Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Проблемы_биокатализа_и_ферменты_Лекция_3_PDF

.pdf
Скачиваний:
10
Добавлен:
15.04.2015
Размер:
2 Mб
Скачать

ПОЛУЧЕНИЕ ВЕЛИЧИНЫ Vmax и KM

В настоящее время имеются специальные компьютерные программы, куда вводятся экспериментальные данные и получают более точные величины Vmax и KM

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

31

ЕДИНИЦА АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ

А.

В СИСТЕМЕ СИ: 1 катал – количество фермента, превращающее

1 моль субстрата за 1 секунду в стандартных условиях:

 

 

насыщение фермента субстратом,

 

 

оптимальный pH и t=25OC (30OC)

Б.

МЕЖДУНАРОДНАЯ ЕДИНИЦА (МЕ или Е): количество фермента,

превращающее 1 мкмоль субстрата за 1 минуту в стандартных

 

 

условиях.

 

 

1 МЕ = 16,67 нкатал (нанокатал)

Удельная активность – активность фермента, отнесенная на 1 мг белка.

Молекулярная активность – отнесенная на 1 моль фермента.

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

32

СПОСОБЫ РЕГУЛЯЦИИ (CONTROL)

АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ

 

Влияние

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Индукция и

 

 

 

 

 

концентрации

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Деградация

 

Амплификация

 

субстрата,

 

 

 

репрессия

 

 

 

 

 

Изменение рН

продукта,

 

Активация

 

биосинтеза

 

молекул

 

(увеличение

кофермента

 

проферментов

 

белка

 

фермента

 

копий) генов

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Химическая модификация молекул фермента (например, фосфорилирование, дефосфорилирование)

Влияние активаторов, ингибиторов, аллостерических (регуляторных) ферментов

Изменение

активности

имеющихся в клетке молекул фермента

Изменение

проницаемости мембраны; компартментация (пространственное

разобщение); образование

надмолекулярных

комплексов

Изоферменты

Изменение интенсивности различных метаболических процессов

ВСЕ ЭТО РЕГУЛИРУЕТСЯ ГОРМОНАМИ

Изменение

количества

молекул фермента в клетке

Увеличение числа копий мРНК

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

33

СПОСОБЫ РЕГУЛЯЦИИ (CONTROL)

АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ

1

6

0

2

 

Изменение

 

3

активности

5

 

имеющихся в клетке молекул фермента

10

4

Изменение интенсивности различных метаболических процессов

7

8

Изменение

количества

молекул фермента в клетке

9

ВСЕ ЭТО РЕГУЛИРУЕТСЯ ГОРМОНАМИ

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

34

СПОСОБЫ РЕГУЛЯЦИИ (CONTROL)

АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ

0.Активация неактивных проферментов:

 

 

 

HCl

 

 

А.

 

 

 

 

 

ПЕПСИНОГЕН

 

 

ПЕПСИН

 

 

 

 

 

неактивный

 

 

активный

 

 

ПЕПТИДЫ

 

 

 

 

 

 

 

Б.

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

35

СПОСОБЫ РЕГУЛЯЦИИ (CONTROL)

АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ

1.Влияние CS, t, ионной силы, СР, концентрации кофермента

2.Влияние рН

3.Влияние активаторов (ионы металлов) или ингибиторов (часто лекарства), либо аллостерических эффекторов:

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

36

ВЛИЯНИЕ АКТИВАТОРОВ (ИОНЫ МЕТАЛЛОВ) ИЛИ ИНГИБИТОРОВ (ЧАСТО ЛЕКАРСТВА), ЛИБО АЛЛОСТЕРИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОРОВ:

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

37

ВЛИЯНИЕ АКТИВАТОРОВ (ИОНЫ МЕТАЛЛОВ) ИЛИ ИНГИБИТОРОВ (ЧАСТО ЛЕКАРСТВА), ЛИБО АЛЛОСТЕРИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОРОВ:

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

38

ВЛИЯНИЕ АКТИВАТОРОВ (ИОНЫ МЕТАЛЛОВ) ИЛИ ИНГИБИТОРОВ (ЧАСТО ЛЕКАРСТВА), ЛИБО АЛЛОСТЕРИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОРОВ:

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

39

 

 

ВЛИЯНИЕ АКТИВАТОРОВ (ИОНЫ МЕТАЛЛОВ) ИЛИ ИНГИБИТОРОВ (ЧАСТО ЛЕКАРСТВА), ЛИБО АЛЛОСТЕРИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОРОВ:

РЕАКЦИЯ В ОТСУТСТВИЕ ИНГИБИТОРА

КОНКУРЕНТНОЕ

ИНГИБИРОВАНИЕ

КОНКУРЕНТНЫЙ

ИНГИБИТОР (НАПРИМЕР, СУЛЬФАМИДЫ, ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ)

НЕКОНКУРЕНТНОЕ

ИНГИБИРОВАНИЕ

НЕКОНКУРЕНТНЫЙ ИНГИБИТОР (НАПРИМЕР, СВИНЕЦ, РТУТЬ)

ФЕРМЕНТЫ И ПРОБЛЕМЫ БИОКАТАЛИЗА. ЧЕРНОВ Н. Н. 2013.

40