Методичка-Фармацевтична ботаніка / 3
.docМетодична вказівка до лабораторного заняття з дисципліни “Фармацевтична ботаніка” для студентів
ЗАНЯТТЯ 3
ТЕМА. Включення рослинної клітини, їх класифікація, діагностичне значення в мікроскопічному аналізі.
АКТУАЛЬНІСТЬ: Наявність запасних речовин та включень, їх форми і розміщення є характерною ознакою для окремих рослин і родин. Тому вміння виявляти і розпізнавати включення у рослинах має значення при ідентифікації окремої рослинної сировини.
НАВЧАЛЬНІ ЦІЛІ:
ЗНАТИ: - форму та розміри крохмальних зерен різних видів рослин;
- форму кристалів оксалату кальцію однодольних і дводольних
рослин;
- якісні реакції на крохмаль і білки.
ВМІТИ: - виготовляти мікропрепарати запасної тканини органів рослин;
- виготовляти мікропрепарати поперечних зрізів насінин і стебел;
- проводити мікроскопічне визначення крохмальних і
алейронових зерен та нерозчинних кристалічних включень;
- проводити якісні реакції на крохмаль і білки;
- зарисувати крохмальні і алейронові зерна та кристали всіх
форм;
- описувати результати досліджень.
ЗАВДАННЯ ДЛЯ САМОСТІЙНОЇ ПОЗААУДИТОРНОЇ РОБОТИ
1. Вивчити теоретичний матеріал до теми:
Запасні речовини. Включення. Крохмаль. Інулін. Алейронові зерна. Жирні олії. Цистоліти. Оксалат кальцію і його форми.
2. Підготувати вихідні дані для протоколу лабораторної роботи.
КОНТРОЛЬНІ ПИТАННЯ
-
Запасні речовини рослинної клітини. Їх локалізація.
-
Хімічний склад і діагностичні ознаки продуктів запасу клітини.
-
Види кристалічних включень у клітинах рослин. Форма і діагностичне значення.
-
Процес утворення включень.
-
Реактиви і барвники для виявлення рослинних включень.
-
Практичне застосування ергастичних речовин.
САМОСТІЙНА АУДИТОРНА РОБОТА
ОБЛАДНАННЯ: мікроскопи, лупи, предметні і покривні скла, бритви, препарувальні голки, пінцети, крапельниці, вода очищена, реактиви, таблиці, постійні мікропрепарати.
ОБ’ЄКТИ ДОСЛІДЖЕНЬ: бульби картоплі, зернівки пшениці, насіння рецини, сухі луски цибулі, листки алоє або конвалії, черешки бегонії або щавлю, корені кульбаби.
ЗАВДАННЯ 1. Ознайомитись з будовою та формою крохмальних зерен у бульбі картоплі, замалювати прості, напівскладні та складні крохмальні зерна, показати шаруватість та центри крохмалоутворення.
Розрізати бульбу картоплі, потерти зрізаною частиною по предметному склу, або кінчиком скальпеля перенести краплю соку з бульби на предметне скло, розбавити водою і накрити покривним скельцем. Препарат розглянути під мікроскопом спочатку під малим , а потім - великим збільшенням. Якщо зменшити діафрагму, то крохмальні зерна і їх шаруватість буде чіткіша. Замінити воду на розчин йоду в калії йодиді. Зерна крохмалю забарвлюються у синій колір. Занадто забарвленні зерна здаються чорними. Пересуваючи препарат на предметному столику можна знайти складні та напівскладні зерна між основною масою простих зерен.
ЗАВДАННЯ 2. Розглянути будову ендосперму зернівки пшениці, знайти клітини з алейроновими зернами та клітини з крохмальними зернами. Замалювати схему зрізу, позначити оболонки зернівки та насінини, алейронові зерна, крохмальні зерна, зафарбувати їх у відповідний колір.
Виготовити тонкі зрізи сухої зернівки пшениці, перенести їх на предметне скло, нанести краплю розчину йоду в йодистому калії, розбавити 1-2 краплями води, накрити покривним скельцем. Зайву воду відсмоктати фільтрувальною смужкою паперу. Під малим збільшенням мікроскопу добре помітний золотистий шар клітин, заповнених дрібними округлими алейроновими зернами. Він міститься під шкіркою зернівки. Основна маса зернівки представлена крохмальними зернами синього кольору.
ЗАВДАННЯ 3. Розглянути складні алейронові зерна та краплі олії в клітинах ендосперму насінини рицини. Замалювати 1-2 клітини зі складними алейроновими зернами та краплі олії, позначити: кристалоїд, глобоїд, оболонку алейронового зерна.
Тонкий зріз ендосперму рицини витримати у суміші ефіру зі спиртом (щоб позбавитись олії), перенести у краплю води і додати краплю гліцерину. Під великим збільшенням мікроскопа знайти клітини з одним або декількома алейроновими зернами. В зернах добре помітні кристалоїд разом з глобоїдами.
Другий тонкий зріз ендосперму рицини перенести у краплю води, потім більшу частину її замінити на Судан ІІІ і накрити покривним скельцем. Обережно декілька разів препарувальною голкою натиснути на покривне скельце. Краплі олії оранжево-червоного кольору надходять до краю препарату, що добре помітно вже при малому збільшенні мікроскопа.
ЗАВДАННЯ 4. Розглянути та замалювати кристали кальцію оксалату у сухих лусках цибулі.
Шматочок зовнішньої сухої цибулі перенести з гліцерину, накрити покривним скельцем і розглянути при малому та великому збільшенні мікроскопа. Майже у всіх клітинах видно призматичні, іноді зрослі хрестоподібні, прості кристали кальцію оксалату.
ЗАВДАННЯ 5. Ознайомитись з різними типами кристалічних включень: листка алоє (або листка конвалії), черешка бегонії (або щавлю), замалювати, зробити позначення: рафіди, друзи.
Спочатку ознайомитись із зовнішнім виглядом кристалів оксалату кальцію на малюнках і таблицях. Після цього виготовити препарати поперечного зрізу листка алоє (або листка конвалії), черешка бегонії (або щавлю).
На першому препараті знайти клітини, заповнені голчастими кристалами. Поодинокі голчасті кристали краще розглядати на препараті з соку листка алоє. Для цього видавити 2-3 краплі соку на предметне скло, накрити покривним скельцем. При малому та великому збільшенні добре помітні поодинокі довгі блискучі голчасті кристали-рафіди.
На препараті з черешка бегонії теж помітні, але дуже дрібні, блискучі кристали у вигляді друз.
ЗАВДАННЯ 6. Виготовити тимчасовий препарат з коренів кульбаби. Розглянути та замалювати кристали інуліну.
З фіксованих у спирті коренів кульбаби зробити тонкі поздовжні або поперечні зрізи. Перенести їх на предметне скло у краплю гліцерину, накрити покривним скельцем і розглянути під мікроскопом при малому та великому збільшенні. Інулін має вигляд сферокристалів. Це скупчення голчастих кристалів, що променево розходяться від кутів клітин. В кожній клітині може бути кілька сферокристалів інуліну. Іноді в кристалах помітні концентричні шари та радіальні тріщини. Якщо на препараті гліцерин замінити на теплу воду, то кристали зникнуть, тому що інулін добре розчиняється у воді.
ЛІТЕРАТУРА
Основна
-
Ткаченко Н.М., Сербін А.Г. Ботаніка. - Харків: Основа, 1997. – С. 27-39.
-
Сербін А.Г., Сіра Л.М., Слободянюк Т.О. Фармацевтична ботаніка. Підручник. – Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 15-33.
-
Медицинская ботаника = Botanique medicale = Medical botany: Ученик для студентов вузов / А.Г. Сербин, Л.М. Серая, Н.М. Ткаченко, Т.А. Слободянюк. – Х.: Изд-во НФАУ: Золотые страницы, 2003. – С. 22-27.
-
Нечитайло В.А., Кучерява Л.Ф. Ботаніка. Вищі рослини. - К.: Фітосоціо-центр. - 2000. – С. 10-21.
-
Яковлев Г.П., Челомбитько В.А. Ботаника. - М.: Высшая школа, 1990. – С. 20-41.
-
Хржановский В.Г., Пономаренко С.Ф. Ботаніка. - К.: Вища школа, 1985. – С. 10-35.
Методичні вказівки підготував:
доц. кафедри фармації канд. біол. наук Недоступ А.Т.
асист.Бучко О.В.
Обговорено і затверджено на засіданні кафедри "____" ________ 200 р.
Протокол №
Завідувач кафедри фармації доц. Грицик А.Р.