ЗАНЯТИЕ № 10
«САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛЕКАРСТВННОГО СЫРЬЯ И ГОТОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ»
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
Ознакомить студентов с перечнем объектов, которые подлежат микробиологическому контролю в аптеках.
Изучить с принципами изучения количественной и качественной обсемененности
лекарственного сырья и готовых лекарственных форм, изготовленных в аптеках.
Изучить с методами микробиологического контроля стерильности и
апирогенности готовых лекарственных форм.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
Источники и пути загрязнения растительного лекарственного сырья.
Источники и пути загрязнения лекарственных форм, изготовляемых в аптеках, микробами-контаминантами и способы их предупреждения.
Понятие о пирогенах. Микроорганизмы как причина пирогенности инъекционных растворов.
Методы микробиологических исследований лекарственного сырья и готовых лекарственных форм.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
оценивать результаты качественной и количественной обсемененности
микроорганизмами различных лекарственных форм, а также лекарственного сырья;
учитывать требования асептики при изготовлении стерильных лекарственных форм.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:
о микробиологическом контроле соблюдения санитарно-гигиенического режима в аптеках;
о нормах микробного загрязнения различных помещений аптеки и мероприятиях, необходимых для ликвидации микробного загрязнения;
о методах определения пирогенности in vivo и in vitro.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТА
КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ САНИТАРНОГО РЕЖИМА ПРИ ИЗГОТОВЛЕНИИ ЛЕКАРСТВ:
1.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
4.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
5.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Работа № 1. Определение микробной обсемененности растительного сырья
Цель: рассчитать по готовому посеву ОМЧ сухой травы ромашки аптечной. Сделать заключение о пригодности сырья.
Результат:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Методика исследования____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Нормативы______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 2. Испытание на микробиологическую чистоту нестерильных лекарственных средств
Цель: учесть результат посева таблетки тетрациклина на средах: МПА, Сабуро, Эндо, ВСА. ЖСА. Дать заключение о качестве препарата.
А) определение ОМЧ сапрофитных микроорганизмов.
Среда МПА Среда Сабуро
Результат:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Б) определение патогенных организмов
Среда Эндо среда ВСА среда ЖСА
Результат:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Методика исследования____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Нормативы______________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 3. Испытание на стерильность
Цель: учесть результат испытания на стерильность глазных капель методом мембранной фильтрации. Сделать заключение.
Среда Сабуро Тиогликолевая среда
Результат:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Среды, применяемые для оценки стерильных ЛС:
1.___________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________
Методы, применяемые для оценки стерильных ЛС:
1.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Методика исследования____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Критерии оценки результата_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 4. Испытание на пирогенность
Цель: определить наличие колоний с пирогенными свойствами в посеве 0,5 мл дистиллированной воды на среде МПА, используемой для приготовления инъекционных растворов. Дать заключение.
Результат:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ СПРАВКА
Критерии оценки санитарного режима технологического процесса при изготовлении лекарств
1. Наличие в исследуемых объектах кишечной палочки или протея, свидетельствует о грубом нарушении санитарного режима технологического процесса изготовления лекарств, а также правил личной гигиены и требует принятия безотлагательных мер по наведению санитарного порядка.
2.Наличие микроорганизмов в глазных каплях указывает на нарушение правил асептики при их изготовлении или режима стерилизации (консервации). Согласно требованиям Гос.Фармакопеи глазные капли после их приготовления должны быть стерильны.
З.В соответствии с требованиями Гос.Фармакопеи в инъекционных растворах, взятых на анализ перед стерилизацией не позднее 1-1,5 час после их изготовления, допускается 20-30 непатогенных микроорганизмов в 1 мл. В дистиллированной воде на изготовление инъекционных растворов допускается 10-15 непатогенных бактерий в 1 мл. Более высокая микробная загрязненность инъекционных растворов перед стерилизацией, а особенно наличие в них Гр- бактерий, которые в 10 раз более пирогенны Гр+, указывает на возможность возникновения пирогенных свойств у этих растворов. В этом случае необходимо немедленно принимать меры к наведению санитарного порядка.
4. Высокая микробная загрязненность, не стерильность лекарств, а также резкое колебание в них микрофлоры свидетельствует о нарушении санитарного режима технологического процесса изготовления лекарств и требует принятия мер, направленных на улучшение санитарного состояния качества аптечной продукции. Международная фармакопея и постоянная комиссия по химической промышленности СЭВ допускает содержание в нестерильных лекарствах и медикаментах – сапрофитных бактерий не более 1000 микробных тел в 1 г или мл.
5. Оценку санитарного состава воздуха аптечных помещений как источника микробной загрязненности аптечной продукции следует проводить по нормам. При оседании микрофлоры больше указанных норм в аптеке следует провести тщательную уборку с применением дезинфицирующих средств, а также наладить гигиенический и целесообразный воздухообмен аптечных помещений.
к Работе №1
Методика: В асептических условиях взвешивают 1.0 г сухого растительного сырья и помещают его в пробирку с 9 мл стерильного физ.раствора; затем содержимое пробирки встряхивают на шуттель – аппарате в течение 30 минут, после чего из полученной взвеси готовят ряд десятикратных разведений (1:10, 1:100, 1:1000)и засевают по 0.1 мл каждого разведения «газоном на чашки Петри с МПА с сусло-агаром и посев делают в глубину расплавленного агара. Выращивают микроорганизмы при 37°С и 24°С в течение 24-48 часов.
Нормативы: 1000 микробных клеток на 1 г, из них 100 дрожжевых и плесневелых грибов.
к Работе №2
Испытание проводят двухслойным агаровым методом в чашках Петри.
Образец ЛС в количестве 10 г растворяют, суспензируют, эмульгируют фосфатно-буферным раствором так, чтобы конечный объём был равен 100 мл.
Определение общего микробного числа бактерий
Приготовленный раствор образца вносят по 1 мл в каждую из 2-х пробирок с 4 мл расплавленной охлажденной при температуре от 45 до 50°С на среду МПА. Быстро перемешивают содержимое пробирки и переносят в чашку Петри, содержащую 15-20 мл застывшей питательной среды, и равномерно распределяют верхний слой агара. Инкубируют 5 суток при температуре 30-35°С. Затем подсчитывают число бактериальных колоний на 2-х чашках, находят среднее значение их количества и, умножая его на показатель, вычисляют число бактерий в 1 гр (мл) образца.
Для получения достоверных результатов учитывают только те чашки, на которых выросло от 30 до 300 колоний. Если при разведении образца 1:10 нет роста, результат отмечают образом: «в 1 г ЛС (сырья менее 10 бактерий)».
Если число колоний на чашке превышает 300, делают ряд дальнейших последующих разведений (1:100, 1:1000 и т.д.), выбирая для посева разведение наиболее соответствующее указанному выше уровню.