Глава 2. Получение потомства от межродового гибрида белуги со стерлядью
Бестер (Рис. 1) — межродовой гибрид двух видов рыб семейства осетровых, полученный путём искусственного скрещивания белуги со стерлядью. Впервые получен в 1952 году в СССР профессорами Николюкиным Н. И. и Тимофеевой Н. А. в Тепловском рыбопитомнике Саратовской области. Бестер сочетает быстрый рост белуги и раннее созревание стерляди. Длина до 1,8 м, масса до 30 кг. Плодовит. В аквакультуре гибриды первого поколения за 2 года выращивания в садках и бассейнах достигают массы в 1 кг и даже больше [2]. Проявляет высокую пластичность по отношению к солености воды (от 0 до 18 ‰), при высоком насыщении воды кислородом выдерживает температуру до 34° C. Температурный оптимум выращивания 20–25° С.
Рисунок 1. Бестер
У бестера F3 2n=118,2 при Cv=3,3%. Параметры кариотипа бестера промежуточные между кариотипами белуги и стерляди. У гибридов первого и особенно второго поколения наблюдается повышение вариабельности параметров кариотипа, а у гибридов третьего поколения происходит снижение изменчивости по всем признакам практически до уровня, характерного для исходных видов.
Таким образом, за три гибридных поколения происходит сначала разбалансирование генома, а затем его стабилизация. Такая динамика выражена в признаках общего числа хромосом (2п), количества акроцентрических хромосом (AM) и количества хромосомных плеч (NF) и отсутствует при анализе числа двуплечих хромосом. Очевидно, что геномные нарушения в первую очередь затрагивают микрохромосомы, увеличивая вариабельность их количества. Анеуплоидия по макрохромосомам – более редкое явление ввиду того, что такие анеуплоидные клетки, вероятно, эффективно элиминируются из клеточных популяций.
Следует особо отметить, что не было выявлено различий по уровню хромосомной изменчивости между особями в возрасте 3–6 недель и 3–6 месяцев, т. е. элиминация индивидов с резко несбалансированным геномом происходит на самых ранних этапах онтогенеза – в эмбриональный период. Ранняя элиминация генетически дефектных эмбрионов минимизирует экономические потери от их повышенного отхода, наблюдаемого в основном при инкубации икры.
Получение молоди бестера первого поколения
Молодь осетровых, в том числе молодь бестера, выращивают на специальных осетровых заводах. Производителей заготавливают, как правило, осенью предшествующего года. Недостающее количество осетровых получают весной — со второй половины марта до середины апреля.
Для целей промышленного рыбоводства самок белуги скрещивают с самцом стерляди. Отбирают небольших самок белуги с гладким выпуклым брюшком и самцов стерляди длиной свыше 35 см, массой 250—500 г, отличающихся брачным нарядом (выпуклости матово-белого цвета на голове) из расчета 40—50 на одну самку белуги. В последние годы для получения возвратных гибридов ББС используют самцов бестера. Гибриды ББС растут лучше, чем гибриды БС (ББС — гибрид «тройной» белугах (белугахстерлядь).
Для перевода самок белуги в нерестовое состояние при температуре воды 12—14 С им вводят от 2 до 4 мг сухого вещества гипофиза на 1 кг массы, самцам стерляди длиной до 40 см — по 3, более крупным самцам — по 5 мг сухого вещества гипофиза, но на 10—15 ч позже, чем самкам белуги.
После инъекции процесс созревания самок белуги систематически контролируют. При этом ощупывают брюшко, и если оно стало мягким, то в полость тела вводят резиновый щуп длиной 30—40 см. Самцы созревают через 24—35, самки — через 48—60 ч. Если будут обнаружены икринки, то значит овуляция произошла.
Рыбу оглушают, обескровливают, перерезая хвостовую артерию или надрезая жабры, обмывают и вытирают полотенцем от анального отверстия. Делают небольшой надрез, постепенно расширяя его с тем, чтобы выпустить овулировавшую икру в эмалированный таз. Неовулировавшую икру, застрявшую в складках яичника, комковатую и незрелую для рыбоводных целей не используют.
Сперму выцеживают из живых самцов стерляди, причем каждый самец может быть использован до 3 раз при объеме разовой порции эякулята от 5 до 30 мл. Самцы бестера дают значительно большие порции молок, они более жизнестойки по сравнению с самцами стерляди.
Оплодотворение икры производят следующим образом. К 1 кг икры приливают по 10 мл разбавленной водой в соотношении 1: 200 смеси спермы от нескольких самцов. Расчетное количество спермы добавляют в сосуд с водой и сразу выливают образовавшуюся смесь в икру. В течение 3—5 мин икру со спермой перемешивают круговыми движениями, затем сливают излишнюю жидкость. Через несколько минут после оплодотворения икра становится клейкой. Ее обесклеивают, отмывая водой с разбавленной тонкой взвесью ила (0,5 л на 10 л воды). Этот процесс на рыбоводных заводах осуществляется с применением специальных аппаратов и устройств.
Обесклеенную и оплодотворенную икру закладывают в аппараты. На рыбоводных заводах используют преимущественно аппараты системы П. С. Ющенко. Реже применяют аппараты для инкубации необесклеенной икры, например, Садова-Коханской. В один аппарат Ющенко загружают 100 тыс. икринок- эмбрионов, в аппарат Садова-Коханской — до 1 млн. шт. На временных речных пунктах можно пользоваться аппаратом Чаликова, куда загружают 15—20 тыс. икринок-эмбрионов в каждый.
В зависимости от температуры воды срок инкубации меняется. При средней температуре воды за инкубационный период 12С он составляет восемь-девять суток.
Выклюнувшихся личинок пересаживают в бетонные бассейны или установленные в прудах садки из газа, где их выдерживают до перехода на активное питание и подращивают до массы 0,4—0,7 г.
С переходом на активное питание личинок переводят в специально подготовленные рыбоводные мальковые пруды или бассейны для дальнейшего подращивания. Выращивание мальков в прудах первой категории осуществляют, как правило, по нормативам осетроводных заводов до 2—3 г за 30 дней, но в некоторых случаях при хорошем развитии естественной кормовой базы масса мальков за этот период может достичь 10 15 г. [1].
Получение потомства бестера
Получение потомства у осетровых всегда начинается с выдерживания производителей. В преднерестовый период самцов и самок необходимо содержать в разных прудах. В зависимости от погодных условий в преднерестовый период продолжительность содержания производителей может быть разной, чаще 20-30 дней. В этот период основная задача рыбовода состоит в том, чтобы обеспечить восстановление физиологических функций рыб после зимнего периода, обеспечить оптимальный переход организма от неактивного обмена веществ в зимний период до активного функционирования, ориентированного на подготовку к нересту.
Для преднерестового содержания производителей целесообразно иметь специальные преднерестовые пруды. Но часто в хозяйствах для этих целей используют всевозможные садки. Достаточно эффективно в этом плане использование освободившихся зимовальных прудов. При этом глубина воды должна быть около 1 м, на каждые 2-3 экземпляра должно приходиться не менее 100 мг площади водного зеркала [8]
Важнейшим элементом биотехники разведения осетровых является подготовка производителей к нересту. В настоящее время разработана технология применения реабилитационных витаминных инъекций для производителей осетровых рыб [6]. Согласно предложенной технологии перед нерестом необходимо поступление витаминов С и Е непосредственно в организм производителей осетровых рыб. Рекомендуется использование одной из трех схем инъецирования:
- инъецирование (3-х или 4-х разовое) в течение месяца до получения половых продуктов;
- введение витаминов перед зимовкой;
- инъецирование самок перед зимовкой с повторным введением витаминов в течение месяца перед нерестом.
Данную технологию можно применить только к производителям осенней заготовки. Путем проведения серий экспериментов доказано, что производители, проинъецированные витаминами, имеют лучшие рыбоводно-физиологические показатели, чем рыбы, не подвергшиеся инъецированию.
Из гонадотропных препаратов, применение которых возможно для стимуляции созревания осетровых рыб, наиболее часто используют ацетонированный гипофиз осетровых и карповых рыб, глицериновую вытяжку гипофизов осетровых рыб и сурфагон [9]. Сурфагон представляет собой синтетический аналог лютеинизирующего гормонального гормона (ЛГ-РГ), который вызывает выведение гонадотропина из собственного гипофиза рыбы-реципиента. Первые опыты по использованию для стимуляции созревания осетровых различных форм сурфагона были проведены в начале 1980-х годов [7]. Интерес к сурфагону возрос в 2000-е гг., когда произошло резкое снижение численности волжского стада осетровых и, как результат, снизилась возможность изготовления полноценного гипофизарного препарата в необходимых для осетроводства объемах.
При работе с производителями осетровых рыб весьма важное значение имеет правильное проведение гормональной стимуляции. В настоящее время гипофиз осетровых имеет высокую стоимость, масштабы его производства крайне малы и не удовлетворяют потребности товарных рыбоводных хозяйств и заводов по воспроизводству. В сложившихся условиях актуальным направлением исследований является поиск альтернативных методик и препаратов для стимулирования процесса созревания производителей.
Всего есть 3 варианта стимулирования созревания бестера:
1 вариант - дробное инъецирование гипофизом сазана по схеме: доза гипофиза - 8 мг/кг рыбы, предварительная инъекция - 10%, разрешающая - 90%, время между предварительной и разрешающей инъекциями - 10 часов;
2 вариант - дробное инъецирование гипофизом сазана и сурфагоном по схеме: доза гипофиза - 8 мг/кг рыбы, доза сурфагона 5 мкг/кг рыбы, предварительная инъекция гипофизом -10%, разрешающая сурфагоном - 90%, время между предварительной и разрешающей инъекциями - 10 часов;
3 вариант - однократное инъецирование сурфагоном доза - 5 мкг/кг рыбы [10];
Затем необходимо провести обесклевание икры, например, при помощи коровьего молока с водой (1 часть молока 5 частей воды) в течение 40 минут вручную с помощью гусиных перьев.
Обесклеенную икру помещают в аппарат Вейса из расчёта 700 г на 8 л ёмкость и инкубируют до выклёвывания предличинок.