2. Порядок работы на приборе.

Спектрофотометр СФ-104 работает в четырех режимах измерения: фотометрический, спектральный, количественных измерений (измерения концентрации) и режим анализа ДНК/Белок. А также один режим общих настроек системы. Перед началом работы в любом из измерительных режимов целесообразно установить общие настройки.

Находясь в режиме «Настройки» пользователь может установить такие параметры, как длина волны смены ламп, вкл/выкл дейтериевой лампы, вкл/выкл галогенной лампы и т.д.

1. Установка длины волны смены ламп

Клавиша «1» («λ смены ламп») позволяет изменять длину волны, на которой происходит переключение между дейтериевой и галогенной лампами. После нажатия «1» система попросит ввести новое значение длины волны в нижней строке дисплея. Диапазон допустимых значений для параметра «λ. смены ламп» 330-390 нм. Для работы в видимой части спектра, введите - 390. После ввода нового значения длины волны нажмите «ВВОД» для подтверждения.

2. Кнопкой «3» включите галогеновую лампу («W лампа), вкл.

и прогрейте ее в течение 20 минут

3. Нажмите кнопку «5» («Режим упр.») Для управления с клавиатуры - значение параметра «Руч.»,

Количественный анализ целесообразно выполнять в спектральном режиме.

2.1. Работа в спектральном режиме.

2.1.1. Запись спектра поглощения.

Вернитесь в главное меню кнопкой «Возврат».

Нажмите кнопку «2».для перехода в спектральный режим

Нажмите кнопку F1. дисплей переходит в режим «Параметры»

1.Для коррекции темнового тока, нажмите кнопку «7».(Темновой ток). Процесс занимает около 40с.

Параметры
1. Раб. режим	Погл., Б
2. Скор. скан.	быстрая
3. Шаг	1.0
4. λ, диап.	1100.0 - 190.0
5. Диап. по У:	0.00 1.00
6. Лампа	W лампа
7. Темновой ток
Выбери пункт меню		23:11
		09/18

Рис.8. Меню «Параметры»

2- Кнопкой «1», - выберите режим – «Погл., Б»

3- Диапазон сканирования -400-750нм. Нажмите клавишу «4», введите начальную длину волны «400» и нажмите «Ввод», затем введите конечную длину волны «750», нажмите «Ввод»

4.- Клавишей «2» «Скор, скан.», - выберите «быстрая»

5- Клавишу «3» установите шаг сканирования 1,0.

7- Кнопкой «5» и установите масштаб по оси «у» 0,00 - 1

Коррекции нулевой линии

8-установите в рабочую ячейку №1 кювету с нулевым раствором (растворитель или холостая проба). Закройте крышку кюветного отделения и нажмите кнопу «НОЛЬ».

Запись спектра анализируемого образца.

9- вместо нулевого раствора установите анализируемый образец и нажмите кнопку «СТАРТ/СТОП». Начнется процесс снятия спектра.

Разметка пиков,

-нажмите кнопку «F2» и введя минимальное значение размечаемого пика/впадины, нажмите клавишу «Ввод». Переход между пиками осуществляется клавишами ► В нижней части дисплея – длина волны и абсорбционность Выберите длину волны, которая будет использована для количественных измерений.

а б

Рис. 9. Разметка пиков.

а - спектр поглощения, б - спектр пропускания.

В рабочем режиме система каждый последующий спектр накладывает на предыдущий. Для очистки дисплея от предыдущего спектра и снятия нового спектра с «чистого листа», необходимо перейти в меню параметры нажатием кнопки «F1» и клавишей «ВОЗВРАТ»-вернуться обратно к окну спектральных измерений. Выход из режима спектральных измерений производится с помощью кнопки «ВОЗВРАТ» и затем нажатия кнопки «Ввод».

ВЫПОЛНЕНИЕ РАБОТЫ НА КОМЬПЬЮТЕРЕ

1. Убедившись, что ячейка № 1 в кюветном отделении пуста и крышка кюветного отделения закрыта, включите питание прибора тумблером «сеть», расположенном на задней панели прибора.

2. Включите компьютера.

3. С рабочего стола запустите программу UV Win

Автоматически начнется процесс инициализации устройства (Рис. 10) Во время этого процесса прибор в течение 3 минут тестирует работоспособность всех узлов спектрофотометра.

Рисунок 10. Окно инициализация

После инициализации на мониторе появляются четыре окна с возможными режимами работы.

4. Закройте режимы: фотометрический, количественный, кинетика.

Режим «Спектральный» разверните на весь экран (Рис. 11)

Рисунок 11. Окно режима «Спектральный»

5. Проверьте параметры записи спектра (Рис.12), нажав последовательно: «Измерение», «Установка параметров». (Можно просто нажать F4.)

Рисунок 12. Окно «Параметры спектрального анализа»

6. В рабочую ячейку кюветодержателя №1 ничего не надо устанавливать. Образцом сравнения будет служить атмосфера.

Установите кювету с анализируемым спиртовым раствором аминосоединения в ячейку №2 и закройте крышку кюветного отделения.

7 . Проверьте установку 1 образца (Рис. 13)

П ри необходимости смены нажмите стрелку

Рисунок 13. Окно «Принадлежности»

8. Нажмите кнопку «Коррекция базовой линии» (Рис. 14)

Рисунок 14. Окно режима «Спектральный»

Нажмите ОК (Рис. 15).

Рисунок 15. Окно «Информация»

Начнется процесс коррекция базовой линии (Рис. 16)

Рисунок 16. Окно «Передача команды»

9. После окончания коррекции базовой линии, нажмите стрелку ►. (Рис. 17)

Рисунок 17. Окно «Принадлежности»

При этом под световой поток автоматически установится кювета с анализируемым раствором.

10. Нажмите «Старт» (Рис. 18).

Рисунок 18. Окно режима «Спектральный»

11. Нажмите ОК (Рис. 19). Начнется запись спектра анализируемого образца.

Рисунок 19. Окно «Информация»

12. После окончания записи следует определить длину волны максимума полосы поглощения. Для этого нажмите клавишу «Считывание спектра» (Рис. 20) вручную с клавиатуры стрелками   подведите курсор к максимуму полосы поглощения. Значения длины волны в нм и абсорбционности контролируют по цифрам в верхней части экрана. (Рис. 19)

Рисунок 20. Окно режима «Спектральный»

13. Данные занесите в лабораторный журнал. Определите положение аминогруппы относительно бензольного кольца.

таблица 1 Результаты измерения.

№ исследуемого образца	Количество полос поглощения в ближнем УФ.	Длина волны максимума полос поглощения, нм	Выводы о положении аминогруппы в молекуле
1	2	255 и 275
2	1	255
3	1	255
5	1	278
6	1	265

14. При необходимости записать спектр другого образца установите кювету с ним в ячейку №2 и закройте крышку кюветного отделения и нажмите кнопку «Старт».

Рисунок 21. Пример полученных Уф Спектров.

15. По окончании работы:

- удалить из кюветного отделения кювету с анализируемым образцом;

- промыть кювету;

- выйти из программы;

- выключить спектрометр нажав кнопку на задней стороне прибора;

- выключить компьютер.