Определение группы крови системы аво с помощью моноклональных антител анти-а и анти-в / цоликлоны анти-а и анти-в/.

Цоликоны анти-А и анти-В применяются для определения группы крови человека системы АВО взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток путем выявления антигенов А и В в эритроцитах стандартными антителами, содержащимися в цоликлонах. Названные цоликлоны представляют разведенную асцитическую жидкость мышей, содержащую иммуноглобулин М против антигенов А и В. Цоликлоны дают более быструю и более выраженную реакцию агглютинации, чем стандартные АВО-сыворотки.

При использовании цоликлонов исключается передача вируса гепатита и ВИЧ. Определяют группу крови при температуре +15 +25°С. Цоликлоны анти-А и анти-В выпускаются в жидком виде в ампулах или флаконах, жидкость окрашена в красный /анти-А/ и синий /анти-В/ цвет. Хранят их в холодильнике при температуре +2+8°С. Срок хранения 2 года.

Методика определения группы крови с помощью цоликлонов анти-а и анти-в

I. На фарфоровую пластинку или маркированную тарелку нано­сят по одной большой капле цоликлонов анти-А и анти-В.

2. Рядом наносят каплю исследуемой крови в 5 раз меньшего размера.

3. Смешивают каплю крови и цоликлоны отдельными палочками или уголками предметных стекол.

4. Пластинку /тарелочку/ покачивают и наблюдают за реакци­ей в течение

3 мин. Реакция обычно наступает в первые 3-5 сек. и проявляется в виде образования мелких красных агрегатов, а за­тем хлопьев.

5. Читают результат: 0 / I / - агглютинация отсутствует с цоликлонами анти-А и анти-В /кровь не содержит агглютинагенов А и В

А / II /- агглютинация наблюдается в цоликлоне анти-А /эритроциты крови содержат агглютинаген А /;

В /III/ - агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-В /эритроциты крови содержат агглютинаген В /;

АВ /IV/ - агглютинация наблюдается с цоликлонами анти-А и анти-В /эритроциты содержат агглютинагены А и В/.

6. При наличии агглютинации с цоликлонами анти-А и анти-В

/гр. крови AB / IV / для исключения неспецифической агглютинации про­изводят дополнительные контрольные исследования с изотоническим раствором хлорида натрия. Большую каплю /0,1 мл/ изотонического раствора смешивают с маленькой каплей /0,01 мл/ исследуемой крови,

Отсутствие агглютинации подтверждает принадлежность иссле­дуемой крови к АВ /IV/ группе. При наличии агглютинации проводят определение группы крови с использованием отлитых стандартных эритроцитов /перекрестный метод/.

ПРОБЫ НА СОВМЕСТИМОСТЬ

В настоящее время переливают только одногруппную кровь по системе АВО. Перед переливанием крови проводят пробы на совме­стимость, которые помогают не только предупредить ошибку в отношении групп крови АВО, но и выявить несовместимость при сен­сибилизации больного к факторам системы резус и антигенам дру­гих систем.

Пробы на совместимость проводят отдельно в отношении групп крови АВО и резус-фактора - Rho /Д/.

Проба на индивидуальную /групповую/ совместимость.

1. Пробу проводят при комнатной температуре.

2. Из вены больного берут 8-10 мл крови в пробирку с цитратом натрия и центрифугируют для получения плазмы /у экстрен­ного больного/. При плановом переливании кровь без стабилизато­ра отстаивают 24 часа для получения сыворотки.

3. На тарелку наносит 2-3 капли сыворотки больного и в 10 раз меньшую каплю крови донора.

4. Наблюдают 5 минут.

5. Если агглютинация отсутствует, кровь донора совместима.

6. Наличие агглютинации свидетельствует о недопустимости переливания денной крови.