7.3. Методи викликання суперовуляції у корів-донорів

Викликання суперовуляції у корів-донорів базується на підвищенні у їх крові вмісту ФСГ, стимулюванні за рахунок цього дозрівання багатьох фолікулів з регресі­єю жовтого тіла та овуляцією дозрілих фолікулів. З цією метою користуються СЖК, гонадотропними препаратами та їх синтетичними аналогами.

В тридцятих роках Коул і Харт, а опісля М. М. Завадовський встановили, що в сироватці крові кобил з 40-го по 130-й день жеребності містяться високі кон­центрації гонадотропних гормонів, що виробляються клітинами ендометрію. За своїми біологічними властивостями сироватковий гонадотропін подібний до го­надотропного гормону передньої долі гіпофіза, володіє фолікулостимулючою та лютеїнізуючою дією, при чому перша в 2-3 рази сильніша другої.

Кров від кобил беруть звичайно на 50—100-й день жеребності, з розрахунку 10 мл на 1 кг маси тварини. Із загальної кількості отриманої крові 40-60 % складає сиро­ватка, в 1 мл якої міститься від 1 до 300 10 гонадотропінів.

Ін'єкції такої сироватки жеребних кобил (СЖК) викликають у самок як фоліку-■ в стимулюючий, так і лютеїнізуючий ефект. Іноді на введення препарату виникають

207

Розділ 7

анафілактичні явища, щоб уникнути цього спочатку вводять 2 мл препарату, а тоді -при відсутності вказаних явищ, - решту.

Оптимальною дозою СЖК вважають 5 000-6 000 10 нативного чи 2 500-5 000 10 очищеного препарату. При збільшені дози зростає кількість незапліднених та дегене-рованих яйцеклітин.

В практиці тваринництва застосовують нативну, очищену, концентровану СЖК чи такі порошкоподібні (ліофільного висушування) її препарати, як інтергонан, маретро-пін, оваритропін, гонадотропін, фолігон, серогонадотропін, пергонал "Зегопо" та ін. На 2-3-й день після введення препарату спостерігається інтенсивний ріст фолікулів, які овулюють на 3-5-й день.

У зв'язку з великою різноманітністю тварин, рівня у них фолікулогенезу їх реак­ція на СЖК сильно коливається - від 0 до 100 фолікулів.

Особливістю сироваткового гонадотропіну є відносна його стабільність, внаслі­док чого достатньо одного введення препарату для досягнення бажаного ефекту. Слід проте мати на увазі, що тривала дія СЖК та залишкові її кількості в організмі не лише значно розтягують статевий цикл і овуляцію (інтервал між першою та остан­ньою овуляціями складає біля 56-ти год.), в зв'язку з чим в яйцепроводах виявляються різновікові та дегенеровані яйцеклітини, дещо порушується гормональний баланс та синхронність перистальтики яйцепроводів і матки. Лишок СЖК можна нейтралізува­ти введенням антисироватки проти неї.

Щоб ущільнити строки овуляції і домогтися одержання більш-менш подібних за віком ембріонів застосування СЖК можна поєднувати з хоріальним гонадотропіном, який вводять внутрішньовенно при появі перших ознак охоти.

На початку застосування препарату його вводили за 4-5 днів до очікуваної охоти. Зараз вважають, що найкраще його вводити при наявності у яєчнику активного жовто­го тіла діаметром біля 1,5 см, тобто на 10-12-й день циклу. Добрі наслідки дає в поді­бних випадках поєднання СЖК з простагландинами типу ПГ-Р2« чи їх аналогами.

Синтетичні аналоги ПГ-Р2« - естрофан, еструмат, ензапрост, естуфалан, аніпрост, клатрапростин, суперфан, динопрост, динолітик, люталіз, панацелян та ін. вводять згідно інструкцій. Наприклад, естрофан та еструмат вводять в дозі - 500 мкг по кла-простенолу, а люталіз та ензапрост - по 30 мг.

Крім СЖК (ГСЖК) для викликання суперовуляції використовують гіпофізарні го-надотропіни - екстракти з гіпофіза, очищені препарати ФСГ, грофолон, фолітропін, ФСГ-П, рилізінг-гормони і т. п.

На відміну від СЖК препарати ФСГ володіють вкороченим періодом напівжиття (біля 5-ти годин), тому для досягнення бажаного ефекту їх потрібно вводити багато­разово, 4-5 днів підряд, по два рази на день. Сумарна доза ФСГ складає від 30 до 50 мг. її екстрагують із 100-500 гіпофізів свиней, овець чи великої рогатої худоби, що робить обробку дорогою, хоча високоефективною. Для підвищення стимулюю­чого ефекту гіпофізарного препарату ФСГ-П застосовують його низхідні дози, на­приклад, 1-й день вводять з 12-годинним інтервалом по 5 і 6 мг; 2-й день - 5 і 6 мг;

208

Трансплантація ембріонів

3-й день - 3 і 3 мг; 4-й день - 2 і 2 мг; сумарна доза - 32 мг, або - 7 і 7 мг; 6 і 6 мг; 4 і 4 мг, сумарна доза - 40 мг.

Препарат ФСГ-П що надходить на міжнародний ринок, розфасований у флакони по 50 мг, до яких додають розчинник. Зберігати розчинений препарат можна лише в холодильнику, але не довше 12 годин.

Для біотехнологічної обробки донорів запропоновано різні схеми. При так званому Ірландському методі, який базується на застосуванні СЖК перед початком регресії жов­того тіла, на 16-17-й день статевого циклу, корові вводять 1 500-3 00010 ГСЖК, на 19-20-й з 12-годинними інтервалами - по 10 мг естрадіол-бензоату (для кращого виявлення охоти) і на 21-й день - 1 500-3 000 10 хоріального гонадотропіну внутрішньовенно.

"Данський метод" метод передбачає попереднє викликання за допомогою проста­гландину лютеолітичного ефекту. Для більшої гарантії простагландин вводять двічі, з інтервалом 11 днів, визначають час появи охоти (вважаючи цей день за "нульовий") і на 8—13-й день після цього, тобто в активну лютеїнову фазу, роблять ін'єкцію 1 500— З 000 ІО ГСЖК.

"Французька" схема підготовки групи корів-донорів передбачає попередню синхронізацію у них охоти за допомогою синхромату Б (аналог простагландину, що містить в своєму складі також прогестерон та естрадіол), який імплантують твари­нам під шкіру основи вуха. На 9-й день імплант видаляють, після чого вводять на 19—22-й з 12-годинними інтервалами ФСГ, а на 24-й- простагландин Р2а для при­скорення розсмоктування жовтого тіла.

Незалежно від застосованої схеми підготовки донорів (гормонограма), в ній також визначають і терміни обробки реципієнтів, оскільки на практиці їх готують паралель­но з донорами.

Для збільшення виходу ембріонів та підвищення їх біологічної повноцінності ко-ровам-донорам вводять протягом біотехнологічної обробки декілька разів також віта­мінні препарати (вітаміни, 120-150 тис. ІО; вітамін Е, 80-100 мг) та мікроелементи ■ йодистий калій) з кормом щоденно по 100-200 мг/гол.

Ефективною є 33-денна схема, головними ланками якої є дворазове введення ПГ-р2« (з 11-денним інтервалом), 6-разові ін'єкції вітамінів А, Д, Е (з 5-денним ін­тервалом) та аскорбінової кислоти, 4-денні введення низхідних доз ФСГ-П сумарно З 2 мг (В. Яблонський).

Яскраво виражена охота у донора свідчить про добру реакцію яєчників на гормо­нальні препарати.

Головним методом оцінки стану яєчників у ветеринарній практиці залишається ректальна пальпація, хоча вона не дозволяє точно встановити кількість дозрілих фо-г.кулів. Крім того, досліджувати яєчники у донорів можна лише після овуляції. Тому практично про реакцію яєчників на гормональну обробку судять за кількістю виявле­них в яєчнику жовтих тіл (рис. 42) та за числом вимитих ембріонів і яйцеклітин. При і "сутності у корів реакції на обробку їх виключають з числа донорів.

209

Розділ '