11. Методы диагностики иппп при взомт

ПЦР (хламидии, уреаплазмы, микоплазмы, гарднереллы, виру­сы, гонококк, ВИЧ, JIUPTbs, сифилис).

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — искусственный процесс многократного копирования (амплификации) специфической по­следовательности ДНК, осуществляемый in vitro. Копирование ДНК при ПЦР осуществляется специальным ферментом — ДНК-полиме-разой, как и в клетках живых организмов. ДНК-полимераза, двига­ясь по одиночной цепи ДНК (матрице), синтезирует комплементар­ную ей последовательность ДНК. Важно, что ДНК-полимераза не может начать синтез цепи ДНК «с нуля», ей необходима короткая «затравочная» цепь РНК или ДНК, к которой она может начать при­соединять нуклеотиды.

В нашей стране, согласно действующим нормативным докумен­там, для подтверждения диагноза трихомониаз используется в ос­новном бактериоскопический и культуральные методы. Другие ме­тоды диагностики в настоящее время не включены в действующие регламентирующие документы, в связи с чем диагноз, установлен­ный с их помощью, не будет считаться юридически правомочным.

Trichomonas vaginalis.

По данным зарубежных авторов, в последнее время для обнару­жения Trichomonas vaginalis широко используется и хорошо себя за­рекомендовала латексагглютинация.

Латексагглютинация (Latex agglutination test) — метод выявления антигена и антител, основанный на агглютинации частиц латекса, сенсибилизированных антигенами или антителами. Для изготовле­ния диагностических препаратов, в большинстве случаев, применя­ют полистироловые латексы с диаметром частиц от 1 до 0,3 мкм. По своей чувствительности реакция латексагглютинации значитель­но превышает иммунодиффузные тесты, реакцию преципитации в геле и встречный иммуноэлектрофорез не уступает реакции пас­сивной гемагглютинации и может конкурировать с иммунофермент-ным и радиоимунным анализами, прежде всего при использовании специальных анализаторов для учета Степени агглютинации. Пре­имуществом метода латексагглютинации является быстрота прове­дения реакции (5—10 мин), а также возможность длительного хране­ния диагностикума. Недостатком метода считают высокий процент ложнопозитивных результатов.

В последнее время появляются данные об использовании RAPD техники для изучения различных видов Trichomonas vaginalis, пато-генности и вирулентности трихомонад.

RAPD-PCR — современный молекулярно-генетический метод исследования, основанный на полимеразной цепной реакции ДНК с участием произвольных праймеров (RAPD-анализ). Метод иссле­дует локусы ДНК с помощью одиночных праймеров, узнающих ком­плементарные участки на обеих цепях ДНК. В отличие от аллозим-

ного, метод RAPD позволяет анализировать не только уни­кальную, но также некодирую-щую часть ДНК. Благодаря это­му, он успешно используется в ряде лабораторий для целей таксономии и характеристики генетической структуры популя­ций (в том числе и редких ви­дов).

N. gonorrhoeae diplococci.

Chlamydia trachomatis Chlamydia trachomatis

(яркие включения). (зеленовато-желтый цвет); эпителиаль-

ные клетки хозяина — красный цвет (Х.Хансфилд).

Согласно существующим правилам учета гонореи, этот диагноз может быть поставлен только при обнаружении гонококка с помо­щью бактериоскопического и/или бактериологического исследова­ния. У детей и лиц старшей возрастной группы бактериологическое подтверждение обязательно. При обследовании на гонорею бере­менных обследование проводится на любом сроке, но во второй по­ловине беременности материал из цервикального канала берут с особой осторожностью. Первое обследование проводится, как пра­вило, при взятии на учет; второе — при сроке беременности 32 нед., последующие — по показаниям.

Иммунофлуоресцентный анализ (ПИФ, НПИФ). Определяет мо-ноклональные антитела, меченные флуоресцентом. Чувствитель­ность метода - 98, специфичность — 90%. (Хламидиоз, микоуреа-плазменная инфекции).

Кулыпуральный метод (стандарт обнаружения всех видов инфек­ции. Его применение ограничено, так как сложно, неудобно транс­портировать).

За рубежом также, наиболее часто, применяются амплификаци-онные методы диагностики. Помимо ПЦР и ЛЦР в эту группу вхо­дит рибосомальная РНК амплификация (ТМА — «transcription-medi-ated-amplification»). На основе амплификационных методик разра­ботаны мочевые тесты, довольно удобные в амбулаторной практике, однако они не получили пока широкого распространения в нашей стране.