Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Скачиваний:
141
Добавлен:
14.06.2014
Размер:
53.17 Кб
Скачать

Курс «Специальная Микробиология»

Раздел «Частная Вирусология»

Занятие: ________ Дата:­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­__________

Тема:_______________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

Таблица 1. РГА для индикации вируса гриппа в аллантоисной жидкости.

Ингридиенты

Разведения вируссодержащего материала

Контроль эритроцитов

1:2

1:4

1:8

1:16

1:32

Изотонический раствор хлорида натрия,мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Аллантоисная жидкость (вируссодержащий материал), мл

0,5

Вылить в дез. р-р.

-

1% суспензия эритроцитов, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Перемешать, инкубировать при комнатной температуре в течение 30-60 мин.

Результаты:

Выводы: В аллантоисной жидкости обнаружен/не обнаружен вирус, обладающий гемагглютинирующей способностью. Титр вируса __________.

Таблица 2. Результаты РСК для идентификации серотипа вируса гриппа.

Результаты:

Разведения сыворотки

Контроли

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

Эритр.

Комплемента

Гемолит.

системы

Сыв.А.

Сыв.Б.

Сыворотка против вируса гриппа А.

Сыворотка против вируса гриппа В.

Выводы: РСК положительная с иммунной/нормальной сывороткой.

Титр антител в ____________________ сыворотке _________________________.

Таблица 3. Результаты РТГА для идентификации подтипа вируса гриппа.

Результаты:

Разведения сыворотки

Контроли

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

Эритр.

Вируса

Сыв.А.

Сыв.Б.

Сыворотка к вирусу гриппа А1 (H1N1)

Сыворотка к вирусу гриппа А3 (H3N2)

Выводы: РСК положительная с иммунной/нормальной сывороткой.

Титр антител в ____________________ сыворотке _________________________.

Таблица 4. Схема постановки РТГА для идентификации подтипа вируса гриппа.

Номера пробирок

1

2

3

4

5

Контроли

Разведения вируса

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

Вируса

Сыв. А1/А3

Эритр.

Изотонич.р-р. NaCl, мл

-

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

1,0

Исследуемый вирус 1:10,мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

вылить

0,5

-

-

Первый ряд:

Сыворотка к вирусу А1 (H1N1) 1:10, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

-

0,5

-

Второй ряд:

Сыворотка к вирусу А3 (H3N2) 1:10,мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

-

0,5

-

1% суспензия эритроцитов, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Результаты:

С сыв.к вирусу гриппа А1(H1N1)

С сыв.к вирусу гриппа А3 (H3N2)

Выводы: РТГА положительная с сывороткой ____, подтип вируса гриппа _____, в титре ______.

Таблица 5. Схема постановки РТГА с парными сыворотками для серологической диагностики гриппа.

Номера пробирок

1

2

3

4

5

6

Контроли

Разведения сыв.

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

Сыв.

Вируса

Эритр.

Изотонич.р-р. NaCl, мл

-

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

1,0

Исследуемая сыворотка 1:10, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

вылить

0,5

-

-

Вирусный диагностикум А1 (А3), 4 АЕ, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

-

0,5

-

1% суспензия эритроцитов, мл

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Результаты:

Первая сыворотка

Вторая сыворотка

Выводы: РТГА положительная с диагностикумом ____________. Титр антител в первой сыворотке __________, во второй сыворотке ___________; ___ - кратное нарастание титра антител во второй сыворотке позволяет/не позволяет подтвердить диагноз гриппа. Грипп вызван вирусом ______________.

Таблица 6. Результаты РТГА с парными сыворотками для серологической диагностики гриппа.

Результаты

Разведения сыворотки

Контроли

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

Вируса А1

Вируса А3

Эритроц.

Первой сыв.

Второй сыв.

Диагностикум А1(H1N1)

Первая сыворотка

Вторая сыворотка

Диагностикум А3 (H3N2)

Первая сыворотка

Вторая сыворотка

Выводы: РТГА положительная с диагностикумом ____________. Титр антител в первой сыворотке __________, во второй сыворотке ___________; ___ - кратное нарастание титра антител во второй сыворотке позволяет/не позволяет подтвердить диагноз гриппа. Грипп вызван вирусом ______________.

Рис. 1. Реакция биологической нейтрализации (РБН) в культуре клеток для идентификации аденовируса.

Аденовирус + сыворотка 3

Аденовирус + сыворотка 4

Аденовирус + сыворотка 7

Контроли:

Культ.клеток

Вируса

Сыв.3

Сыв.4

Сыв.7

Выводы:

Занятие: ________ Дата:­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­__________

Тема:_______________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________

______________________

Таблица 7. Схема постановки ИФА

Ингредиенты

Опыт

«Положительный контроль»

«Отриц.Контроль»

А1А2

B1B2

C1C2

D1D2

E1E2

F1F2

G1G2

H1H2

1.Буфер А, мл

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

Инкубация при комнатной температуре 10 минут

2.Сыворотка больного, мл

0,1

-

-

-

-

-

-

-

3.Стандартный антиген 100мг/мл, мл

-

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

вылить

-

4.Отрицательный контроль, мл

-

-

-

-

-

-

-

0,1

Инкубация при 37 оС в течение 20 минут

5.Конъюгат, мл

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

Инкубация при 37 оС в течение 20 минут

6.Субстрат, мл

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

0,1

Инкубация при комнатной температуре 20 минут

7. 50% Н2SO4, мл

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

Результаты: (отметить цветом)

Выводы: ИФА ____________________________________ (положительная/отрицательная)

Концентрация HBs антигена __________________________ мкг/мл.

Рис. 2. Реакция биологической нейтрализации (РБН) в культуре клеток для идентификации полиовируса.

Полиовирус + сыворотка I

Полиовирус + сыворотка II

Полиовирус + сыворотка III

Контроли:

Культ.клеток

Вируса

Сыв.I

Сыв.II

Сыв.III

Выводы:

Рис.3. РБН в культуре клеток с парными сыворотками для серологической диагностики полиоителита.

Первая сыворотка

Вторая сыворотка

Контроли

1:50

1:100

1:200

1:400

1:800

1:50

1:100

1:200

1:400

1:800

Культ.

клеток

Вируса

Первой

Сыворотки

Второй Сыворотки

Выводы: