- •1. Теоретические основы процесса экстрагирования
- •Факторы, влияющие на процесс экстрагирования
- •2. Методы экстрагирования лекарственного сырья
- •3. Рекуперация и ректификация
- •4. Экстракционные препараты
- •4.1. Настойки (Tincturae)
- •4.2. Экстракты (Extracta)
- •Экстракты-концентраты
- •Масляные экстракты
- •4.3. Новогаленовые препараты
- •Номенклатура новогаленовых препаратов
- •4.4. Препараты индивидуальных веществ растительного лекарственного сырья
- •Технология препаратов индивидуальных веществ
- •4.5. Биогенные стимуляторы
- •4.6. Препараты из свежих растений
- •Соки растений
- •Несгущенные соки
- •Сгущенные соки
- •4.7. Органопрепараты
- •Требования, предъявляемые к сырью для получения органопрепаратов:
- •Метод производства Технология препаратов из высушенных органов животных
- •Технология препаратов для парентерального введения
- •4.8. Водные извлечения из лекарственного
- •Аппаратура для изготовления водных извлечений
- •Технология водных извлечений с использованием экстрактов–концентратов (стандартизованных экстрактов)
- •Совершенствование технологии водных извлечений
Технология препаратов для парентерального введения
Особое внимание в технологии этой группы препаратов уделяется очистке от балластных примесей. Особенности рассмотрены на примере инсулина.
Инсулин (Insulinum) – гормон поджелудочной железы, который вырабатывается бетта-клетками островков Лангерганса. Химическая природа его – белок. Молекула инсулина человека состоит из двух полипептидных цепей – А и В, соединенных двумя дисульфидными связями. А-цепь содержит 21, а В-цепь – 30 аминокислотных остатков. М.м. инсулина 58 тыс.
Получение инсулина состоит из следующих стадий:
Измельчение замороженных поджелудочных желез и экстракция кислым спиртовым раствором.
Осаждение балластных белков 9рН 7,5) и освобождение от липидов.
Изоэлектрическое осаждение фракции инсулина (при рН 5,5) и осаждение спиртом, ацетоном, эфиром.
Очистка инсулина: осаждение солями, фракционирование методами хроматографии, гель-фильтрации и др.
Осаждение инсулина в виде кристаллов.
Переосаждение цинк-инсулина.
Свежие или замороженные поджелудочные железы измельчают на мясорубке-волчке и экстрагируют способом бисмацерации первый раз 80-85% этанолом в реакторе с мешалкой. Второй раз экстрагируют 57% этанолом, который подкислен ортофосфорной кислотой 9хлороводородной или серной0 до значения рН 2,8-3. Экстракцию проводят 1,5-4 ч при постоянном перемеши-вании. Подкисленный спирт способствует инактивации фермента трипсина, находящегося в поджелудочной железе, благодаря чему удается сохранить инсулин в неизменном состоянии. На Минском заводе эндокринных препаратов используют роторно-пульсационный аппарат для экстракции, что в значи-тельной мере определяет интенсивность экстрагирования инсулина (1,5 ч).
Полученные вытяжки объединяют, оставляют на холоду на 48 ч для освобождения от нежелательных белков, которые выпадают в виде осадка. Осадок отделяют центрифугированием и удаляют. Затем для выделения и очистки инсулина применяют ионообменную хроматографию (наиболее прогрессивный способ очистки). Осуществляют сорбцию инсулина из прозрачной жидкости на макропористом сульфокатионите КУ-33-30/100 при значении рН 3,0-3,3 в режиме псевдоожижения. Жир удаляют путем промывки катионита 65-67% этанолом, при этом балластные белки удаляют промыванием 0,3М раствором ацетатного буфера (рН 5,3).
Десорбцию инсулина осуществляют быстро с помощью 0,01-0,05М раствора аммонийного буфера (при рн10) и немедленно подкисляют кислотой хлороводородной до значения рН 4,5 и добавляют ацетон. Выпавший осадок балластных веществ удаляют. Инсулин осаждают раствором цинка ацетата (при рН 6,2) – получают цинк-инсулин, который очищают кристаллизацией. Цинк-инсулин растворяют в воде, подкисленной кислотой лимонной до значения рН 2,8. Раствор отстаивают 1 ч, выпавший осадок балластных белков удаляют фильтрованием через кизельгур. Фильтрат смешивают с ацетоном, добавляют цинк хлористый и фенол, охлаждают до температуры 00С. Для медленной кристаллизации инсулина создают условия с последовательным постепенным изменением рН раствора.
Раствор подщелачивают до значения рн 8,5; оставляют на 2-3 мин, затем создают значение рН 6,8, перемешивают 1 ч; при значении рН 6,5 перемешивают 2 ч; при значении рН 6,2 и 6,0 перемешивают 2 ч и отстаивают 20 ч; при значении рН 5,8 перемешивают 2ч и отстаивают 48-96 ч при температуре 50С. Выпавшие кристаллы инсулина отделяют центрифугированием, промывают на воронке Бюхнера последовательно холодной водой очищенной, ацетоном, эфиром. Досушивание проводят на воздухе, в вытяжном шкафу и эксикаторе.