6. Модуль: «Кроветворная система»

25Методика подсчета эритроцитов и лейкоцитов. ( счетная камера Горяева) – принцип метода

Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, счетная камера Горяева, смеситель (меланжер) для подсчета лейкоцитов, 5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим, микроскоп. Объект исследования–человек.

Проведение работы: Счетную камеру помещают под микроскопом и рассматривают сетку Горяева вначале при малом, а затем при большом увеличении. Накрывают камеру покровным стеклом, притирая его края к стеклу камеры до появления радужных колец Ньютона. Оставив камеру под микроскопом, прокалывают палец ранее описанным методом. Первую выступившую каплю крови из пальца стирают ватным тампоном. Во вторую каплю погружают кончик смесителя для лейкоцито, держат его вертикально и набирают кровь до отметки 1, следя, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. Обтирают конец капилляра фильтровальной бумагой и быстро, пока кровь не свернулась, переносят его в чашку с 5% раствором уксусной кислоты, продолжая держать смеситель вертикально. Набирают раствор до метки 11 (т.е. разводят кровь в 10 раз), после чего смеситель переводят в горизонтальное положение и кладут на стол.

Для подсчета лейкоцитов берут заполненный меланжер, зажимая нижний конец пальцем, снимают резиновую грушу и, зажав оба конца смесителя третьим и первым пальцами, в течение 1 мин перемешивают кровь. При этом эритроциты разрушаются и в поле зрения остаются только лейкоциты, точнее их ядра. Т.к. уксусная кислота подкрашена метиденовым синим, ядра лейкоцитов становятся видны отчетливее. Выпускают из смесителя на вату три капли, а четвертую наносят на среднюю площадку камеры у края покровного стекла. Капиллярными силами капля сама втягивается в покровное стекло и заполняет камеру. Излишек раствора крови стекает в желобок. Если на сетку попал воздух или на боковых площадках оказался излишек раствора, камеру следует промыть дистиллированной водой, высушить и заполнить снова. Заполненную камеру ставят под микроскоп и, если форменные элементы расположены равномерно (что является показателем хорошего перемешивания крови), приступают к подсчету. Подсчитывают число лейкоцитов в 25 больших квадратах (разделенных на 400 маленьких). Подсчет ведут в пределах маленького квадрата по рядам (от верхнего до нижнего).

25.Определение количества гемоглобина по Сали (гемометр), нормальное содержание НвА.

Определение уровня гемоглобина проводят в упрощенном колориметре — гемометре Сали. Этот прибор состоит из пластмассового штатива с 3 вертикальными гнездами. В боковых гнездах находятся 2 запаянные пробирки со стандартной жидкостью.

В среднее гнездо гемометра вставляют открытую сверху градуированную стеклянную пробирку того же диаметра, что и цветные стандарты. Градуированная пробирка имеет шкалу с делениями, показывающую количество гемоглобина в граммах на 100 миллилитров крови, то есть грамм-процентах (г%).

При геометре имеются специальная пи­петка для воды и стеклянная палочка для перемешивания.

В градуированную пробирку наливают до деления, помеченного цифрой «2 грамм-процента» (нижняя круговая метка) 0,1 грамм-процента раствора хлористоводородной кислоты. Затем набирают кровь в капиллярную пипетку до метки «0,02 миллилитра», всасывая е ртом через резиновую трубку. Обтерев кончик пипетки снаружи ватой, опускают ее в пробирку с 0,1 грамм-процента раствором хлористоводородной кислоты и осторожно выдувают кровь.

Повторными всасываниями и выдуваниями верхнего слоя жидкости пипетку ополаскивают. Пробирку несколько раз встряхивают и, заметив время, ставят в штатив. Для полного превращения гемоглобина в хлорид гематита требуется не менее 5 минут. Через 5 минут геометр поднимают до уровня глаз и сравнивают цвет испытуемой жидкости с цветом стандартов. Обычно, за исключением случаев крайне тяжелой анемии, он темнее, чем в стандартных пробирках.

С помощью неградуированной пипетки к испытуемому раствору добавляют по каплям дистиллированную воду, перемешивают стеклянной палочкой и сравнивают со стандартами. Как только цвет исследуемой жидкости станет одинаков с цветом стандартов, отмечают, какому делению шкалы соответ­ствует уровень жидкости (по нижнему мениску) в пробирке.

При соблюдении всех правил работы с гемометром у одного и то­го же больного при определении гемоглобина в разных порциях крови получают расхождение результатов в пределах ±0,3 грамм-процент

26.Определение ЦПК ( цветового показателя крови), отклонения от нормального уровня, значение.

Цветовой показатель крови является рассчетной величиной. Он показывает достаточно ли гемоглобина находится в одном эритроците.

Содержание гемоглобина в норме в одном эритроците колеблется от 27 до 33,3 пикограмм (пг), при этом величина 33,0 пг условно принята за единицу и названа цветовым показателем, значения которого в норме составляют соответственно 0,85 – 1,05.

ЦП = (гемоглобин (г/л) * 3) / первые 3 цифры количества эритроцитов в крови

Например, гемоглобин 134 г/л, эритроциты 4,26 млн/мкл, тогда цветовой показатель равен  (134 * 3) / 426 = 0,94.

Цветовой показатель в норме 0,85-1,05. При повышении цветового показателя говорят огиперхромии эритроцитов, и при снижении — о гипохромии. Именно на основании этих данных можно определить вид анемии