Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
БХ учебник Николаев.pdf
Скачиваний:
579
Добавлен:
02.05.2015
Размер:
15.53 Mб
Скачать

Глава I. Строение, свойства и функции белков

5 9

активность будет возрастать; по степени возрастания удельной активности можно судить об эффективности каждой стадии очистки. Если начиная с какой-то стадии очистки удельная активность больше не увеличивается, то можно считать, что уда­ лены все посторонние белки, т. е. получен индивидуальный (гомогенный) белок. Величина, показывающая, во сколько раз возросла удельная активность в процес­ се очистки, называется степенью очистки (см. табл. 1.9).

ш я ш ш ш я т я я »

I l l i i i e i

Обшяи

 

У'1С.1Ы1яя

 

 

Объем

концент­

Актив­

Выход,

Степень

ак1иинм.п.

ШЯтшШШШШШЩШ0аВтМ

раствора,

рация

ность,

Cia.iHH OHticiKH

ед. на I mi

ИММИИМЙ

ОЧНСГКИ

 

M .I

белков,

ед/м.1

 

 

 

 

 

 

MI/мл

 

 

 

 

Экстракт

440.0

3,00

15

5

100

1,0

Нагревание при 55 0C

420,0

1,25

15

24

95

4,8

в течение 5 мин

3,6

1,00

80

80

45

16,0

Осаждение сульфатом

аммония (40-70 %

 

 

 

 

 

 

насыщения)

 

 

 

 

 

 

Хроматография на

1,5

0,45

120

260

28

52.0

сефадексе G -100

 

0,90

HO

1200

25

240,0

Аффинная

1,5

хроматография

 

 

130

2600

20

520,0

Кристаллизация

1,0

0,05

Перекристаллизация

1,0

0,05

130

2600

20

520,0

В процессе очистки неизбежны потери выделяемого белка: они связаны с де­ натурацией, а также с частичным попаданием выделяемого белка во фракции, которые отбрасываются.

При очистке каждого белка приемы и их последовательность подбираются эмпирически, методом проб и ошибок. Поэтому разработка процедуры выделения нового белка остается сложной и трудоемкой задачей.

ИЗМЕНЕНИЯ БЕЛКОВОГО СОСТАВА ОРГАНИЗМА

Общая концентрация белков в клетке, как правило, близка к 20 %, а в некоторых клетках заметно больше (например, в эритроцитах 35 %). В клеточных органеллах концентрация белков еще больше (например, в матриксе митохондрий около 40% ).

Белковый состав организма взрослого здорового человека более или менее постоянен, однако возможны изменения содержания отдельных белков в зависи­ мости от физиологической активности, состава пищи и режима питания, цикли­ ческие изменения (биоритмы). В процессе развития организма, особенно на са­ мых ранних стадиях (от зиготы до формирования дифференцированных органов со специализированными функциями), белковый состав изменяется значительно. В основе различий структуры и функции специализированных клеток лежат раз­ личия их химического состава, прежде всего белкового. Например, эритроциты содержат гемоглобин, обеспечивающий транспорт кислорода кровью; мышечные

60

Часть I. Строение информационных молекул и матричные биосинтезы

клетки содержат сократительные белки актин и миозин; в клетках сетчатки глаза есть белок родопсин, способный улавливать фотоны, и т. д. Многие белки содер­ жатся во всех или почти во всех клетках, но могут быть в разных количествах. При болезнях белковый состав тканей изменяется. Эти проявления болезней называ­ ют протеинопатиями. Различают протеинонатии двух типов — наследственные и приобретенные.

Наследственные протеинопатии — результат первичного повреждения в ге­ нетическом аппарате организма. При этом или какой-либо белок не образуется во­ обще, или синтезируется измененный по структуре, «неправильный» белок. При­ мером может служить серповидно-клеточная анемия (одна из гемоглобинопатий), при которой вместо HbA образуется HbS, хуже выполняющий функцию транспор­ та кислорода. Во многих случаях нарушение синтеза даже одного белка является фатальным для организма или приводит к тяжелой болезни. Например, индиви­ ды, гомозиготные по HbS, погибают от малокровия в раннем детском возрасте.

Приобретенные протеинопатии, по-видимому, сопровождают любую из болез­ ней, однако в клинической практике имеют значение лишь достаточно выражен­ ные случаи. При приобретенных протеинопатиях первичная структура белков не изменяется, изменяется количество белка или его распределение в тканях, или нарушается функция белка в связи с изменением условий в клетке. Например, при некоторых формах гастрита в клетках слизистой желудка прекращается образова­ ние белка, обеспечивающего всасывание витамина B12. В результате развивается тяжелая форма анемии (злокачественная анемия, см. гл. 7).

Определение содержания в тканях и жидкостях организма того или иного белка нередко служит удобным, а часто, особенно в случае наследственных протеинопатий, и наиболее точным методом диагностики заболевания. Например, на­ личие HbS в эритроцитах указывает на серповидно-клеточную анемию, а не на какую-либо другую форм)' анемии.

Тут вы можете оставить комментарий к выбранному абзацу или сообщить об ошибке.

Оставленные комментарии видны всем.