек по общему микробному числу (ОМЧ) на МПА и количеству гемолитических стрептококков на кровяном агаре.
Самостоятельная работа: Сделать расчет ОМЧ по формуле Омелянского. Оценить чистоту воздуха по микробиологическим нормативам (см. теоретическую справку).
Опыт № 1. Посев воздуха методом седиментации по Коху на МПА. Зарисовать.
Подсчитать количество выросших колоний. Рассчитать ОМЧ по формуле Омелянского.
Оценка санитарно - бактериологического состояния воздуха по ОМЧ на МПА по методу Коха проводится по формуле Омелянского:
Х= Ах100х5х1000
Вх10хТ
X - количество микробов в м3 воздуха;
А-количество колоний в чашке;
100- площадь (см 3), на которую происходило оседание микробов;
5 - время по расчету Омелянского, мин;
1000 - искомый объем воздуха в литрах;
В - площадь чашки Петри в см 3 (78,5 см 2);
10 - объем воздуха (л), из которого происходило оседание микробов;
Т - время экспозиции, мин.
Результат:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Опыт № 2. Посев воздуха методом седиментации по Коху на кровяной агар. Зарисовать. Подсчитать количество выросших колоний
Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Данные внести в таблицу:
Опыт |
Метод |
Результат |
Нормативы |
Оценка (чистый, грязный) |
1 |
Посев по Коху |
ОМЧ
|
|
|
2 |
Посев по Коху |
Количество гемолитических стрептококков |
|
|
Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Ответить на вопросы:
Соответствует ли воздух зала обслуживания аптеки нормативам?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Какие отклонения были отмечены?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Какие мероприятия следует проводить, чтобы устранить загрязненность воздуха?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Цель микробиологического анализа____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Методы исследования
1.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Критерии оценки и нормативы:
1.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 2. Санитарно - бактериологическая оценка состояния воды
Цель:
Оценить санитарно - бактериологическое состояние дистиллированной воды, используемой для приготовления лекарственных препаратов по ОМЧ на МПА.
Провести оценку санитарно - бактериологического состояния водопроводной воды по показателям ОМЧ, индексу бактерий группы кишечной палочки (БГКП), коли - титру; Оценить чистоту воды по результатам посевов (см. теоретическую справку).
Опыт № 3. Посев дистиллированной и водопроводной воды глубинным методом на МПА. Зарисовать. Подсчитать количество выросших колоний.
Посев дистиллированной Посев водопроводной
воды воды
Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Опыт № 4. Посев водопроводной воды методом мембранных фильтров на среду Эндо. Зарисовать. Подсчитать количество выросших колоний на мембранном фильтре.
Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Данные внести в таблицу:
Опыт |
Метод |
Результат |
ГОСТ |
Оценка (норма, выше нормы, ниже нормы) |
3 |
Глубинный посев |
ОМЧ дистиллированной воды |
|
|
ОМЧ водопроводной воды |
|
| ||
4 |
Мембранных фильтров |
Индекс БГПК Коли – титр водопроводной воды |
|
|
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Ответить на вопросы:
Соответствует ли дистиллированная и водопроводная вода ГОСТу?_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Какие отклонения были отмечены?___________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Какие мероприятия следует проводить, чтобы устранить загрязненность воды?
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Цель микробиологического анализа____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Методы исследования
1._______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2._______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3._______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Критерии оценки и нормативы:
1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 3. Санитарно- бактериологическая оценка состояния почвы
Цель: оценить результаты санитарно - бактериологического исследования почвы.
Задача. В лабораторию доставлен образец почвы. Определить пригодность земельного участка для сбора лекарственных растений, если ОМЧ - 100000, коли - титр равен 0,005, перфрингенс - титр - 0,0007. Определить давность загрязнения почвы (см. теоретическую справку).
Опыт |
Метод |
Схема опыта |
Результат |
Оценка (норма,выше нормы, ниже нормы) |
№5
№ 6,7
№ 8,9 |
Глубинный посев |
ПОСЕВ
-1 -3-6 МПА Разведение почвы в воде
ПОСЕВ
-1 -3-6 Эндо (Гр- пал.) Среда Кесслера
-1 -3-6 -1 -3 -6 Разведения среда Вильсон - Гр+ споро- почвы Блера вые палочки
|
ОМЧ=
Коли-титр=
Титр-перфрингенс= |
|
Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Ответить на вопросы:
Соответствует ли почва нормативам?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Какой коли - титр и перфрингенс - титр образца почвы? Соответствует ли он микробиологическим нормативам?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Пригодна ли почва для сбора лекарственных растений? Почему?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Цель микробиологического анализа__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Методы исследования:
1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Критерии оценки и нормативы:
1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 4. Санитарно - бактериологическая оценка состояния оборудования
Цель: сделать смыв с рабочего стола на среду Кесслера.
Дано: трафареты, пробирки со стерильной средой Кесслера
«К» «О»
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Цель микробиологического анализа____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Метод исследования:________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Критерии оценки и нормативы:
1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ СПРАВКА
Микробиологический анализ объектов окружающей среды проводится в плановом порядке и по эпидемиологическим показаниям.Гигиенические нормативы по микробиологическим показателям включают определение:
Общего микробного числа - ОМЧ (количество мезофильных аэробных и факультативно - анаэробных микроорганизмов. ОМЧ оценивается как показатель интенсивности загрязнения объектов окружающей среды.
Санитарно - показательных микроорганизмов - СПМ (выявление патогенных микробов и их метаболитов). СПМ косвенно указывают на присутствие патогенов в окружающей среде.
Требования к СПМ:
- постоянно обитать в естественных полостях человека и животных и выделяться в
окружающую среду;
- не должны размножаться в окружающей среде, исключая пищевые продукты;
- длительность выживания в окружающей среде не меньше, чем у патогенов;
- устойчивость в окружающей среде должна быть больше, чем у патогенов;
- не должно быть «двойников» в среде;
- не должны изменять свои биологические свойства в окружающей среде;
- методы индикации должны быть простыми.
Правила отбора проб
Правила регламентированы для каждого объекта нормативными документами. Общие требования заключаются в следующем:
Соблюдение правил стерильности;
Оптимальные условия транспортировки;
Исследование образцов не позднее, чем через 6 часов от момента забора материала (оптимально до 2 часов);
Взятие проб из разных участков объекта;
Повторность отбора проб, позволяющих получить более достоверную информацию по загрязнению объекта;
Применение только стандартных методов исследования;
Использование комплекса тестов.
к Работе№1
Санитарно - бактериологическое исследование воздуха
Цель микробиологического анализа: контроль за состоянием воздуха закрытых помещений: в аптеках - асептического блока, фасовочной, ассистентской, моечной и зала обслуживания до работы, после работы и во время работы.
Методы исследований
1. Естественная седиментация - метод Коха - оседание микробов под действием силы тяжести - является простым способом изучения микрофлоры воздуха. Он заключается в том, что чашки с питательной средой остаются открытыми на определенное время (5 - 10 минут на общую обсемененность и не менее 40 минут на кокковую микрофлору), затем закрывают, пописывают и выдерживают в термостате 24 часа, затем 24 часа при комнатной температуре. Количество выросших колоний соответствует степени загрязненности воздуха: по приблизительному подсчету на площадь 100 см в течение 5 минут оседает столько микробов, сколько содержится в 10 литрах воздуха. Метод прост, но не точен
2.Принудительная седиментация - метод Кротова (аспирационный) - более точный количественный метод определения микробного числа воздуха. Посев воздуха проводят с использованием прибора - аппарата Кротова. Аппарат устроен таким образом, что воздух с заданной скоростью пропускается через узкую щель алексиглазовой пластины, закрывающей чашку Петри с питательным агаром. При этом частицы аэрозоля с содержащимися на них микроорганизмами равномерно фиксируются на всей поверхности среды благодаря постоянному вращению чашки над входной щелью. После инкубации посева в термостате проводят расчет микробного числа по формуле:
Х = Ах1000
V
X - количество микробов в м 3 воздуха;
А - количество колоний в чашке;
1000 - искомый объем воздуха в литрах;
V - искомый объем воздуха, дм 3
3. Фильтрационный метод - воздух продувается через мембранные фильтры с последующим высевом на питательную среду. Метод трудоемок.
Критерии оценки
ОМЧ - число бактерий в 1 м воздуха;
индекс СПМ - представители микрофлоры дыхательных путей - гемолитические стрептококки и золотистый стафилококк.
НОРМАТИВЫ: чистый воздух зимой: ОМЧ - не более 4500, гемолитических стрептококков - до 35; грязный воздух зимой: ОМЧ более 7000, гемолитических стрептококков - до 124.
Критерии оценки воздуха помещения аптек
Наименование помещений |
Условия работы |
ОМЧ в 1 м 3 воздуха |
Количество стрептококков гемолитических и золотистого стафилококка |
Количество грибов в 1 м 3 воздуха |
Асептический блок, стерилизационная |
До работы |
Не выше 500 |
- |
- |
После работы |
Не выше 1000 |
25 |
Не более 25 | |
Ассистентская, материальная, фасовочная |
До работы |
Не выше 750 |
Не более 25 |
Не более 25 |
После работы |
Не выше 1000 |
25-30 |
Не более 25 | |
Моечная |
Во время работы |
Не выше 1000 |
25 |
До 12 |
Зал обслуживания |
Во время работы |
Не выше 1500 |
До 100 |
До 20 |
к Работе №2