Глава 2 основные принципы и ( этапы бактериологического исследования

Принципы бактериологического исследования, реализация которых имеет важнейшее значение для его эффективности, следующие.

1. Обдуманный квалифицированный выбор материала, подлежащего исследованию; для клинических образцов — с учетом характера и локализации патологического процесса, патогенеза заболевания и его стадии; для объектов окружающей среды — с учетом возможного значения их в качестве путей и факторов передачи микроорганизмов — возбудителей инфекции, значения в патологии человека, возможных сроков сохранения этих микроорганизмов в тех или иных объектах.

2. Отбор проб материала для исследования в необходимом и достаточном объеме с исключением возможности его дополнительной контаминации. Обеспечение наиболее благоприятных условий и сроков доставки материала для сохранения жизнеспособности искомых бактерий и подавления конкурирующей микрофлоры, при наличии таковой в исследуемом материале.

3. Выбор оптимального набора соответствующих питательных сред для первичного посева и накопления возбудителя с учетом характера материала, свойств искомого микроорганизма и посевных доз.

4. Соблюдение классических принципов тщательного изучения посевов на пластинчатых средах и правил отбора необходимого числа колоний для выделения чистых культур и дальнейшего их изучения.

5. Изучение фенотипических характеристик выделенных чистых культур в первую очередь биохимических свойств с максимально возможной стандартизацией условий их определения (в частности, с использованием коммерческих питательных сред и соответствующих реактивов).

При сомнении в чистоте культуры рассев на пластинчатые среды (неингибирующие или слабоингибирующие).

6. Определение согласно классификационным таблицам таксономического положения выделенной культуры в соответствии с задачами исследования (родовой, видовой, внутривидовой принадлежности).

Основанное на указанных принципах бактериологическое исследование проводят поэтапно, в определенной последовательности.

1. Посев доставленного материала на пластинчатые среды и среды обогащения. Для некоторых видов материалов осуществляют предварительную подготовку их для посева, а затем инкубацию посевов для всех видов при условиях, соответствующих свойствам искомых бактерий.

2. Изучение чашек с посевами на пластинчатых средах и высев со сред обогащения на соответствующие пластинчатые среды. Выделение чистых культур из намеченных колоний для дальнейшего изучения с использованием для этого комбинированных сред для первичной идентификации.

3. Учет результатов посева в комбинированные среды после 18—20 ч инкубации. Изучение морфологических и тинкториальных свойств. Посевы для воспроизведения тестов минимального, дифференцирующего ряда. При предположении о выделении шигелл или сальмонелл и наличии соответствующих эпидемиологических данных возможно ориентировочное изучение культур в реакции агглютинации с поливалентными сыворотками и в пробах с поливалентными бактериофагами.

4. Определение рода, а в ряде случаев и вида на основании, учета результатов посевов в среды минимального дифференцирующего ряда. Серологическая идентификация видов (сероваров) для некоторых энтеробактерий. Посевы для определения дополнительных биохимических признаков (при необходимости).

5. Учет дополнительных биохимических тестов. Определение эпидемиологических маркеров.