4.3. Подсчет эритроцитов в камере Горяева

Камера Горяева (рис. 4.) - толстое стекло, разделенное желобками на опорные пластинки. Причем, средние опорные пластинки ниже боковых на 0,1 мм (глубина камеры) и разделены поперечной канавкой на две равные части. На каждой из них нанесена сетка для подсчета кровяных телец.

На сетке имеется 25 больших квадратов, каждый из которых состоит из 16 маленьких. Сторона одного малого квадрата равна 1/20 мм, площадь - 1/400, объем жидкости над каждым малым квадратом равен 1/4000 мм³.

Смеситель (меланжер) для подсчета эритроцитов имеет деление 0,5; 1,0; 101 (в расширенной части смесителя имеется красная бусинка).

К камере Горяева притирают покровное стекло до появления радужных колец и под микроскопом знакомятся с сеткой.

В смеситель набирают кровь до метки 0,5. Обтерев кончик смесителя ваткой от приставшей к нему крови, опустить его в 2-3% раствор поваренной соли и набрать его до метки 101 (если кровь была взята до метки 0,5 - разбавление ее будет в 200 раз, а если до метки 1,0 - в 100 раз).

В течение 2-3 минут жидкость тщательно перемешивают, встряхивая меланжер, концы которого при этом зажимают 1 или 3 пальцами правой руки. Откладывают меланжер на 5-10 минут. Затем содержимое меланжера повторно перемешивают и выпускают 2-3 капли раствора на ватку (они почти не содержат эритроцитов). Следующую каплю выпускают на среднюю опорную пластинку под притертое покровное стекло, не допуская попадания пузырей воздуха.

Подсчет эритроцитов производится при большом увеличении (7х40) в 5 больших квадратах (каждый из них состоит из 16 маленьких). Рекомендуется подсчитывать эритроциты, расположенные внутри каждого маленького квадрата, а также на верхней и левой его сторонах.

Подсчитав количество эритроцитов в 5 больших (или 80 маленьких квадратах), рассчитывают содержание эритроцитов в 1 литре крови по следующей формуле:

Х=	А х 4000 х 200	х 106= А х 10000 х 106 где:
	80

Х - содержание эритроцитов в 1 л крови; А - количество эритроцитов, подсчитанных в 5 больших (80 маленьких) квадратах; 1/4000 мм³ - объем жидкости над одним маленьким квадратиком; 200 - разбавление крови; 80 - количество маленьких квадратов, 10⁶ - коэффициент для перерасчета на 1 л крови.

Примечание: Возможно разведение крови и в пробирках. Для этого в сухую пробирку наливают 4 мл 2-3% раствора хлористого натрия, а 0,02 мл крови набирают капилляром от гемометра Сали. Тщательно обтирают носик капилляра сухой ваткой и вносят кровь на дно пробирки под раствор хлористого натрия. Затем капилляр промывают 3 раза верхним слоем раствора хлористого натрия и образовавшуюся смесь перемешивают.

Эритроцитоз - повышенное содержание эритроцитов в крови отмечают при большой физической нагрузке, сильной диарее, непроходимости тонкого отдела кишечника.

Пониженное количество эритроцитов (эритропения) встречается при анемиях.

4.4. Определение концентрации гемоглобина по методу Сали

Для определения концентрации гемоглобина в крови широко используется гемометр, предложенный в 1902 году швейцарским учёным Сали. Данный гемометр (рис. 5) состоит из стеклянной пробирки. С обеих сторон от неё укреплены запаянные пробирки со стандартным раствором солянокислого гематина. За ними вмонтировано матовое стекло. К гемометру прилагаются: пипетка с единственной меткой (соответствует 0,02 мл) для забора крови, стеклянная палочка для размешивания и пипетка для добавления воды.

Ход работы: В пробирку гемометра Сали наливают 0,1% раствор соляной кислоты до первой (круговой) метки. Затем набирают кровь в пипетку до метки 0,02 мл и вытирают кончик капилляра чистой сухой ваткой. Опускают капилляр в мерную пробирку до дна (под раствор соляной кислоты). Аккуратно выдувают кровь в мерную пробирку (кровь должна остаться под соляной кислотой) и, приподняв кончик капилляра, промывают его находящимся над кровью раствором кислоты.

Взбалтывают кровь с находящейся там кислотой (появление коричневого окрашивания свидетельствует о гемолизе эритроцитов и образовании солянокислого гематина) и ставят пробирку в гемометр на 5-10 минут, затем по каплям добавляют в пробирку дистиллированную воду (образующуюся смесь регулярно перемешивают стеклянной палочкой). Результат читается по показанию шкалы (в процентах или грамм-процентах) на стенке пробирки, соответствующему нижнему мениску смеси при равенстве ее окраски с цветом стандартных ампул.

Снижение уровня гемоглобина (олигохромемию) регистрируют при неполноценном кормлении, в частности, при недостатке железа, кобальта, меди, витаминов группы В, полигиповитаминозах, а также хронических интоксикациях.

Повышение уровня гемоглобина в крови отмечают значительно реже, например, при интоксикации железом, миелопролиферативных реакциях.