Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Большой практикум / Культивирование / Культивирование микроорганизмов в ферментере BioFlo 115 (7,5л).pdf
Скачиваний:
94
Добавлен:
09.05.2021
Размер:
2.07 Mб
Скачать

1.3.1.4. Паровая стерилизация в автоклаве MLS 3781L

Для использования автоклава MLS 3781L необходимо:

-изучить и письменно ознакомиться с требованиями безопасности при эксплуатации сосудов под давлением;

-включить автоклав в сеть тумблером (с правой стороны корпуса);

-проверить уровень воды на дне автоклава (вода должна скрывать нагревающий элемент), при необходимости долить дистиллированной воды;

-проверить уровень воды в расширительном бачке, он должен быть между метками;

-поставить посуду или растворы в автоклав, не закрывая отверстия у стенок автоклава;

-посуду и растворы расставить в корзины;

-плотно закрыть крышку автоклава;

-установить параметры стерилизации (температура, время, давление) через кнопку «SET» или выбрать стрелками на панели готовые программы (1- 1 атм., 122 °С, 30 мин; 2 - 0,5 атм., 115 °С, 25 мин);

-после выбора всех параметров удерживать кнопку «START» до щелчка (блокировка крышки), если прозвучит сигнал, значит, крышка не полностью закрыта.

-после завершения стерилизации (крышка автоклава разблокируется при достижении 65 °С), освободить автоклав, отключить от сети.

ПРИМЕЧАНИЕ: Крышки банок для подпиток должны быть приоткрыты. Объём раствора при стерилизации должен занимать не более половина объёма ёмкости.

1.3.2. Получение посевного материала

Музейную культуру Cupriavidus eutrophus В10646, хранящуюся на скошенной агаризованной среде в холодильнике «Бирюса» (плюс 5 0С), смывают с поверхности среды (2 пробирки) в колбу КН-1-2000 с полной средой Шлегеля. Оптическая плотность исходного инокулята (без разведения), не менее 0,1 (440 нм). Все работы ведутся с соблюдением асептики.

11

Колбу закрывают стерильной ватно-марлевой пробкой и размещают в шейкере инкубаторе Innova 44. Инкубирование проводится в течение 20±2 ч при температуре плюс 30±0,5 0С до получения оптической плотности не менее 0,2.

12