20. Проведение иммунологических реакций на беременность

Иммунологический метод определения беременности  Канд. биол. наук Н. Н. Куликова, М. Ф. Фейзулла 

Для диагностики ранних сроков беременности предложе­но ряд методов, основанных на выявлении в моче хориального гонадотропина (реакция Ашгейм-Цондека, Галли-Майнини, Фридмана).  В настоящее время предложены иммунологические методы диагностики ранних сроков беременности (Вгоdу и Сагlssгоm, Мс Кеап, Swochwier, Wide и Gemzell).  Принцип последних заключается в том, что хорионический гонадотропин, который содержится в моче беременной жен­щины, тормозит реакцию агглютинации эритроцитов соответ­ствующей антисывороткой, нейтрализуя ее действие; реакция агглютинации не наступает. В этих случаях эритроциты осе­дают на дно лунки (реакция ставится в специальных матри­цах из плексигласа с лунками размером 15 х 5 мм), образуя характерное кольцо.  В этом случае реакция считается положительной (данная женщина беременна).  Реакция считается отрицательной, если наступает полная гемагглютинация: эритроциты равномерно распределяются по дну лунки.  Для исследования берется утренняя порция мочи, наиболее концентрированная и содержащая наибольшее количество хо­риального гонадотропина.  На основании своих исследований ряд авторов пришли к выводу, что иммунологическая реакция дает достаточно точ­ные результаты и может быть использована в практической деятельности.  Д. Валло, И. Сас, Й. Перкеди (1965), исследуя мочу 50 не­беременных женщин, получили у всех отрицательную реак­цию; из 185 беременных только в 2 случаях иммунологиче­ская реакция не совпала с клиническими данными. С. М. Мар­тынов и Б. П. Стершок (1965) получили правильный ответ в 94% случаев. Е. И. Котлярская и К. Г. Роганова (1965) счи­тают, что при нормально развивающейся беременности имму­нологический метод в 97,2% случаев дает правильный ответ.  Эти же исследования показали, что наличие беременности иммунологическим методом можно установить уже при за­держке менструации на одну неделю: по-видимому, к этому времени организм беременной женщины вырабатывает доста­точное количество хориального гонадотропина, во всяком слу­чае такое количество, которое уже дает реакцию.  Целью нашего исследования явилось изучение иммуноло­гического метода определения беременности и сравнение полу­ченных результатов с результатами, полученными реакцией Ашгейм-Цондека.  Мы пользовались методом Wide и Gemzell, модифициро­ванного Е. И. Котлярской и К. Г. Рога новой.  Для постановки реакции необходимы следующие реак­тивы:         Хориогоннн (венгерский препарат), активность 1500 МЕ в ампуле.         Фосфатно-солевой буфер рН 7,2 и рН 6,4.         Физиологический раствор хлористого натра.         Сыворотка кролика, иммунизированного хориогонином.         Бараньи эритроциты.         3% раствор формалина.         Раствор таниновой кислоты в концентрации 1 : 40ООО.  Реакция полностью проявляется в течение 1,5—2 часов.  Этим методом обследовано 247 беременных и неберемен­ных женщин, с мочей которых поставлено 494 реакции.  В первую группу вошли 23 беременные женщины. Срок беременности у 22 женщины—5—10 недель, у одной женщины 33—34 недели. У 'всех женщин со сроком беременности 5— 10 недель был получен положительный ответ. У беременной А. (срок беременности 33—34 недели) моча была прислана для постановки биологической реакции на беременность, так как женщина в последние 10 дней перестала ощущать шеве­ление плода. Иммунологическая реакция оказалась отрица­тельной. Диагноз — мертвый плод, в последующем клинически подтвержден.  Вторая группа — 46 женщин небеременных. В эту группу мы включили женщин с нарушением менструального цикла, хроническим аднекситом, дисфункцией яичников, геморраги-ческой метропатией и т. д.). Во всех случаях результат имму­нологической реакции — отрицательный. В третью группу вошло 11 женщин с диагнозом внематоч­ная беременность (диагноз подтвержден гистологически).  Иммунологическая реакция положительной былу у 8 жен­щин, отрицательной у 3.  У 194 женщин реакция поставлена параллельно двумя ме­тодами — методом Ашгейм-Цондека и иммунологическим. При постановке реакции Ашгейм-Цондека положительных ответов получено 90, отрицательных 81, в 23 случаев результат ока­зался сомнительным. Поскольку сомнительной реакция Аш- гейм-Цоидека чаще всего наблюдалась у женщин, страдаю­щих различными воспалительными заболеваниями гениталий мы сочли возможным отнести эти данные к отрицательным. Таким образом оказалось, что реакция Ашгейм-Цондека в 90 случаях положительная, в 104 — отрицательная. При по­становке иммунологической реакции положительных ответов получено 55, отрицательных 139.  У 80 обследованных женщин нам удалось выяснить окон­чательный клинический диагноз. Этих женщин мы разделили на три группы. Полученные данные приведены в таблице.  Данные иммунологической реакции:

 

Диагноз	Количество обследованных	Результаты
		положительные	отрицательные
Беременные	24	22	1*)
Воспалительные заболевания	4(>	—	46
Внематочная беременность	11	8	3

1 Обследована жешцина с неразвииающенся беременностью.  Итак, из 34 беременных положительные ответы, иммуноло­гической реакции получены у 30; у 46 небеременных женщин иммунологическая реакция была во всех случаях отрицатель­ная.  Таким образом, из представленных данных видно, что им­мунологическая реакция достаточно специфична и чувстви­тельна. Техника выполнения реакции очень проста. Иммуно­логический метод более экономичен по сравнению с другими биологическими реакциями. 

Так как плодное яйцо (эмбрион) является инородным телом для женщины, реакция ее организма на беременность основана на иммунологическом ответе, что доказано многочисленными исследованиями.

При беременности доминирует гуморальный иммунитет, поэтому увеличивается выработка антител, в то время как клеточный иммунитет, когда специальные клетки (белые клетки крови) уничтожают попавшие в организм инородные тела, в том числе продукты зачатия, значительно понижается, что предотвращает реакцию отторжения плодного яйца.

В главах, посвященных менструальному циклу, упоминалось о значении воспалительной реакции, насыщенности эндометрия разными иммунологическими факторами, в том числе лимфоцитами. Два важных вида лимфоцитов имеются в эндометрии, а также циркулируют в крови женщины. Т-хелперы 1 (Th1) отвечают за клеточный иммунитет, выделяя специальное вещество – цитокинин гамма-интерферон. Т-хелперы 2 (Th2) отвечают за гуморальный иммунитет и выработку антител. Беременность называют Th2-феноменом, потому что при нормальной имплантации при беременности происходит сдвиг из Th1-состояния, доминирующего до беременности, в Th2-состояние. Считается, что прогестерон играет роль иммуномодулятора, контролирующего трансформацию доминирования клеточного в гуморальный иммунитет при беременности.

Прогестерон также понижает активность других клеток иммунной защиты на клеточном уровне и стимулирует выработку так называемых ассиметричных антител. Ассиметричные антитела принадлежат к IgG классу антител. Здоровая беременность сопровождается наличием почти 30% ассиметричных антител по сравнению с патологической беременностью или у небеременных женщин. Особенность этих антител в том, что они маскируют клеточные элементы плода (плодного яйца и эмбриона), не позволяя защитной системе матери включить другие механизмы защиты, то есть предотвращают реакцию полной иммунной защиты от инородных тел.

Во время беременности активированные лимфоциты в присутствии прогестерона начинают вырабатывать белок - прогестерон-индуцированный блокирующий фактор (PIBF), который влияет на иммуномодулирующий эффект прогестерона. Этот фактор вызывает Th1/Th2 сдвиг. При нормальной беременности уровень прогестерон-индуцированного блокирующего фактора растет вплоть до 37 недель беременности.