- •A) Определение концентрации микроорганизмов в счетной камере.
- •Б) Определение концентрации живых микроорганизмов путем высева на плотные питательные среды
- •В) раздел пропущен за ненадобностью
- •2. Определение концентрации бактерий, фагов, вирусов и риккетсий по результатам посева крайних разведений исследуемой культуры на жидкие питательные среды
- •Действие различных доз культуры вируса западного энцефаломиелита лошадей на культуру тканей куриного эмбриона
- •Коэффициенты для расчета границ доверительных интервалов концентраций, вычисленных по формуле (34)
Действие различных доз культуры вируса западного энцефаломиелита лошадей на культуру тканей куриного эмбриона
№ п/п |
Доза культуры вируса в мл |
Общее число зараженных вирусом проб тканевой культуры |
Число проб, в которых происходил рост вируса (изменилась окраска индикатора) |
Число проб, в которых роста не отмечено |
1 |
0,410-4 |
5 |
5 |
0 |
2 |
0,410-5 |
5 |
4 |
1 |
3 |
0,410-6 |
5 |
5 |
0 |
4 |
0,410-7 |
5 |
1 |
4 |
5 |
0,410-8 |
5 |
2 |
3 |
что при заражении 1-й и 3-й дозами все пробы оказались положительными. В соответствии с указанным выше правилом результат заражения этими дозами не следует принимать во внимание при расчете. Подставив в формулу результаты заражения 2, 4 и 5-й дозами, получаем:
=0,76106 ед/мл.
Посмотрим теперь, как рассчитывать доверительные интервалы концентраций, находимых с помощью описанного выше метода. Здесь можно обойтись без помощи какой-либо формулы. Для практических целей достаточны, как правило, данные о величинах доверительных интервалов в относительном выражении, приведенные в табл. 26 (по данным работы Чанга и сотр. [51]).
Таблица 26
Коэффициенты для расчета границ доверительных интервалов концентраций, вычисленных по формуле (34)
Отношение величины каждой предшествующей дозы к последующей* |
Число проб среды (тест-культуры), которые заражаются данной дозой |
Вероятность, с которой оценивается доверительный интервал |
|
95 % |
99 % |
||
4 |
5 |
|
|
4 |
8 |
|
|
4 |
10 |
|
|
10 |
5 |
|
|
*Для каждого определения это отношение должно быть постоянным
51. Chang S.L. and other. – Virology, 1958, 6, 27.
Пояснить применение табл. 26 можно с помощью уже использованного выше примера. Поскольку отношение величины каждой предшествующей дозы к последующей составляет там 10, а число проб на дозу 5, то для вероятности 95 % находим по таблице коэффициент . Следовательно, действительные значения концентрации с вероятностью 95 % заключено в интервале или от до единиц/мл.
В заключение раздела отметим, что иногда обработку данных, подобных приведенным выше, производят, вычисляя срединную дозу, вызывающую заражение в среднем 50 % проб, т.е. . Это дает не только менее точный результат, но и лишь условную оценку концентрации культуры, в то время как формула (34) позволяет, как правило, вычислить концентрацию, выраженную числом живых микроорганизмов в единице объема.