12.1.3. Возбудитель псевдомембранозного энтероколита

Clostridium difficille открыт Холлом и Тулом (1935). Факторами вирулентности возбудителя выступают белковые токсины:

1.Токсин А (энтеротоксин) вызывает диарею и обладает летальным действием, приводит к активации мембраноассоциированной гуанилатциклазы и нарушению транспорта электролитов в кишечнике, подавлению абсорбции ионов натрия и повышению секреции ионов хлора;

2.Токсин В (цитотоксин) обладает летальным действием, нарушает функции мембран, ингибирует синтез белка.

Высокая резистентность этого вида к антибиотикам широкого спектра действия определяет его способность к обширной колонизации кишечника у людей, подвергающихся антибиотикотерапии.

Размножение микробов в кишечнике сопровождается секрецией больших доз токсина, действующего на кишечную стенку.

Заболевание протекает в двух основных клинических формах: антибиотиковый колит (профузная водянистая диарея, коликообразные боли в животе, повышение температуры тела до 39°С и выше); псевдомембранозный энтероколит – характеризуется выделением с фекалиями пленчатого материала (фибрин со слизью).

Инфекция, вызываемая C. difficille – госпитальная, встречается в 3 раза чаще, чем сальмонеллез. C. difficille чувствителен к метронидазолу, ванкомицину.

12.1.4. Клостридии ботулизма

Ботулизм – инфекционная болезнь, характеризующаяся интоксикацией организма с преимущественным поражением ЦНС, возникающим при употреблении пищевых продуктов, содержащих экзотоксины возбудителя – Clоstridium botulinum.

Возбудитель ботулизма открыт Э. Ван Эрменгемом (1896), выделившим микроб из организма погибшего человека и остатков колбасы, которую тот принимал в пищу (отсюда название: лат. botulus – колбаса).

Свойства. Представляют собой палочки с закругленными концами, размерами 4-9х0,6-1,0 мкм, образуют субтерминальные споры, отсюда имеют вид теннисной ракетки, подвижные перитрихи, грамположительны.

C. botulinum – строгий анаэроб. Растет на среде Китта-Тароцци, температурный оптимум 25-35°С, pH – 7,2-7,4. На кровяном агаре образует мелкие сероватые колонии с зоной гемолиза. В высоком столбике сахарного агара имеет вид пушинок или зерен чечевицы.

Разлагают сахара, желатин, белки, выделяют сероводород.

Антигенные свойства. Возбудитель имеет О и Н антигены и выделяет экзотоксин. В зависимости от антигенной структуры экзотоксина различают 8 сероваров возбудителя: А, В, С_1(a), С_2(b), D, Е, F, G Наиболее патогенны для людей серовары А, В, Е. Для идентификации возбудителя используется антигенная специфичность токсинов.

Резистентность. Споры C. botulinum высокорезистентны к различным воздействиям, выдерживают кипячение в течение 6 часов, длительное высушивание, замораживание при -253°С. Сохраняют жизнеспособность в 5% растворе фенола до 1 суток.

Экология. C. botulinum обитают в кишечнике животных, молллюсков, раков, попадают в почву с фекалиями. Могут размножаться в овощных, рыбных и мясных консервах, особенно домашнего изготовления.

Фактор патогенности – экзотоксин, самый сильный из всех биологических ядов. Смертельная доза для человека 0,1 нг/кг веса человека. Ботулинический экзотоксин оказывает нейротоксическое, гемагглютинирующее действие (мишень действия – Zn-металлопротеаза). Его особенности: высокая устойчивость к нагреванию – при 100°С сохраняется в течение 10-15 минут; устойчив к кислой среде, к высоким концентрациям NaCl, к замораживанию, к пищеварительным ферментам.

Характеристика заболевания

Патогенез. Ботулинический токсин обладает нейротропностью. Он попадает с пищей в кишечник и адсорбируется на клетках эпителия. Устойчивый к действию пищеварительных ферментов, токсин быстро всасывается через стенку кишечника в кровь, обусловливает длительную токсинемию, поражает периферические нервные окончания (a-моторные нейроны передних рогов спинного мозга). Токсин попадает в нервно-мышечные синапсы. Экзотоксин состоит из двух субъединиц. Одна субъединица токсина связывается мембраной синаптосомы, а другая проникает в нервную клетку путем эндоцитоза и ингибирует кальций-зависимое освобождение ацетилхолина, блокирует функциональную активность нейрона, вызывает разрушение синаптических белков (синаптобревина, целлюбревина). В результате наступает паралич мышц.

Клиника. Инкубационный период продолжается от 6-24 часов до 2-6 дней. Чем короче инкубационный период, тем тяжелее протекает болезнь. Заболевание начинается остро, но температура остается нормальной. Возможны различные варианты ботулизма с преобладанием симптомов поражения ЖКТ или расстройством зрения и дыхательной функции. В первом случае заболевание начинается с появления сухости во рту, тошноты, рвоты, поноса. Во втором случае первые проявления болезни связаны с нарушением зрения (больной жалуется на туман перед глазами и двоение). В результате паралича мышц гортани появляется осиплость голоса, а затем голос может пропадать. Отмечается расстройство аккомодации, опущение верхнего века (птоз), расширение зрачка – мидриаз, головная боль, головокружение. Может наступить паралич дыхания. Кроме поражения ЦНС, ботулотоксин вызывает периферические нарушения нервно-мышечной передачи, которые проявляются вялостью движений, развитием параличей мышц (глазных, глоточных, гортанных, шеи, конечностей). Летальность до 60%.

Раневой ботулизм возникает при загрязнении некротизированных тканей почвой.

Иммунитет. После перенесенного заболевания иммунитет не формируется. Антитела, которые вырабатываются в течение заболевания, направлены против определенного серовара.

Лабораторная диагностика

1.Экспресс-метод – постановка РПГА с эритроцитарным антительным антитоксическим диагностикумом с целью быстрого обнаружения экзотоксина в крови больного. Можно использовать ИФА и ВИЭФ.

2.Биологический метод (реакция нетрализации токсина антитоксином in vivo) позволяет обнаружить экзотоксин в материале (остатки пищи, рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, кровь, секционный материал – печень, кишечник, желудок). Мышам внутрибрюшинно вводят фильтрат материала в смеси с поливалентной противоботулинической сывороткой А, В, Е. Другая группа мышей получает материал без сыворотки. В том случае, когда животные второй группы погибают, ставят развернутую реакцию нейтрализации для определения типа экзотоксина.

3.Бактериологический метод. Материал засевают на среду Китта-Тароцци, далее производят пересев в высокий столбик сахарного агара, а затем идентифицируют культуру и в реакции нейтрализации определяют экзотоксин.

Профилактика и лечение. При наличии ранних признаков ботулизма, а также лицам, принимавшим зараженную пищу, вводят противоботулиническую антитоксическую сыворотку. Когда неизвестен серовар токсина, вводят поливалентную сыворотку против токсинов А, В, С, Е, а после определения типа экзотоксина – соответствующую моновалентную.

Для специфической профилактики применяют анатоксины типов А, В, Е, в том числе в составе ряда ассоциированных вакцин.