Эритроциты

Эритроциты – красные, наиболее многочисленные форменные элементы крови, основное содержание которых составляет гемоглобин. В качестве унифицированных методов подсчета эритроцитов в крови приняты два: подсчет в счетной камере и в автоматическом счетчике.

Унифицированный метод подсчета эритроцитов

в счетной камере

Принцип. Подсчет эритроцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки.

Реактивы. 0, 9% раствор хлорида натрия.

Оборудование. Счетная камера Горяева. Микроскоп.

Ход исследования. Разводят исследуемую кровь в 200 раз. Для этого в сухую пробирку наливают 4 мл 0,9% р-ра хлорида натрия и помещают в р-р пипеткой 0,02 мл крови, тщательно промывают пипетку в верхнем слое физ. р-ра, перемешивают.

Подготовка счетной камеры

Счетную камеру и покровное стекло протирают сухой марлей. Стекло притирают к камере так, чтобы появились разводы по краям (это свидетельствует о требуемой высоте камеры – 0,1 мм). Тщательно встряхивают содержимое пробирки, затем пипеткой или палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла, следя за тем, чтобы под стекло не попали пузырьки воздуха, и жидкость равномерно заполнила камеру, не проникая в бороздки. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении на одну минуту для оседания эритроцитов. Подсчет эритроцитов производят под микроскопом с опущенным конденсором и малым увеличением (объектив 8*, окуляр 10*). Счет ведётся по диагонали камеры в пяти больших квадратах, разделенных на 16 малых, т.е. в 80 малых квадратиках. Для того, чтобы избежать повторного подсчета клеток, лежащих на линиях, принято считать клетки, располагающиеся на левой и верхней линиях квадрата.

Расчет количества эритроцитов в 1 мкл крови производят, исходя из разведения крови (200), объема малого квадрата мм³, числа сосчитанных квадратов (80):

г де Х – число эритоцитов в 1 мкл крови, а – число сосчитанных эритроцитов. В результате сокращения Х = а • 10000.

Общий объем эритроцитов

(Ht - гематокрит)

Гематокритная величина, или показатель гематокрита, дает представление о соотношении между объемами плазмы и форменных элементов, в основном эритроцитов. Принято гематокритной величиной выражать объем эритроцитов.

Унифицированный микрометод

Принцип. Центрифугирование крови в течение определенного времени при постоянном числе оборотов центрифуги с последующим определением результата по градуированным капиллярам.

Реактивы. Антикоагулянты – гепарин 5000 ед/мл разводят дистиллированной водой в соотношении 1: 5.

Оборудование. Центрифуга. Пипетки от аппарата Панченкова длиной 10-11 см.

Ход определения. В обработанную антикоагулянтом и высохшую пипетку набирают кровь из пальца до верхней метки (100 делений). Пипетку укупоривают, обтягивая ее резиновым кольцом, и центрифугируют 30-40 минут при 3000 оборотов в минуту.

Результат отмечают по градуировке капилляра, вычитая из 100 высоту столбика эритроцитов.

Цветной показатель

Цветной показатель отражает относительное содержание гемоглобина в эритроцитах. Падение его ниже нормы называется гипохромией, повышение – гиперхромией, нормальная величина цветного показателя – нормохромией.

(первые 3 цифры)

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Исследование СОЭ является одним из самых распространенных в клинической практике. Как правило, оно проводится одновременно с определением концентрации НB и количества лейкоцитов при профилактических осмотрах.

Унифицированный микрометод Панченкова

Принцип. Смесь крови с цитратом при стоянии разделяется на два слоя (нижний – эритроциты, верхний – плазма). СОЭ, т.е. величина столбика плазмы, будет различной в зависимости от физико-химических свойств крови. Обычно при воспалительных заболеваниях СОЭ повышается. В таких случаях столбик плазмы будет выше.

Реактивы. 5% раствор трехзамещенного цитрата натрия. Раствор должен быть нейтральным или слабощелочным.

Оборудование. Аппарат Панченкова, состоящий из штатива и капилляров.

Ход определения. Перед использованием химически чистый капилляр промывают цитратом натрия, затем набирают цитрат до метки 0,75 и выливают его в пробирку. Далее набирают кровь в капилляр до метки 0 и смешивают ее с цитратом, при этом получается соотношение крови и цитрата 4:1. Полученную смесь набирают в капилляр до метки и, плотно закрыв верхний конец пальцем, ставят капилляр в штатив, следя за тем, чтобы кровь не вытекла из капилляра. Капилляр закрепляют в штативе. Через один час отмечают скорость оседания эритроцитов по величине отстоявшегося слоя плазмы в миллиметрах.