- •ЗАНЯТИЕ 6
- •Метод Н-ЯМР
- •Электронная микроскопия
- •Просвечивающая электронная микроскопия тонких срезов
- •Метод замораживания-скалывания
- •Метод замораживания-скалывания
- •Дифракционные методы (РСА)
- •Биологическое значение полиморфизма липидов
- •ЗАНЯТИЕ 8
- •Интегральные белки
- •Способы связывания белков с мембраной
- •Структура липидных “якорей”
- •Структура и функции мембранных белков
- •Интегральные и периферические мембранные белки
- •Разборка мембран с помощью детергентов
- •Требования к детергентам
- •Выбор детергента
- •Методы очистки мембранных белков
- •Характеристика очищенных интегральных мембранных белков
- •2. Гидродинамические методы
- •2. Гидродинамические методы
- •ЗАНЯТИЕ 12
- •Ионофоры мембран бактериальных клеток
- •Ионофоры мембран бактериальных клеток
- •Ионофоры мембран бактериальных клеток
- •Облегченная диффузия с помощью мембранных каналов
- •Виды транспорта через мембрану
- •Каналообразующие ионофоры
- •Каналообразующие ионофоры
- •ЗАНЯТИЕ 14
- •Экзоцитоз
- •Эндоцитоз
- •ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ M.tuberculosis С МАКРОФАГОМ
- •Строение фермента Н+-АТФ-синтазы
- •Структура Н+- АТФ-синтазы
- •Н+-АТФ-синтаза – молекулярный мотор
- •КПД работы Н+-АТФ-азы ~ 100 %
МИТХТ |
Электронная микроскопия |
||
|
|||
|
|
|
|
•Характеристика частиц по размеру и форме Методы:
•Просвечивающая микроскопия тонких срезов
•Замораживание-скалывание
•Негативное контрастирование
•Криоэлектронная микроскопия
Этот документ был отредактирован с Icecream PDF Editor.
Морфология реконструированных мембранных везикул, по данным электронной микроскопии:
а – негативное контрастирование, б и в – замораживаниескалывание (из: Scheuring et al.// J. Membrane Biol. 1986. Vol.90. P.129136)
Активируйте PRO версию, чтобы убрать водяной знак.
МИТХТ
Просвечивающая электронная микроскопия тонких срезов
•1950-е г.г. - Выявлена характерная трехслойная структура мембран, состоящая из 2-х электроноплотных полос, разделенных промежутком ≈ 80 Аº
•Используется обработка препаратов мембран OsO4
Этот документ был отредактирован с Icecream PDF Editor. Активируйте PRO версию, чтобы убрать водяной знак.
МИТХТ |
Метод замораживания-скалывания |
||
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
•Усилия при скалывании замороженной клетки приводят к образованию среза, проходящего через образец.
•Оказалось, что мембрана раскалывается преимущественно по своей срединной области и расщепляется на 2 половинки.
•На образовавшихся плоскостях скола мембраны обнажается
еевнутренняя область.
Этот документ был отредактирован с Icecream PDF Editor. Активируйте PRO версию, чтобы убрать водяной знак.
МИТХТ Метод «замораживания-скалывания» и
замораживания-травления»
1.Замораживание образца в
жидком азоте (T=-196ºC, V=20ºC/мс)
2.Скалывание ножом микротомом в вакууме
3.Разделение скола
4.«Травление» (возгонка льда)
5.Получение платино-углеродной реплики
6.Размораживание образца
7.Удаление реплики
8.Анализ реплики под микроскопом
Этот документ был отредактирован с Icecream PDF Editor. Активируйте PRO версию, чтобы убрать водяной знак.
