книги2 / 77

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК РАСТЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ИЗОХИНОЛИНОВЫЕ АЛКАЛОИДЫ

Трифонова П.В., Куркина А.В., Куркин В.А., Тухбатуллина Р.Г.

ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, Самара, p.v.trifonova@samsmu.ru

Культура клеток и тканей растений является эффективной технологией получения различных вторичных метаболитов, в том числе и для использования в фармацевтической промышленности. Изохинолиновые алкалоиды растений семейства Маковые (Papaveraceae) являются перспективным источником лекарственных растительных препаратов.

Вкачестве исследуемых образцов были выбраны каллусные культуры мачка (Glaucium flavum Crantz) и чистотела (Chelidonium majus L.), предоставленные сотрудниками Казанского государственного медицинского университета.

Качественный анализ образцов проводился с использованием люминесцентной микроскопии на микроскопе марки «Альтами» ЛЮМ-2 (Россия).

Входе люминесцентного анализа культуры клеток мачка было выявлено слабое свечение тканей при длине волны 420 нм (жёлтое свечение), при длине волны 360 нм (яркое жёлто-зелёное свечение), которые мы связываем с наличием алкалоидов изохинолиновой природы. Данный характер и тип свечения был отмечен на поперечных срезах различных органов мачка жёлтого. В некоторых образцах культуры клеток мачка свечения тканей при длине волны 420 нм и 360 нм отмечено не было, что, вероятно, свидетельствует о невысоком содержании алкалоидов в тканях.

Входе люминесцентного анализа культуры клеток чистотела было выявлено слабое свечение тканей при длине волны 420 нм (жёлтое свечение), при длине волны 360 нм (синее свечение). Наблюдаемый характер и тип свечения также был отмечен на поперечных срезах различных органов чистотела большого.

Анализ исследуемых образцов также был проведен с помощью метода тонкослойной хроматографии. В качестве хроматографической системы была выбрана система н-бутанол- уксусная кислота-вода 4:1:2. При детектировании хроматограммы в УФ-свете при длинах волн 254

и366 нм, а также после обработки хроматограмм реактивом Драгендорфа в образцах каллусных культурах мачка и чистотела были идентифицированы изохинолиновые алкалоиды, представленные также и в интактных растениях.

Вцелях качественной оценки образца культуры клеток чистотела нами была использована ранее разработанная методика оценки сырья и препаратов чистотела и мачка методом спектрофотометрии. УФ-спектр спиртового извлечения чистотела большого имеет 3 характерных максимума: 274, 340, 444 нм. Спектрофотометрический профиль извлечения из культуры клеток отличался от профиля извлечения из образца растения.

УФ-спектр 70% спиртового извлечения из травы мачка жёлтого характеризуется максимумами поглощения при 280 и 300 нм. УФ-спектр спиртовых извлечений из образцов культуры клеток мачка имели схожий спектрофотометрический профиль, однако их максимумы поглощения отличались от таковых максимумов извлечений из травы мачка жёлтого.

При рассмотрении УФ-спектров извлечений из культур клеток мачка жёлтого и чистотела большого можно сделать вывод о схожести их спектрофотометрических профилей.

Таким образом, можно сделать вывод о различиях в качественном составе культуры клеток

иинтактных растений. Вероятно, доминирующие алкалоиды синтезируются в культуре клеток на более поздних стадиях развития растений.

221

ЭКСТРАКТ МОРСКОЙ ЗЕЛЕНОЙ ВОДОРОСЛИ ULVA LACTUCA L., СОДЕРЖАЩИЙ ПОЛИФЕНОЛЫ, КАК АНТИОКСИДАНТНОЕ СРЕДСТВО ПРИ ОСТРОМ СТРЕССЕ

Фоменко С.Е.

ФГБУН Тихоокеанский океанологический институт им. В.И. Ильичева ДВО РАН, Владивосток, sfomenko@poi.dvo.ru

Морские водоросли являются источником важных биологически активных соединений: липиды, аминокислоты, фенольные соединения, полисахариды и др. Перспективную группу веществ морского происхождения составляют полифенолы, обладающие высокой антиоксидантной активностью, которые играет важную роль в жизнедеятельности морских макрофитов, что позволяет им быстро реагировать на внешний стресс и выполнять защитные функции. В то же время, многокомпонентный состав фенольной составляющей экстрактов из водорослей обусловливает широкий спектр их фармакологической активности, включающей регулирующее влияние на многочисленные нарушения гомеостаза при патологических процессах в организме животных и человека. Однако возможные эффекты экстрактов, выделенных из многочисленных видов водорослей, еще в полной мере не исследовались. Особый интерес представляют массовые виды морских водорослей, имеющих пищевое значение, в частности Ulva lactuca L.– ульва латук (салатная). Целью работы явилось оценка антиоксидантной активности экстракта, выделенного из таллома зеленой водоросли - Ulva lactuca Linnaeus, 1753, и его влияние на показатели антиоксидантной защиты печени и плазмы крови крыс при остром стрессе. Водоросли собирали в летние месяцы в прибрежных водах залива Петра Великого Японского моря, затем сушили при t <500С, измельчали и экстрагировали 70%-ным этиловым спиртом методом реперколяции. Общее содержание полифенолов в образцах водорослевого экстракта составляло 16,2±1,8 мг-экв ГК/г сухого экстракта. Эксперимент проводили на белых беспородных крысах массой 180-200 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария. Острый стресс моделировали путем вертикальной фиксации животных за дорcальную шейную складку на 24 часа. В качестве препарата сравнения использовали аптечный экстракт элеутерококка Eleutherococcus senticosus (Rupr. & Maxim.) Maxim.

- известного адаптогена и стресс-протектора. Освобожденный от спирта экстракты U. lactuca и элеутерококка, вводили животным в виде водной взвеси в дозе 100 мг общих полифенолов на кг массы тела в желудок через зонд дважды: непосредственно перед вертикальной фиксацией и через 6 часов после первого введения. Животным контрольной группы и группы «стресс» вводили дистиллированную воду в объеме, равном объему вводимых препаратов. В данной модели проявились все атрибуты стресса: гипертрофия надпочечников, инволюция тимуса и селезенки, изъязвления слизистой желудка и кишечника. Также отмечались нарушения системы антиоксидантной защиты, которые проявлялись в снижении активности антиоксидантных ферментов в плазме крови, содержания восстановленного глутатиона в печени, а также в увеличении уровня малонового диальдегида. Под действием экстрактов из U. lactuca и элеутерококка у животных на фоне стресса прослеживалась тенденция к стабилизации исследуемых показателей антиоксидантной защиты. При этом данные показатели у животных, получавших экстракт из U. lactuca, превосходили аналогичные параметры в группе животных, получавших экстракт элеутерококка. Это обусловлено тем, что основными компонентами полифенольной фракции U. lactuca являются флавоноиды, различные фенольные кислоты и др., которые, вероятно, проявляют более высокую антиоксидантную активность в отличие от растительных полифенолов элеутерококка. Зеленая морская водоросль U. lactuca является перспективным видом сырья для создания препаратов, способных активизировать антиоксидантную защиту организма для предупреждения стресс-индуцированных расстройств.

222

ОЦЕНКА АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТА ХМЕЛЯ

(HUMULUS LUPULUS L.)

Халиуллина А.С., Шакирова Д.Х., Хайруллина А.Р., Алиуллина Л.А.

ФГБОУ ВО Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань, anela_90@mail.ru

В настоящее время в условиях растущей мировой проблемы антибиотикорезистентности современные химико-фармацевтические исследования связаны с изысканием новых соединений, обладающих антибактериальной активностью, в том числе в отношении резистентных к антибиотикам штаммов микроорганизмов. Многообещающим направлением в решении этой проблемы является использование препаратов на основе биологически активных веществ (БАВ) растительного происхождения [1,2,3].

Humulus lupulus L. является достаточно популярным и широко применяемым в медицине лекарственным растением. Официальным лекарственным растительным сырьём хмеля обыкновенного признаются соплодия, которые используются в качестве антидепрессантного, седативного, противовоспалительного и антимикробного средства.

Среди основных классов БАВ, которые вносят существенный вклад в биологическую активность «шишек» хмеля, выделяют следующие: терпеноиды эфирного масла (0,3-1% от массы сырья); горькие кислоты – ацилфороглюциды, представленные α- и β-кислотами (5-20% от массы сырья); халконы – пренилированные флавоноиды (до 1% от массы сырья) [1].

Исследование направлено на изучение антимикробной активности экстракта, полученного из соплодий хмеля обыкновенного в отношении патогенных бактерий полости рта: Staphylococcus aureus, Streptococcus sangvinis, Streptococcus gordonii, Streptococcus sobrinus, Streptococcus salivarius.

Растительный материал был заготовлен на территории УПЦ «Ботанический сад» КФУ в июне 2020 г. Оценку качества сырья проводили по ФС 2.5.0046.15. Государственной Фармакопеи XIV издания (содержание эфирного масла составило 2,71±0,05%; содержание флавоноидов ˗ 0,41±0,01%). В качестве экстрагента использовали 70% этиловый спирт при гидромодуле экстракции 1:5. Экстракцию проводили при 60°C с помощью автоматизированной системы рефлюкс-экстракции (SUB Aqua Pro, Biosan-Grant, Латвия). Экстракты охлаждали до комнатной температуры, отделяли шрот, полученные извлечения хранили при температуре 4°C в защищённом от света месте.

Антимикробная активность была протестирована против пяти патогенных грамположительных бактерий: S. aureus, S. sangvinis, S. gordonii, S. sobrinus, S. salivarius методом серийных микроразведений в 96-луночных культуральных планшетах в соответствии с требованиями EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing).

Микропланшеты термостатировали при 37°C в течение 24 часов. Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) была определена как самая низкая концентрация экстракта, которая предотвращает видимый рост бактерий в лунках микропланшетов. Результаты показали, что тестируемый образец активен в отношении S. aureus, S.sangvinis и S. gordonii в разведениях 1:80, S. sobrinus, S.salivarius в разведениях 1:40.

Литература:

1.Lin, M., Xiang, D., Chen, X., & Huo, H. Role of Characteristic Components of Humulus lupulus in Promoting Human Health // Journal of agricultural and food chemistry. 2019. V. 67. I. 30. P. 8291–8302. https://doi.org/10.1021/acs.jafc.9b03780

2.Lyu JI, Ryu J, Seo K-S, Kang K-Y, Park SH, Ha TH, Ahn J-W, Kang S-Y. Comparative Study on Phenolic Compounds and Antioxidant Activities of Hop (Humulus lupulus L.) Strobile Extracts. // Plants. 2021. V.11. P. 135. https://doi.org/10.3390/plants11010135

3.Kebede T, Gadisa E, Tufa Antimicrobial activities evaluation and phytochemical screening of some selected medicinal plants: A possible alternative in the treatment of multidrug-resistant microbes // PLOS ONE . 2021. V.16. I.3. P. 1-16. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0249253

223

ИССЛЕДОВАНИЕ ФЛАВОНОИДОВ БОДЯКА ПОЛЕВОГО

Шамсутдинова С.Р., Пупыкина К.А., Старцева Л.В., Баламетова Р.Г.

ФГБОУ ВО Башкирский государственный медицинский университет Минздрава России, Уфа, pupykinaka@gmail.com

В последнее время, значительный интерес представляет изучение лекарственных растений, применяемых в нетрадиционной медицине, так как многие из них являются ценными источниками биологически активных веществ (БАВ). Бодяк полевой Cirsium arvense (L.) сем. Астровых (Asteraceae) является одним из наиболее часто встречающихся сорняков на территории РФ. В народной медицине бодяк применяется как противовоспалительное, антиоксидантное, противомикробное средство, его используют в качестве средства от подагры и ревматизма, при нервных заболеваниях, эпилепсии. Однако, химический состав бодяка полевого изучен недостаточно, поэтому актуальным является его подробное изучение для обоснования применения его в научной медицине [2].

Целью исследования являлось изучение фенольных соединений корней и травы бодяка полевого из флоры Башкортостана. Объектами исследования служили образцы сырья бодяка полевого, заготовленного в Республике Башкортостан. Для качественного анализа использовались качественные реакции и хроматографический анализ, количественное определение флавоноидов проводили с использованием метода спектрофотометрии [1, 3].

Результаты. Качественное обнаружение фенольных соединений осуществляли с помощью качественных реакций, а также исследование флавоноидов, гидроксикоричных кислот проводилось методом тонкослойной хроматографии на пластинках «Sorbfil ПТСХ-П-А-УФ». Для анализа готовили извлечение из сырья бодяка полевого, используя в качестве экстрагента 70 % спирт этиловый. В качестве растворов сравнения использовали 0,05% растворы стандартных образцов. Проводился подбор систем растворителей, в которых наблюдалось наилучшее разделение смеси фенольных соединений. Для травы бодяка полевого оптимальной оказалась система бутанол - кислота уксусная - вода (4:1:5), а для корней - этилацетат - кислота муравьиная - вода (67:32:5). Хроматограмму высушивали, просматривали в видимом, УФ-свете и обрабатывали хромогенными реактивами. При этом на хроматограмме в исследуемом растворе травы бодяка обнаружено 7 зон адсорбции, соответствующие по значениям Rf: 0,43 - рутину; 0,48 - лютеолин-7-гликозиду; 0,51 – линарину; 0,64 – хлорогеновой кислоте; 0,87 – кофейной кислоте; 0,90 – лютеолину. При анализе корней бодяка обнаружено 4 зоны адсорбции с Rf: 0,47 - рутин; 0,50 – линарин; 0,67 - хлорогеновая кислота; 0,89 – кофейная кислота; 0,91 - лютеолин. Результаты количественного определения фенольных соединений представлены в таблице 1.

Таблица 1. Показатели содержания БАВ в сырье бодяка полевого

Выводы. Изучен качественный состав фенольных соединений в траве и корнях бодяка полевого и определено количественное содержание флавоноидов в пересчете на апигенин.

Литература:

1.Государственная Фармакопея Российской Федерации, XIV издание, Том IV. Лекарственное растительное сырье. М.: «Медицина», 2018. 6074-6083, 6622-6633, 6599-6605 [Электронный ресурс] Режим доступа: http://www.femb.ru/femb/pharmacopea.php.

2.Определитель высших растений Башкирской АССР: сем. Brassicaceae - Asteraceae / АН СССР, УО БНЦ, Ин-т биологии; [Ю. Е. Алексеев и др.]; отв. ред. Е. В. Кучеров, А. А. Мулдашев. – М. Наука, 1989 – 374 с.

3.Пупыкина, К.А., Шамсутдинова, С.Р., Старцева, Л.В. Разработка метода стандартизации травы бодяка полевого по содержанию флавоноидов // Вопросы обеспечения качества лекарственных средств. 2021. №1 (31). – С. 35-40.

224

РЕЛАКСАНТНОЕ ДЕЙСТВИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО ПОЛИФЕНОЛА НА СОКРАТИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ АОРТЫ КРЫСЫ

Якубова Н.Х., Режепов К.Ж., Гафуров М.Б., Алимбаева Ш.Б.*, Омонтурдиев С.З., Гайибов У.Г., Арипов Т.Ф.

Институт биоорганической химии имени А.С. Садыкова АН РУз, Ташкент, Узбекистан, siroj2012@mail.ru

*Национальный университет Узбекистана, Ташкент, Узбекистан, r_k_zh@mail.ru

Заболевания сердечно-сосудистой системы, которые продолжают сохранять ведущие позиции в общей структуре заболеваемости и смертности в большинстве стран мира, являются важнейшей медико-социальной проблемой современности. Ведущим фактором риска развития сердечно-сосудистых заболеваний является артериальная гипертензия, которая в последние годы имеет тенденцию широкого распространения [1-6]. В связи с этим изучению механизмов модуляции кальциевого гомеостаза ГМК и, особенно, механизмов фармакологической регуляции транспортных систем, участвующих в его поддержании, в настоящее время уделяется особое внимание.

Методы исследования. Исследования проводились на препаратах в виде колец (шириной 3- 4 мм) изолированных из аорты крысы, сократительную активность регистрировали в изометрическом режиме с помощью датчика натяжения FT-03 (Grass, США). Препараты фиксировались в ячейке и перфузировались раствором Кребса при 370С.

Результаты и их обсуждения. Предварительных экспериментах было обнаружено, что полифенола NX-1 широком диапазоне концентраций не влияет на базальный тонус препаратов аорты крысы. При этом релаксантное действие полифенола NX-1 начинало проявляться уже при концентрации 10 мкМ. Релаксантное действие полифенола NX-1 имело дозо-зависимый характер, и при увеличении концентрации полифенола в диапазоне 10-120 мкМ сила сокращения препарата аорты крысы, индуцированная 50 мМ КСl снижалась от 12,1 4,2 до 71,2 3.8%. Величина ЕC50%, концентрация при которой полифенол расслаблял препарат аорты на 50%, составляла 46,9 мкМ.

Выводы. Эти данные указывают, что КСl-индуцированное сокращение аорты крысы в основном обеспечивается активацией потенциал-зависимых Са2+-каналов плазмолеммы ГМК и ионами Са2+ поступающим по ним, можно предположить, что наблюдаемое релаксантное действия полифенолa возможно реализуется в результате блокирования им этих каналов.

Литература:

1.Catterall W.A. Annual Review of Cell and Developmental Biology, No. 16, Pp. 521-555, 2000.

2.Gao B. Journal of Biological Chemistry, Vol. 275, Pp. 12237–12242, 2000.

3.Hughes A.D. Journal of Vascular Research, Vol. 32. Pp. 353–370, 1995.

4.Laporte R., Hui A., Laher I. Pharmacological Reviews, Vol. 56. Pp. 439–513, 2004.

5.Vandier С., Le Guennec J.Y., Bedfer G. Advances in Physiology Education, Vol. 26. Pp. 195–203, 2002.

6.Webb R.C. Advances in Physiology Education, Vol. 27. Pp. 201–206, 2003.

225

ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ПРИРОДНЫХ ПОЛИФЕНОЛОВ -АНТИОКСИДАНТОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ КОРОНАВИРУСОВ COVID-19

Яшин А.Я., Яшин Я.И.

Группа компаний «Сайтегра», Москва, yashin@scientegra.com

Во время пандемии во многих странах обратили внимание, что на ход болезни коронавирусом влияет выбор пищи и питание. Опубликованы сотни статей на эту тему. Описаны пищевые системы и изменения пищевых предпочтений. Отдельно выделена роль Средиземноморской диеты. Далее во многих работах было показано, что основное ингибирующее влияние питания на коронавирус связано с содержанием антиоксидантов в продуктах питания. Серия работ посвящена роли натуральных продуктов, содержащих полифенолы-антиоксиданты, отдельно выделялась роль флавоноидов. Основные продукты, содержащие большие количества полифенолов и потребление которых тормозило развитие болезни: овощи, фрукты, ягоды, зеленый и черный чай, какао, морские водоросли, прополис и другие медопродукты. Исследована роль отдельных сильных полифенолов-антиоксидантов: кверцетина, ресвератрола, эпигаллокатехин галлата, куркумина, изофлавоноидов, хальконов, мелатонина, глутатиона, гесперидина, антоцианинов. Доказана большая роль витаминов, в частности, витаминов D, C, B12 и микроэлементов селена, цинка, меди, магния и др. Опубликованы работы, показывающие роль окислительного стресса, т.к. одним из показателей здоровья человека является окислительновосстановительный баланс, антиоксидантный статус, редокс-баланс, в связи с тем ,что при всех патологиях этот показатель уменьшается в сторону окисленных форм, в том числе и при вирусных заболеваниях. Редокс потенциал пропорционален иммунному статусу. Для поддержания редоксбаланса нужно регулярно потреблять пищевые продукты и напитки с сильными антиоксидантами. Кроме антиоксидантных действий природные полифенолы обладают еще противовирусным и антиканцерогенным действием. В целом полифенолы-антиоксиданты неотъемлемая часть здорового и полноценного питания. Антиоксиданты относятся к микронутриентам, они в большей степени, чем другие компоненты пищи защищают человека от опасных болезней и преждевременного старения. Есть предположение, что бессимптомные больные при COVID имеют высокий антиоксидантный статус, который можно легко измерить прибором «Близар».

Можно привести некоторые подтвержденные механизмы действия полифенолов против коронавирусов: ингибирование протеазы вируса, иммуномодулирующая активность, блокирование рецепторов ACE-11, против воспаления и снижения цитокинового шторма, уменьшение прилипания, адгезии и размножения вирусов, нейтрализация выступов, шипов белков и гликопротеинов коронавируса, эффективная терапия, роль микробиоты на ход болезни, увеличение сопротивления коронавирусу, терапевтический потенциал ресвератрола, кверцетина, эпигаллокатехин галлата и куркумина, подтверждение клиническими исследованиями. Таким образом, можно утверждать, что природные полифенолы-антиоксиданты воздействуют на коронавирус на всех стадиях болезни. На базе полифенолов можно создать универсальные лекарства от коронавирусов. Общее мнение вирусологов - человечество ждут новые опасные эпидемии с большим процентом смертности. Нужно заранее к ним готовиться широким фронтом. Нужно также активно использовать явление синергизма и использовать смеси полифенолов - антиоксидантов, которые значительно усиливают совместное противовирусное действие.

226

СОДЕРЖАНИЕ

Дубоносов А.Д., Николаева О.Г., Карлутова О.Ю., Дубоносова И.В., Брень В.А. 21

ГИДРОКСИ(ДИГИДРОКСИ)КУМАРИН-АЗОМЕТИНИМИНОВЫЕ КОНЪЮГАТЫ ДЛЯ ЭКСПРЕСС-ОБНАРУЖЕНИЯ ТОКСИЧНЫХ ИОНОВ

228