6 курс / Эндокринология / Клеточно_метаболические_механизмы_дизрегуляционных_нарушений_в_системе
.pdfферментативной реакции ГФДГ. Следовательно, повышение интегральной характеристики фермента определяется увеличением активности ГФДГ в лимфоцитах женщин с ДТЗ при более скученном его расположении.
Интенсификация пентозофосфатного пути окисления не может не отра-
зиться на взаимосвязанном с ним гликолизе, так как эти два процесса конкури-
руют за общий субстрат – глюкозо-6-фосфат. Однако нами не выявлено значи-
тельного изменения интенсивности протекания реакций гликолиза и последу-
ющего аэробного окисления в митохондриях лимфоцитах женщин с ДТЗ. Сни-
жение активности вспомогательного фермента ЦТК – НАДФИЦДГ, вероятно,
является компенсаторным, не оказывая значимого влияния на интенсивность этого процесса в целом.
Основной связующий анаэробное и аэробное окисление механизм – это малат-аспартатный шунт. Он осуществляет транспорт восстановленного в гли-
колизе НАДН в митохондрии для окисления в цепи дыхательных ферментов и обратно окисленный НАД+ в цитоплазму для непрерывного протекания реакций гликолиза, таким образом, поддерживая соотношение НАД+/НАДН. Регуляция многих метаболических процессов осуществляется главным образом через из-
менение окислительно-восстановительного состояния НАД+/НАДН [Spriet L.L., 2000; Hwang K., 1999]. Увеличение активности ключевого фермента малат-
аспартатного шунта – НАДНМДГ указывает на его активацию. Повышение ак-
тивности ГФДГ отражает интенсификацию вспомогательного пути транспор-
тировки НАД+/НАДН (глицерофосфатный шунт включает Г3ФДГ со стороны цитоплазмы и митохондриальную αГФДГ). Активация шунтирующих механиз-
мов характеризует повышение интенсивности энергетических процессов в лим-
фоцитах пациентов с ДТЗ, по-видимому, за счет Комплекса I дыхательной цепи
(НАДН-КоQ-редуктаза).
Кроме того, нами обнаружено повышение уровней активности регуля-
торного фермента – глутаматдегидрогеназы, использующей в качестве кофер-
40
мента НАД+, НАДН, НАДФ+ и НАДФН, что отражает активацию аминокислот-
ного и, следовательно, белкового обменов.
Таким образом, в лимфоцитах женщин с ДТЗ наблюдается перераспреде-
ление субстратных потоков и преобразование метаболизма, которое определя-
ется усилением макромолекулярного синтеза, интенсификацией аминокислот-
ного обмена при увеличении уровня аэробного окисления, показателем которо-
го является усиление перекисных процессов.
Как уже отмечалось, тиреоидные гормоны оказывают регулирующее дей-
ствие на метаболизм клеток всех органов и систем, в том числе и на лимфоци-
ты. Это множественное и неоднозначное действие, зависит от концентрации данных гормонов. Однако не вызывают сомнения такие эффекты их воздей-
ствия на метаболизм клеток, как активация окислительных процессов, разоб-
щение окислительного фосфорилирования и интенсификация синтеза белка
[Yamauchi M., 2008]. Механизм действия тиреоидных гормонов основан на их способности повышать или снижать экспрессию многих генов. К ним относятся гены, определяющие множество различных биохимических процессов и кле-
точных функций, включая глюконеогенез, липогенез, проведение внутрикле-
точных сигналов от рецептора инсулина и от цАМФ, пролиферацию и апоптоз.
Для определения «точек воздействия» тиреоидных гормонов на метабо-
лизм лимфоцитов нами проведен корреляционный анализ.
В группе здоровых женщин обнаружены положительные корреляции между концентрацией Т3 и активностью Г6ФДГ, Г3ФДГ, ЛДГ, НАДГДГ
(рис.3.1.3,а). Кроме того, обнаружены прямые взаимосвязи содержания сТ4 с
активностью МДГ и НАДФМДГ (рис.3.1.3,б). Трансляция некоторых генов ферментов (например, малик-фермент) может регулироваться непосредственно Т3, а других – белками, синтез которых зависит от тиреоидных гормонов. Это позволяет тиреоидным гормонам всесторонне регулировать обмен веществ в клетках.
41
а
Г3ФДГ
0,62
0,59 Т3
Г6ФДГ
|
б |
|
0,44 |
сТ4 |
|
НАДГДГ |
||
|
в
ЛДГ
-0,37
ТТГ
-0,48
Г3ФДГ
ЛДГ
0,39
0,36
ГР
0,44
НАДНЛД
-0,37
НАДГДГ
Рис.3.1.3. Корреляционные взаимосвязи концентрации Т3 (а), сТ4 (б) и ТТГ (в) с
показателями метаболизма лимфоцитов у женщин контрольной группы.
Однако в условиях аутоиммунной агрессии, при ДТЗ сопровождающейся гипертиреозом, не только метаболизм лимфоцитов претерпевает значительные перестройки, но и нарушаются иммуноэндокринные взаимоотношения. След-
ствием этого, по-видимому, является потеря корреляционных связей между концентрацией тиреоидных гормонов и ферментативными показателями лим-
42
фоцитов. Лимфоциту, как и любой системе, присуще свойство автономности,
которое вероятно служит для достижения гомеостаза в клетке в условиях ги-
пертиреоза.
Нами также проведен корреляционных анализ для выявления взаимосвя-
зей ТТГ, АТ-ТПО с исследуемыми параметрами метаболизма лимфоцитов па-
циентов с ДТЗ. Выявлены регуляторные гормонально-метаболические корреля-
ционные связи: отрицательные – концентрации ТТГ с активностью Г3ФДГ,
ЛДГ, НАДГДГ (рис.3.1.3,в). Поскольку продукция тиреоидных гормонов нахо-
дится в отрицательной обратной связи с уровнем секреции ТТГ гипофизом, не-
удивительно наличие отрицательных взаимосвязей между содержанием ТТГ и метаболическими показателями при положительных с содержанием тиреоид-
ных гормонов. Итак, по-видимому, общие метаболические показатели, а имен-
но, активность Г3ФДГ, ЛДГ и НАДГДГ, имеют наибольшее значение в тирео-
идной регуляции метаболизма. Действительно, уровни активности Г3ФДГ и ЛДГ отражают интенсивность второй стадии гликолиза, т.е. определяют актив ность анаэробной энергопродукции клетки. НАДГДГ, непосредственно связан с аминокислотным и соответственно белковым обменом. При ДТЗ также не об-
наружено взаимосвязей между концентрацией ТТГ и уровнями активности ис-
следуемых оксидоредуктаз. В связи с низкой чувствительностью методов кор-
реляционного анализа, нами применен альтернативный метод установления взаимосвязанности показателей – нейросетевое моделирование. Зависимость ферментативной активности лимфоцитов крови больных ДТЗ от гормонального статуса оценивали с помощью нейросетевого предиктора. Объектами предик-
ции выбрали интегральный показатель активности СДГ – фермента ЦТК, явля-
ющегося компонентом Комплекса II дыхательной цепи, и уровень активности Г6ФДГ – фермента пентозофосфатного пути окисления глюкозы, играющей важную роль в антиоксидантной защите клетки.
Установлено, что наиболее информативными показателями в определе-
нии активности СДГ в нейропредикторе здоровых женщин являются содержа-
43
ние сT4, кортизола и Т3 (рис.3.1.4,а), а в нейропредикторной модели больных ДТЗ – концентрации ТТГ, кортизола и Т3 (рис.3.1.4,б).
|
|
|
|
|
|
|
а |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
кортизол |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,43 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
FT4 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,50 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Т4 |
|
|
|
|
|
0,26 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,33 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Т3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ТТГ |
|
|
|
|
|
0,26 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,0 |
0,1 |
0,2 |
0,3 |
|
|
0,4 |
0,5 |
0,6 |
|||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
Информативность, о.е. |
|
|
|
|
|
|
|||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
б |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
кортизол |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,39 |
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
FT4 |
|
|
|
|
|
|
|
|
0,29 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Т4 |
|
|
|
|
|
|
0,27 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,32 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Т3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ТТГ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,56 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,00 |
0,10 |
0,20 |
0,30 |
|
|
0,40 |
0,50 |
0,60 |
Информативность, о.е.
Рис. 3.1.4. Информативность уровней гормонов в сыворотке крови (о.е.) в мо-
дели нейропредиктора СДГ здоровых женщин (а) и больных ДТЗ (б).
44
|
|
|
|
|
|
|
|
|
а |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
кортизол |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,43 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
FT4 |
|
|
|
|
|
|
|
0,26 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Т4 |
|
|
|
|
|
|
0,24 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,32 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Т3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ТТГ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,59 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0 |
0,1 |
0,2 |
0,3 |
0,4 |
|
0,5 |
0,6 |
0,7 |
||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
Информативность, о.е. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
б |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
кортизол |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
FT4 |
|
|
|
0,24 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Т4 |
|
|
|
|
0,26 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,39 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Т3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ТТГ |
|
|
|
|
|
0,30 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,00 |
0,20 |
0,40 |
0,60 |
0,80 |
1,00 |
1,20 |
|||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
Информативность, о.е. |
|
|
|
|
Рис.3.1.5. Информативность уровней гормонов в сыворотке крови (о.е.) в моде-
ли нейропредиктора Г6ФДГ здоровых женщин (а) и больных ДТЗ (б).
Следовательно, независимо от тиреоидного фона, активность СДГ опре-
деляется уровнем кортизола и Т3, считающегося «истинным» тиреоидным гор-
моном. Однако при гипертиреозе у больных ДТЗ значение прогормона Т4 сни-
45
жается, при этом возрастает значение сниженной концентрации ТТГ в опреде-
лении активности ФАД-зависимой оксидоредуктазы.
а
Информативность, о.е.
0,30 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,26 |
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,20 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
0,20 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,17 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
0,14 |
|
|
0,15 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
0,12 |
|
|
|
|
0,12 |
|
|
|
0,12 0,12 |
|
|
|
|
|
||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||
0,11 |
0,11 |
0,11 |
|
|
|
0,11 |
0,09 |
|||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||
0,10 |
|
|
|
0,08 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,08 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,00
|
|
|
|
|
НАДФГДГ |
НАДИЦДГ |
|
|
Обр |
|
.НАДФГДГ |
||
|
ГФДГ 6 |
3 |
|
НАДФМДГ |
НАДГДГ |
НАДФИЦДГ |
|
НАДГДГ |
|||||
|
|
|
|
Обр Обр |
|
||||||||
СДГ |
Г |
ФДГ ФДГ |
ЛДГ |
|
|
|
|
|
.ЛДГ .МДГ |
ГР |
|
||
|
|
Г |
|
|
|
|
|
|
|
. |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обр |
б
Информативность, о.е.
0,35 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,31 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
0,30 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,26 |
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
0,25 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,19 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,19 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
0,20 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,16 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,13 |
|
|
|
|||||||
0,15 |
|
0,10 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,10 |
0,11 0,12 |
|
|
0,09 |
0,11 0,11 |
|
|
|
0,10 |
|||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,08 |
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||||||||
0,10 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||
|
|
|
0,07 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
НАДФГДГ |
НАДИЦДГ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обр |
|
|
.НАДФГДГ |
||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||||||||
|
|
|
ГФДГ 6 |
3 |
|
|
|
|
|
НАДФМДГ |
НАДГДГ |
НАДФИЦДГ |
|
|
|
|
|
|
НАДГДГ |
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обр Обр |
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||||||||||||
СДГ |
|
|
Г |
ФДГ ФДГ |
ЛДГ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
.ЛДГ .МДГ |
|
ГР |
|
|
|
||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
Г |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обр |
|
|
|
Рис.3.1.6. Информативность уровней оксидоредуктаз в лимфоцитах крови (о.е.)
в модели нейропредиктора АТ-ТПО здоровых женщин (а) и больных ДТЗ (б).
46
При предикции уровня активности Г6ФДГ в лимфоцитах здоровых жен-
щин наиболее информативными определены концентрации ТТГ, кортизола и Т3
(рис.3.1.5,а), в нейропредикторной модели больных ДТЗ – содержание кортизо-
ла, Т3 и ТТГ (рис.3.1.5,б). Следовательно, активность Г6ФДГ не определяется изменением гормонального фона при ДТЗ. Однако уровень активности Г6ФДГ повышен в лимфоцитах больных женщин, что, по-видимому, является вторич-
ным ответом на метаболические изменения. Возможно, увеличение активности Г6ФДГ отражает повышенный уровень ПОЛ вследствие интенсификации окис-
лительных аэробных процессов.
Кроме того, с помощью нейросетевого моделирования была оценена за-
висимость синтеза АТ-ТПО от метаболического статуса лимфоцитов крови.
В определении уровня антител нейропредиктор здоровых женщин выявил как наиболее информативные уровни ГР, НАДФМДГ и НАДФИЦДГ
(рис.3.1.6,а). Причем три наиболее значимые ферменты являются НАДФ-
зависимыми. Наиболее информативные при определении содержания антител у женщин с ДТЗ – уровни МДГ и ГР (рис.3.1.6,б). При предикции количества аутоантител в сыворотке крови больных ДТЗ изменяются все наиболее инфор-
мативные показатели, кроме активности ГР, а интенсивность аутоиммунного процесса отражается в лимфоцитах на активности пластических реакций
(Г6ФДГ) и протекании цикла Кребса (МДГ и НАДИЦДГ).
Таким образом, у больных ДТЗ до начала лечения иммунный статус ха-
рактеризуется повышением содержания цитотоксических Т-лимфоцитов и В-
клеток. Причем, В-лимфоциты выходят в периферическую кровь со сниженной функциональной активностью. Со стороны метаболизма лимфоцитов отмечено,
что при гипертиреозе происходит интенсификация пластического и аминокис-
лотного обмена, что не удивительно, так как известно стимулирующее воздей-
ствие тиреоидных гормонов на рост и развитие. При этом обнаружено значи-
тельное нарушение эндокринной регуляции метаболизма иммуноцитов.
47
3.2. Состояние иммунного статуса и активность метаболических фермен-
тов в лимфоцитах крови у больных в процессе лечения
Проспективное исследование показателей иммунного статуса и метабо-
лизма лимфоцитов у пациентов с ДТЗ проведено в течение 3 мес. После уста-
новления диагноза больным назначалась тиреоидсупрессивная терапия (тирео-
статическими препаратами). По прошествии 1 и 3 мес. проводились повторные обследования.
Как отмечалось выше, к концу 1-го мес. у вошедших в наше исследование больных ДТЗ была достигнута компенсация тиреоидной функции, однако, кон-
центрация аутоантител осталась значительно повышенной на протяжении всего трехмесячного периода. В условиях достижения эутиреоза при протекании аутоиммунного процесса у женщин с ДТЗ нами изучено состояние иммунной системы.
Через мес. после начала лечения обнаружено повышение относительного и абсолютного количества CD4+-лимфоцитов по сравнению с контрольными величинами, при этом увеличенный процентный уровень общих лимфоцитов сохраняется (табл.3.2.1.). В этот период лечения абсолютный уровень CD8+-
клеток соответствует контрольному диапазону. Через 3 мес. после начала лече-
ния установлено повышение абсолютного содержания CD3+- и CD8+-
лимфоцитов.
При исследовании фенотипического состава лимфоцитов крови больных ДТЗ через 1 мес. после начала лечения обнаружено снижение процентного ко-
личества HLA-DR+-клеток относительно значений, выявленных у больных до начала лечения (табл.3.2.1). Через 3 мес. после начала лечения вновь установ-
лено повышение абсолютного содержания CD19+-лимфоцитов, а также относи-
тельного и абсолютного количества HLA-DR+-клеток.
48
Таблица 3.2.1
Показатели фенотипического состава лимфоцитов крови у больных ДТЗ в динамике лечения (Ме, С25 – С75)
Показатель |
|
Больные ДТЗ (N=35) |
Р |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
Через 1 мес. |
Через 3 мес. |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
Ме |
С25 |
– С75 |
Ме |
С25 – С75 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Лейкоциты, 109/л |
5,50 |
4,70 |
– 7,30 |
5,80 |
5,00 – 6,80 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Лимфоциты, % |
40,0 |
34,0 |
– 49,0 |
38,0 |
35,0 – 47,0 |
Pк-1<0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
Лимфоциты, 109/л |
2,25 |
1,89 |
– 2,95 |
2,54 |
1,95 – 2,97 |
|
|
|
|
|
|
|
|
CD3+, % |
68,0 |
65,0 |
– 72,0 |
67,0 |
65,0 – 69,0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
CD3+, 109/л |
1,67 |
1,31 |
– 2,10 |
1,78 |
1,31 – 2,02 |
Pк-3<0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
CD4+, % |
40,0 |
36,0 |
– 43,0 |
38,0 |
31,0 – 44,0 |
Pк-1<0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
CD4+, 109/л |
0,93 |
0,76 |
– 1,24 |
0,94 |
0,74 – 1,13 |
Pк-1<0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
CD8+, % |
30,0 |
26,0 |
– 32,0 |
30,0 |
25,0 – 33,0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
CD8+, 109/л |
0,67 |
0,53 |
– 0,82 |
0,70 |
0,57 – 0,88 |
Pк-3<0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
CD16+, % |
16,0 |
13,0 |
– 23,0 |
16,0 |
14,0 – 20,0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
CD16+, 109/л |
0,38 |
0,26 |
– 0,51 |
0,38 |
0,29 – 0,62 |
|
|
|
|
|
|
|
|
CD19+, % |
14,0 |
9,5 – 15,5 |
13,5 |
11,0 – 15,0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
CD19+, 109/л |
0,34 |
0,19 |
– 0,43 |
0,35 |
0,24 – 0,45 |
Pк-3<0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
HLA-DR+, % |
19,0 |
14,0 |
– 24,0 |
20,5 |
17,0 – 23,0 |
P0-1<0,05 |
|
|
|
|
|
|
Pк-3<0,05 |
|
|
|
|
|
|
|
HLA-DR+, 109/л |
0,42 |
0,31 |
– 0,63 |
0,50 |
0,45 – 0,67 |
Pк-3<0,01 |
|
|
|
|
|
|
|
Лейкоциты/CD3+ |
3,51 |
3,02 |
– 4,63 |
3,81 |
3,06 – 4,40 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Лейкоциты/CD19+ |
19,55 |
14,60 – |
19,50 |
14,32 – |
|
|
|
|
25,98 |
|
25,33 |
|
|
HLA-DR+/CD19+ |
1,50 |
1,25 |
– 2,00 |
1,48 |
1,23 – 2,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
CD4+/CD8+ |
1,32 |
1,13 |
– 1,62 |
1,36 |
0,96 – 1,64 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Примечание здесь и в табл.3.2.2: Статистически достоверные различия показателей контрольной группы с группой больных через 1 мес. (Рк-1), через 3 мес. (Рк-3) лечения. статистически достоверные различия показателей групп больных: Р0-1 – до и через 1 мес. лечения; Р0-3 –до и через 3 мес. лечения; Р1-3 –через 1 и 3 мес. лечения.
49