Гоу впо «Владивостокский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Кафедра биологической химии

Комплект учебно-методических материалов к

Учебно-методическому комплексу по биологической химии

Методические рекомендации

по проведению практического занятия

(для студентов)

Тема: «Биохимия соединительной ткани»

060101 Лечебное дело

060103 Педиатрия

060104 МПФ

Утверждены

на методическом совещании кафедры

от______________200_г.

Протокол №

Составитель: Двинская С.А.

Рецензент: (преподаватель кафедры)

Владивосток 2008

Практическое занятие

Тема: «Биохимия соединительной ткани»

Мотивация: Знание данного раздела дает возможность объяснять патогенез диффузных заболеваний соединительной ткани (ревматизм, ревматоидный артрит и др.), роль межклеточного матрикса в воспалительныхпроцессах, заживлении ран,старении организма, даватьоценкурезультата биохимических анализов:сиаловые кислоты,гликопротеины, серомукоиды крови, оксипролин мочи.

Знание строения, свойств и функций липидов в организме, их усвоения, окисления и синтеза в тканях дает возможность понимания причин патологии, связанной с нарушением этих процессов.

Цель обучения, воспитания и развития: Научиться применять знания о строении, функциях и метаболизме важнейших структурных компонентов межклеточногоматриксадля объяснения его струк­турно-функциональнойорганизации в норме, роли впроцессе заживления ран, измененияхпри старении и диффузных заболеваниях соединительной ткани.

Задачи, обучения, воспитания и развития: студент должен

1. Уметь писать формулы:оксипролина,аскорбиновой киспоты.

2. Знать химизм процессов: гидроксилированиепролина.

3. Знать пределы физиологических колебаний биохимических показа­те­лей: гидрокси­пролина в моче, сиаловыхкислот в крови.

4. Знать и уметь объяснять значение терминов: гидроксипролинурия (оксипролинурия), мукополисахариды, коллагенозы.

Этапы проведения занятия:

1. Вводная часть

2. Основная часть занятия: - семинар (общие и индивидуальные задания для СДС)

- лабораторная работа

3. Заключительная часть занятия (тест-контроль)

Задание на самоподготовку:

Перечень контрольных вопросов:

1. Основные структурные компоненты соединительной ткани: гликозаминогликаны и протеогликаны. Особенности строения, биосинтеза.

2. Важнейшие белки межклеточного матрикса: коллаген, эластин, фибронектин. Особенности строения, роль аскорбиновой кислоты в биосинтезе коллагена.

3. Роль соединительной ткани при заживлении ран.

4. Изменение соединительной ткани при старении и коллагенозах.

5. Биохимические маркеры патологических изменений соединительной ткани. Экскреция оксипролина как показатель скорости распада коллагена.

Задания для самоконтроля:

Тестовый контроль знаний по теме:

Выберите один правильный ответ

1. Уровень сиаловых кислот в сыворотке крови отражает:

а) активацию фибринолиза

б) степень воспалительно-деструктивных процессов

в) степень гемолиза

г) цитоз гепатоцитов

д) заболевание желчных путей с явлениями обтурации

2. Ломкость кровеносных сосудов при цинге связано с:

а) недостатоком витамина А

б) дефицитом витамина D

в) неполным гидроксилированием пептидных цепей коллагена

г) всем перичисленным

3. В заживающей ране скорость синтеза коллагена:

а) увеличивается

б) уменьшается

в) не меняется

4. Протеингликановый гель, содержащийся в матриксе хряща, придант ему:

а) прочность

б) эластичность

в) создает тургор, гасит резкие перемены нагрузки

г) все перечисленное верно

5. Какое свойство межклеточного вещества определяет его участие в регуляции водно-солевого обмена:

а) способность связывать ионы Na⁺

б) способность связывать ионы Са²⁺

в) способность создавать тургор

г) все перечисленное неверно

6. Гепарин синтезируется в:

а) гепатоцитах

б) кардиомиоцитах

в) эритроцитах

г) тучных клетках

7. Катаболизм гликозаминогликонов происходит в:

а) митохондриях

б) ЭПС

в) аппарате Гольджи

г) лизосомах

8. Основную роль в объединении компонентов межклеточного матрикса играет:

а) эластин

б) фибронектин

в) коллаген

г) гликозаминогликаны

9. Связывание воды в соединительной ткани осуществляет:

а) фибронектин

б) коллаген

в) миозин

г) гиалуроновая кислота

10. Повышенная кровоточивость может быть вызвана дефицитом:

а) витамина В₁

б) витамина С

в) ацетилКоА

г) гиалуроновой кислоты

д) всем перечисленным

Ориентировочная основа деятельности студентов (ООД) для проведения лабораторной работы:Определение сиаловых кислот.

Принцип метода. Метод основан на цветной реакции, получаемой при нагревании сиаловой кислоты (ацетилнейраминовой) с реактивом Гесса. Интенсивность буровато-розового окрашивания зависит от концентрации сиаловых кислот.

Порядок выполнения работы. К 1 мл сыворотки крови в центрифужной пробирке добавляют 1 мл 10% раствора трихлоруксусной кислоты и встряхивают. Затем пробирку помещают в кипящую водяную баню на 5 мин и охлаждают. Это приводит к освобождению связей N-ацетилнейраминовой кислоты с белковой частью молекулы гликопротеидов. После центрифугирования к 0,4 мл надосадочной жидкости добавляют 5 мл реактива Гесса и повторно кипятят в кипящей водяной бане в течение 30 мин. При этом появляется буровато-розовое окрашивание. После охлаждения проводят фотометрирование на ФЭК в кюветах на 10 мм против воды по правому барабану с зеленым светофильтром (546 нм). Полученную величину экстинкции умножают на 1000. Результат определения выражают в условных единицах в величинах экстинкции. В норме величина ее колеблется от 100 до 195 условных единиц, что соответствует содержанию сиаловых кислот от 550 до 790 мг/л (55-79 мг%) N-ацетилнейраминовой кислоты. Метод прост и быстр, более специфичен, чем дифениламиновый, но малочувствителен.

Клинико – диагностическое значение. Исследование сиаловых кислот в крови имеет важное диагностическое значение, особенно при ревматизме, туберкулезе и раке легких, злокачественных опухолях костной ткани, когда содержание их увеличивается.